Infection à parvovirus B19 chez les patients atteints d'anémie hémolytique héréditaire

Le VPH-B19 est le plus petit virus à ADN linéaire simple brin qui cause des maladies humaines. L'exposition aux sécrétions respiratoires est le mode de transmission le plus courant de ce virus. L'infection est associée à une variété de manifestations allant d'asymptomatiques à des complications graves qui dépendent du statut hématologique et immunologique de l'hôte. Aucune étude comparative prospective n'a étudié les risques associés à ce virus pathogène et n'a prédit l'évolution de la maladie et la morbidité chez les patients atteints d'anémie hémolytique héréditaire (HHA) classés selon leurs maladies sous-jacentes.

Personne n'a étudié les causes sous-jacentes des présentations différentes et inhabituelles de l'infection HPV-B19 symptomatique aiguë chez les patients atteints d'anémie hémolytique héréditaire. Ainsi, cette première étude comparative comparant des patients atteints de thalassémie, d'anémie falciforme (ACS) et de sphérocytose (HS) présentait une infection symptomatique aiguë par le VPH-B19.

L'étude de la relation entre la virémie, la réponse immunitaire humorale et la maladie sous-jacente chez les patients présentant une infection HPV-B19 symptomatique aiguë devrait être utile pour clarifier les mécanismes physiopathologiques non diagnostiqués et d'autres facteurs accessoires pour améliorer le diagnostic et la prise en charge.

De plus, le diagnostic précoce des facteurs de risque de présentations inhabituelles d'infection aiguë symptomatique par le VPH-B19 sera un outil utile pour améliorer la stratégie de traitement, le suivi et le pronostic, ainsi que pour prévenir les complications futures.

Les patients admis des cliniques d'hématologie et des services d'urgence des hôpitaux universitaires Sohag et Assiut pour des complications ou des manifestations liées à l'HHA ont été dépistés en continu entre février 2018 et février 2020 pour l'inscription à cette étude et suivis mensuellement pendant au moins un an et 3 ans après infection par le VPH-B19.

Conception de l'étude

1. Patients

Les 2 premières années, les patients candidats qui présenteront des signes d'HHA et/ou présenteront des manifestations suggérant l'HHA et acceptent de se conformer aux instructions de suivi seront sélectionnés pour l'inscription à cette étude et supplémentaires seront suivis pendant au moins un an post-HPV-B19. Les données des patients comprendront les données démographiques, les comorbidités pertinentes, le besoin d'hospitalisation, le besoin de transfusion de sang ou de plasma, la thérapie de remplacement rénal ou l'échange de plasma, la durée du séjour à l'hôpital, la fin de l'hospitalisation (sortie de l'hôpital et décès), les événements cardiaques, les troubles neurologiques et respiratoires. événements, le type de traitements administrés et les paramètres de laboratoire inflammatoires.

Diagnostic de HHA chez les patients de l'étude

Examens de laboratoire

1. Enquêtes biochimiques de routine Les tests de la fonction hépatique et rénale (LFT), la bilirubine, la glycémie, les lipides et les profils hormonaux indiqués seront effectués sur l'analyseur automatique Cobas c 311 et P modulaire (Roche Diagnostics, Mannheim, Allemagne), lactate déshydrogénase (LDH)

    : l'analyse sera effectuée avec Dimension Rx Max-Siemens et l'analyse d'urine, et le rapport albumine-créatinine sera effectué pour tous les patients.

2. Analyse hématologique Numération sanguine complète : des échantillons de sang périphérique seront prélevés pour des examens diagnostiques en laboratoire et un suivi de routine. 2 ml de sang seront prélevés sur un tube revêtu d'anticoagulant potassium-éthylène diamine tétraacétique (EDTA) pour CBC à l'aide de Cell-Dyn 3700, compteur de cellules automatisé (Abbott diagnostic, Dallas, USA).

   Diagnostic d'anémie hémolytique héréditaire HHA sera suspectée par les antécédents cliniques/familiaux du patient, l'examen et les tests de laboratoire, y compris la numération globulaire complète (CBC), le calcul des indices de globules rouges (RBC), le nombre corrigé de réticulocytes, le frottis sanguin périphérique (PBS) , étude sur le fer, bilirubine totale et directe (TB, DB), augmentation de la LDH sérique, diminution de l'haptoglobine sérique et test négatif à l'antiglobuline directe (Coomb).

   La confirmation de l'HHA et l'identification des sous-types seront effectuées par une série d'investigations spécialisées comme suit :

   A. Diagnostic d'hémoglobinopathie

   Le protocole d'électrophorèse de l'Hb, de test de solubilité de la faucille et d'étude des fractions d'Hb avec la chromatographie liquide à haute performance (HPLC) sera utilisé pour le diagnostic des hémoglobinopathies, telles que le SCA et la thalassémie, comme décrit précédemment.

   B. Diagnostic de la membranopathie et de l'enzymopathie érythrocytaires Les troubles héréditaires de la membrane des globules rouges, tels que l'HS et l'elliptocytose, seront identifiés par l'examen du frottis sanguin, le test de fragilité osmotique des globules rouges (OFT) avec et sans incubation de 24 heures, le test de lyse du glycérol acidifié (AGLT), et marquage RBC avec un colorant éosine-5'-maléimide (EMA) et mesure ultérieure de l'intensité de fluorescence moyenne RBC (MFI) par cytométrie en flux comme décrit précédemment.

   Les patients considérés comme atteints d'HS se baseront sur les signes cliniques et de laboratoire d'hémolyse chronique, la présence de sphérocytes au PBS, plus deux tests positifs (OFT, AGLT et test de liaison EMA) ou au moins un test avec des antécédents familiaux d'HS et l'exclusion de autres causes de sphérocytose secondaire.

   Tous les patients seront évalués pour l'activité des enzymes RBC, telles que la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PD) pour détecter la coexistence des enzymopathies RBC et de la membranopathie.

3. Détection des groupes de comparaison des patients HPV-B19 et HHA Au cours de la période d'étude, tout patient HHA présentera des manifestations suggérant une infection HPV-B19 (fièvre/douleurs musculaires/rash/arthropathie/lymphadénopathie/baisse rapide du taux d'Hb et réticulocytopénie) et /ou contact avec un cas suspect d'érythème infectieux fera l'objet d'une enquête pour le statut d'immunoglobuline anti-parvovirus B19 IgM et IgG. Les personnes séronégatives au VPH-B19 seront retestées 2 à 3 semaines plus tard. Le statut des immunoglobulines HPV-B19 (IgM et IgG) sera déterminé par la technologie des immunoessais chimiluminescents (CLIA) de (Diasorin, Saluggia, Italie). De plus, des tests sérologiques pour les virus de l'hépatite, du VIH, du CMV et de l'EBV seront effectués pour exclure d'autres infections virales récentes. Des hémocultures et une sensibilité seront effectuées pour exclure une septicémie. La présence de signes, de symptômes, d'IgM spécifiques au VPH-B19 et l'absence d'IgM d'autres virus seront considérées comme la preuve d'une infection symptomatique récente au VPH-B19. Les patients seront divisés en fonction des critères précédents en deux groupes.

Groupe I = patients HHA avec infection HPV-B19 symptomatique aiguë, groupe II = patients HHA sans infection HPV-B19 symptomatique aiguë. Ensuite, les patients du groupe I seront subdivisés en fonction de la maladie sous-jacente en trois sous-groupes : Groupe Ia : HPV-B19(+)β-thalassémie, Groupe Ib : HPV-B19(+)HS et Groupe Ic : HPV-B19(+)SCA .

Les différentes caractéristiques de présentation de l'infection par le VPH-B19, telles qu'un certain nombre de cytopénies, d'insuffisance rénale aiguë (IRA), d'hépatite et le niveau d'hyperbilirubinémie dans le groupe I seront comparées. L'IRA sera diagnostiquée et classée selon les dernières directives. Une hyperbilirubinémie extrême sera envisagée lorsque la bilirubine totale > 25 mg/dL. La présentation clinique au départ a été enregistrée.

7.4. Autres investigations Le diagnostic des manifestations extra-hématologiques du VPH-B19, des troubles auto-immuns associés, des déficits immunitaires cellulaires et humoraux sera déterminé par plusieurs méthodes telles que la détection de plusieurs auto-anticorps, la cytométrie en flux, le taux d'immunoglobulines sériques.

Des études histopathologiques des biopsies de BM, de la rate et du foie seront effectuées après l'acceptation des patients dans des conditions restreintes et selon les lignes directrices pour une indication de biopsie comme :

• Une aspiration et une biopsie de BM seront effectuées pour les patients atteints de BMF sévère persistant qui n'ont pas répondu au traitement.
• Biopsie splénique de patients qui seront soumis à une splénectomie élective conformément aux recommandations concernant la splénectomie en HHA(13).
• Une biopsie hépatique sera effectuée chez les patients présentant une fonction hépatique anormale persistante avec un test sérologique positif à la cholangite auto-immune ou sclérosante afin de différencier la maladie sous-jacente pour une prise en charge appropriée.

Un bilan radiologique par échocardiographie, radiographie du thorax et des os longs et échographie abdominale sera systématiquement réalisé pour le dépistage de tous les patients. Les patients HHA présentant une hyperbilirubinémie extrême ou un ictère obstructif seront dépistés par cholangiopancréatographie par résonance magnétique (MRCP).

Les patients du groupe I seront suivis mensuellement pendant au moins un an après l'infection par le VPH-B19. Les patients du groupe II seront suivis avec diligence pendant la rédaction de ce manuscrit. Pendant cette période, les complications et les profils de laboratoire, y compris l'aspiration de BM si le patient avait une cytopénie sévère, seront vérifiés. Tous les patients seront scannés par échocardiographie et examinés par ultrasons pour voir la taille de la vésicule biliaire, des reins, de la rate et du foie (cm). Les événements d'intérêt seront enregistrés, tels que l'insuffisance médullaire (BMF), la séquestration de la rate, les douleurs thoraciques, la crise vaso-occlusive, la cholélithiase, la cholécystite et la cholédocholithiase et la fréquence des transfusions