Parvovirus B19-infektion hos arvelige hæmolytiske anæmipatienter

HPV-B19 er den mindste enkeltstrengede, lineære DNA-virus, der forårsager sygdomme hos mennesker. Eksponering for luftvejssekretioner er det mest almindelige middel til overførsel af denne virus. Infektion er forbundet med en række manifestationer lige fra asymptomatiske til alvorlige komplikationer, der afhænger af værtens hæmatologiske og immunologiske status. Ingen prospektive sammenlignende undersøgelser undersøgte risiciene forbundet med denne patogene virus og forudsagde sygdomsforløbet og sygeligheden blandt patienter med arvelig hæmolytisk anæmi (HHA) klassificeret efter deres underliggende sygdomme.

Ingen har undersøgt de underliggende årsager til de forskellige og usædvanlige præsentationer ved akut symptomatisk HPV-B19-infektion hos patienter med arvelig hæmolytisk anæmi. Så denne første head-to-head undersøgelse til sammenligning af thalassæmi, seglcelleanæmi (SCA) og spherocytose (HS)-patienter præsenterede for akut symptomatisk HPV-B19-infektion.

At studere forholdet mellem viræmi, humoral immunrespons og den underliggende sygdom hos patienter med akut symptomatisk HPV-B19-infektion bør være nyttig til at afklare de udiagnosticerede patofysiologiske mekanismer og andre accessoriske faktorer for at forbedre diagnosen og behandlingen.

Desuden vil tidlig diagnosticering af risikofaktorer for usædvanlige præsentationer af akut symptomatisk HPV-B19-infektion være et nyttigt værktøj til bedre behandlingsstrategi, opfølgning og prognose samt forebyggelse af fremtidige komplikationer

Patienter indlagt fra hæmatologiske klinikker og akutafdelinger på Sohag og Assiut Universitetshospitaler for HHA-relaterede komplikationer eller manifestationer, der tyder på HHA, blev screenet kontinuerligt mellem februar 2018 og februar 2020 for tilmelding til denne undersøgelse og månedligt fulgt i mindst et år og 3 år efter HPV-B19 infektion.

Design af undersøgelsen

1. Patienter

De første 2 år vil de kandidatpatienter, som vil have tegn på HHA og/eller præsentere manifestationer, der tyder på HHA og accepterer at overholde opfølgningsinstruktionerne, blive screenet for tilmelding til denne undersøgelse, og yderligere vil blive fulgt i mindst et år post-HPV-B19 infektion. Patientdata vil blive inkluderet demografi, relevante komorbiditeter, behov for hospitalsindlæggelse, behov for blod- eller plasmatransfusion, nyreudskiftningsterapi eller plasmaudskiftning, hospitalsopholdslængde, afslutning af hospitalsindlæggelse (hospitaludskrivning og død), hjertebegivenheder, neurologiske og respiratoriske sygdomme. hændelser, type af administrerede behandlinger og inflammatoriske laboratorieparametre.

Diagnose af HHA hos undersøgelsens patienter

Laboratorieundersøgelser

1. Rutinemæssige biokemiske undersøgelser Lever- og nyrefunktionstests (LFT'er), bilirubin, blodsukker, lipid og indikerede hormonprofiler vil blive udført på Cobas c 311& modulær P autoanalysator (Roche Diagnostics, Mannheim, Tyskland), laktatdehydrogenase (LDH)

   : analyse vil blive udført med Dimension Rx Max-Siemens & urinanalyse, og albumin kreatinin ratio vil blive udført for alle patienter.

2. Hæmatologisk analyse Komplet blodtælling: perifere blodprøver vil blive udtaget til diagnostiske laboratorieundersøgelser og rutinemæssig opfølgning. 2 ml blod vil blive opsamlet på kalium-ethylendiamintetraeddikesyre (EDTA) antikoagulantbelagt rør til CBC ved hjælp af Cell-Dyn 3700, automatiseret celletæller (Abbott diagnostic, Dallas, USA).

   Arvelig hæmolytisk anæmi Diagnose HHA vil blive mistænkeliggjort af patientens kliniske/familiehistorie, undersøgelser og laboratorieprøver, herunder fuld fuldstændig blodtælling (CBC), beregning af røde blodlegemer (RBC'er), korrigeret retikulocyttal, perifert blodudstrygning (PBS) , jernundersøgelse, total og direkte bilirubin (TB, DB), øget serum LDH, nedsat serum haptoglobin og negativ direkte antiglobulin (Coombs) test.

   Bekræftelse af HHA og identifikation af undertyper vil blive udført ved en række specialiserede undersøgelser som følger:

   A. Diagnose af hæmoglobinopati

   Protokollen for Hb-elektroforese, seglopløselighedstestning og undersøgelse af Hb-fraktioner med højtydende væskekromatografi (HPLC) vil blive brugt til diagnosticering af hæmoglobinopatier, såsom SCA og thalassæmi som tidligere beskrevet.

   B. Diagnose af RBC Membranopati og Enzymopati Arvelige røde blodlegemer membransygdomme, såsom HS og elliptocytose vil blive identificeret ved blodprøveundersøgelse, røde blodlegemer osmotisk skrøbelighedstest (OFT) med og uden 24 timers inkubation, forsuret glycerol lysis test (AGLT), og RBC-mærkning med eosin-5'-maleimid (EMA) farvestof og efterfølgende måling af RBC middelfluorescensintensitet (MFI) ved flowcytometri som tidligere beskrevet.

   Patienter, der anses for at have HS, vil basere sig på kliniske og laboratoriemæssige tegn på kronisk hæmolyse, tilstedeværelse af sfærocytter ved PBS, plus to positive test (OFT, AGLT og EMA bindingstest) eller mindst én test med en familiehistorie med HS og udelukkelse af andre årsager til sekundær sfærocytose.

   Alle patienter vil blive evalueret for RBC enzymers aktivitet, såsom glucose-6-phosphat dehydrogenase (G6PD) for at påvise sameksistensen af ​​RBC enzymopatier og membranopati.

3. Påvisning af HPV-B19 og HHA-patienters sammenligningsgrupper I løbet af undersøgelsesperioden vil enhver HHA-patient have manifestationer, der tyder på HPV-B19-infektion (feber/ muskelsmerter / udslæt/ artropati/ lymfadenopati/ hurtigt fald i Hb-niveau og retikulocytopeni) og /eller kontakt med et mistænkt tilfælde af erythema infectiosum vil blive undersøgt for anti-parvovirus B19 IgM og IgG immunglobulin status. Disse HPV-B19 seronegative vil blive testet igen 2 til 3 uger senere. Status for HPV-B19-immunoglobuliner (IgM og IgG) vil blive bestemt ved kemiluminescerende immunoassays (CLIA) teknologi fra (Diasorin, Saluggia, Italien). Derudover vil der blive udført serologiske tests for hepatitis, HIV, CMV og EBV vira for at udelukke andre nylige virusinfektioner. Blodkulturer og følsomhed vil blive udført for at udelukke septikæmi. Tilstedeværelsen af ​​tegn, symptomer, HPV-B19-specifikt IgM og fravær af IgM fra andre vira vil blive betragtet som bevis på nylig symptomatisk HPV-B19-infektion. Patienterne vil blive opdelt på baggrund af tidligere kriterier i to grupper.

Gruppe I= HHA-patienter med akut symptomatisk HPV-B19-infektion, Gruppe II= HHA-patienter uden akut symptomatisk HPV-B19-infektion. Derefter vil gruppe I-patienter efter underliggende sygdom blive opdelt i tre undergrupper: Gruppe Ia: HPV-B19(+)β-thalassæmi, gruppe Ib: HPV-B19(+)HS og gruppe Ic: HPV-B19(+)SCA .

De forskellige præsenterende træk ved HPV-B19-infektion, såsom en række cytopenier, akut nyreskade (AKI), hepatitis og niveauet af hyperbilirubinæmi i gruppe I vil blive sammenlignet. AKI vil blive diagnosticeret og klassificeret i henhold til de sidste retningslinjer. Ekstrem hyperbilirubinæmi vil blive overvejet, når total bilirubin >25 mg/dL. Den kliniske præsentation ved baseline blev registreret.

7.4. Andre undersøgelser Diagnosen af ​​HPV-B19 ekstrahæmatologiske manifestationer, associerede autoimmune lidelser, cellulære og humorale immundefekter vil blive bestemt ved hjælp af adskillige metoder såsom påvisning af adskillige autoantistoffer, flowcytometri, serumimmunoglobulinniveau.

Histopatologiske undersøgelser af BM-, milt- og leverbiopsier vil blive udført efter patienternes accept under begrænsede forhold og i henhold til retningslinjer for en indikation af biopsi som:

• BM-aspiration og biopsi vil blive udført for patienter med vedvarende svær BMF, der ikke reagerer på behandlingen.
• Miltbiopsi fra patienter, der vil blive indsendt til elektiv splenektomi i henhold til anbefalinger vedrørende miltoperation ved HHA(13).
• Leverbiopsi vil blive udført for patienter med vedvarende unormal leverfunktion med serologisk test positiv over for autoimmun eller skleroserende cholangitis for at differentiere den underliggende sygdom for korrekt behandling.

Radiologisk vurdering ved ekkokardiografi, røntgen af ​​thorax og lange knogler og abdominal ultralyd vil rutinemæssigt blive udført til screening af alle patienter. HHA-patienterne med ekstrem hyperbilirubinæmi eller obstruktiv gulsot vil blive screenet ved magnetisk resonans kolangiopankreatografi (MRCP).

Gruppe I-patienter vil blive fulgt månedligt i mindst et år efter HPV-B19-infektion. Gruppe II-patienter vil blive fulgt flittigt i skrivende stund til dette manuskript. I denne periode vil komplikationer og laboratorieprofiler inklusive BM-aspiration, hvis patienten havde svær cytopeni, blive kontrolleret. Alle patienter vil blive scannet ved ekkokardiografi og undersøgt ved ultralyd for at se galdeblæren, nyrerne, milten og leverens størrelse (cm). Begivenhederne af interesse vil blive registreret, såsom knoglemarvssvigt (BMF), miltsekvestrering, brystsmerter, vaso-okklusiv krise, kolelithiasis, kolecystitis og koledokolithiasis og transfusionsfrekvens