遺伝性溶血性貧血患者におけるパルボウイルスB19感染

HPV-B19 は、ヒトの病気を引き起こす最小の一本鎖直鎖 DNA ウイルスです。 このウイルスの最も一般的な感染手段は、呼吸器分泌物への曝露です。 感染は、宿主の血液学的および免疫学的状態に応じて、無症候性から重篤な合併症に至るまでのさまざまな症状を引き起こします。 この病原性ウイルスに関連するリスクを調査し、基礎疾患ごとに分類された遺伝性溶血性貧血 (HHA) 患者の疾患経過と罹患率を予測した前向き比較研究はありません。

遺伝性溶血性貧血患者における急性の症候性 HPV-B19 感染におけるさまざまで異常な症状の根本的な原因を研究した人は誰もいません。 そのため、急性の症候性 HPV-B19 感染症を呈したサラセミア、鎌状赤血球貧血 (SCA)、および球状赤血球症 (HS) 患者を比較するこの最初の直接研究が行われました。

急性症候性HPV-B19感染症を呈する患者におけるウイルス血症、体液性免疫反応、基礎疾患との関係を研究することは、診断や管理を改善するための未診断の病態生理学的メカニズムやその他の付随因子を解明するのに役立つはずである。

さらに、急性症候性 HPV-B19 感染症の異常な症状の危険因子を早期に診断することは、より良い治療戦略、追跡調査、予後を診断するだけでなく、将来の合併症を予防するための有用なツールとなります。

HHA関連の合併症またはHHAを示唆する症状のためにソハグ大学病院およびアシュート大学病院の血液内科クリニックおよび救急科から入院した患者は、この研究に登録するために2018年2月から2020年2月まで継続的にスクリーニング検査を受け、その後少なくとも1年および3年間毎月追跡された。 HPV-B19感染。

研究のデザイン

1. 患者さん

最初の 2 年間は、HHA の証拠があり、および/または HHA を示唆する症状を呈し、フォローアップの指示に従うことに同意する候補患者がこの研究に登録するためにスクリーニングされ、追加の追跡が少なくとも 1 年間行われます。 HPV-B19感染後。 患者データには、人口統計、関連する併存疾患、入院の必要性、輸血または血漿の必要性、腎代替療法または血漿交換、入院期間、入院の完了（退院および死亡）、心臓イベント、神経系および呼吸器系が含まれます。出来事、投与された治療の種類、炎症の検査パラメータ。

研究患者におけるHHAの診断

研究室での調査

1. 定期的な生化学検査 肝機能検査および腎機能検査 (LFT)、ビリルビン、血糖、脂質、および示されたホルモンプロファイルは、Cobas c 311& モジュラー P 自動分析装置 (Roche Diagnostics、マンハイム、ドイツ)、乳酸デヒドロゲナーゼ (LDH) で実行されます。

   : 分析は Dimension Rx Max-Siemens および尿分析で行われ、アルブミン クレアチニン比がすべての患者に対して実行されます。

2. 血液学的分析 全血球計算: 診断検査および定期的な追跡調査のために末梢血サンプルが採取されます。 Cell-Dyn 3700、自動セルカウンター（Abbott Diagnostics、ダラス、米国）を使用して、CBC用のカリウムエチレンジアミン四酢酸（EDTA）抗凝固剤でコーティングされたチューブ上に2mlの血液を収集する。

   遺伝性溶血性貧血の診断 HHA は、患者の臨床/家族歴、全血球計算 (CBC)、赤血球 (RBC) 指数の計算、補正網状赤血球数、末梢血塗抹標本 (PBS) などの検査および臨床検査によって疑われます。 、鉄の研究、総ビリルビンおよび直接ビリルビン（TB、DB）、血清LDHの増加、血清ハプトグロビンの減少、および直接抗グロブリン（クームス）検査陰性。

   HHA の確認とサブタイプの特定は、次のような一連の専門的な調査によって行われます。

   A. ヘモグロビン症の診断

   Hb 電気泳動、鎌状溶解度試験、および高速液体クロマトグラフィー (HPLC) による Hb 画分の研究のプロトコルは、前述したように、SCA やサラセミアなどのヘモグロビン異常症の診断に使用されます。

   B. 赤血球膜症および酵素症の診断 HS や楕円球増加症などの遺伝性赤血球膜障害は、血液塗抹標本検査、24 時間インキュベーションの有無にかかわらず赤血球浸透圧脆弱性試験 (OFT)、酸性グリセロール溶解試験 (AGLT) によって特定されます。エオシン-5'-マレイミド（EMA）色素によるRBC標識と、その後のフローサイトメトリーによるRBC平均蛍光強度（MFI）の測定。

   HS と考えられる患者は、慢性溶血の臨床的および検査室の徴候、PBS での球状赤血球の存在、および 2 つの陽性検査 (OFT、AGLT、および EMA 結合検査) または HS の家族歴のある少なくとも 1 つの検査、および以下の検査の除外に基づきます。続発性球状赤血球症の他の原因。

   すべての患者は、赤血球酵素症と膜症の共存を検出するために、グルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ（G6PD）などの赤血球酵素の活性について評価されます。

3. HPV-B19 および HHA 患者の比較群の検出 研究期間中、HHA 患者には HPV-B19 感染を示唆する症状（発熱、筋肉痛、発疹、関節症、リンパ節腫脹、Hb 値の急速な低下および網状赤血球減少症）が見られます。または感染性紅斑の疑いのある患者との接触者は、抗パルボウイルス B19 IgM および IgG 免疫グロブリンの状態について調査されます。 HPV-B19血清陰性の人は2～3週間後に再検査される。 HPV-B19 免疫グロブリン (IgM および IgG) の状態は、(Diasorin、Saluggia、イタリア) の化学発光免疫測定法 (CLIA) 技術によって決定されます。 さらに、他の最近のウイルス感染を除外するために、肝炎、HIV、CMV、EBV ウイルスの血清学的検査も行われます。 敗血症を除外するために血液培養と感度検査が行われます。 徴候、症状、HPV-B19 特異的 IgM の存在、および他のウイルスの IgM の欠如は、最近の症候性 HPV-B19 感染の証拠とみなされます。 患者は以前の基準に基づいて 2 つのグループに分けられます。

グループ I= 急性症候性 HPV-B19 感染のある HHA 患者、グループ II= 急性症候性 HPV-B19 感染のない HHA 患者。 次に、グループ I の患者は、基礎疾患に応じて 3 つのサブグループに分類されます: グループ Ia: HPV-B19(+)β-サラセミア、グループ Ib: HPV-B19(+)HS、およびグループ Ic: HPV-B19(+)SCA 。

グループ I における血球減少症の数、急性腎障害 (AKI)、肝炎、高ビリルビン血症のレベルなど、HPV-B19 感染のさまざまな特徴が比較されます。 AKI は最後のガイドラインに従って診断および分類されます。 総ビリルビンが 25 mg/dL を超える場合、極度の高ビリルビン血症が考慮されます。 ベースラインでの臨床症状を記録した。

7.4. その他の研究 HPV-B19 の血液外症状、関連する自己免疫疾患、細胞性および体液性免疫不全の診断は、いくつかの自己抗体の検出、フローサイトメトリー、血清免疫グロブリンレベルなどのいくつかの方法を使用して決定されます。

BM、脾臓、肝臓生検の組織病理学的研究は、制限された条件下で患者が受け入れられた後、以下のような生検の適応に関するガイドラインに従って行われます。

• BM 吸引および生検は、治療に反応しない持続性重度 BMF 患者に対して行われます。
• HHA における脾臓摘出術に関する推奨事項に従って、待機的脾臓摘出術を受ける予定の患者からの脾臓生検(13)。
• 肝生検は、肝機能異常が持続し、血清学的検査で自己免疫または硬化性胆管炎が陽性となった患者に対して、適切な管理のために基礎疾患を区別するために行われます。

すべての患者をスクリーニングするために、心エコー検査、胸部および長骨の X 線検査、腹部超音波検査による放射線学的評価が定期的に行われます。 極度の高ビリルビン血症または閉塞性黄疸を有する HHA 患者は、磁気共鳴胆管膵管造影 (MRCP) によってスクリーニングされます。

グループ I の患者は、HPV-B19 感染後少なくとも 1 年間、毎月追跡調査されます。 グループ II の患者は、この原稿を執筆している間、熱心に追跡調査されます。 この期間中に、合併症、および患者が重度の血球減少症を患っていた場合のBM吸引を含む検査プロファイルがチェックされます。 すべての患者は心エコー検査でスキャンされ、超音波検査で胆嚢、腎臓、脾臓、肝臓の大きさ (cm) が検査されます。 骨髄不全（BMF）、脾臓隔離、胸痛、血管閉塞危機、胆石症、胆嚢炎、総胆管結石症、輸血頻度などの関心のあるイベントが記録されます。