Parvovirus B19-infektion hos patienter med ärftlig hemolytisk anemi

HPV-B19 är det minsta enkelsträngade, linjära DNA-viruset som orsakar mänskliga sjukdomar. Exponering för luftvägssekret är det vanligaste sättet att överföra detta virus. Infektion är förknippad med en mängd olika manifestationer som sträcker sig från asymtomatiska till allvarliga komplikationer som beror på värdens hematologiska och immunologiska status. Inga prospektiva jämförande studier undersökte riskerna förknippade med detta patogena virus och förutspådde sjukdomsförloppet och sjukligheten bland patienter med ärftlig hemolytisk anemi (HHA) klassificerade efter deras underliggande sjukdomar.

Ingen har studerat de bakomliggande orsakerna till de olika och ovanliga presentationerna vid akut symtomatisk HPV-B19-infektion hos patienter med ärftlig hemolytisk anemi. Så att denna första head-to-head-studie för att jämföra talassemi, sicklecellanemi (SCA) och sfärocytos (HS)-patienter uppvisade akut symtomatisk HPV-B19-infektion.

Att studera sambandet mellan viremi, humoralt immunsvar och den underliggande sjukdomen hos patienter med akut symtomatisk HPV-B19-infektion bör vara användbart för att klargöra de odiagnostiserade patofysiologiska mekanismerna och andra accessoriska faktorer för att förbättra diagnosen och hanteringen.

Dessutom kommer tidig diagnos av riskfaktorer för ovanliga presentationer av akut symtomatisk HPV-B19-infektion vara ett användbart verktyg för bättre behandlingsstrategi, uppföljning och prognos samt förhindra framtida komplikationer

Patienter som togs in från hematologiska kliniker och akutmottagningar vid universitetssjukhusen i Sohag och Assiut för HHA-relaterade komplikationer eller manifestationer som tyder på HHA screenades kontinuerligt mellan februari 2018 och februari 2020 för inskrivning i denna studie och följdes månadsvis under minst ett år och 3 år efter HPV-B19-infektion.

Utformning av studien

1. Patienter

De första två åren kommer de kandidatpatienter som kommer att ha tecken på HHA och/eller kommer att visa upp sig med manifestationer som tyder på HHA och samtycker till att följa uppföljningsinstruktionerna att screenas för inskrivning i denna studie och ytterligare kommer att följas i minst ett år efter HPV-B19-infektion. Patientdata kommer att inkluderas demografi, relevanta komorbiditeter, behov av sjukhusinläggning, behov av blod- eller plasmatransfusion, njurersättningsterapi eller plasmautbyte, sjukhusvistelse, avslutad sjukhusvistelse (sjukhusutskrivning och dödsfall), hjärthändelser, neurologiska och respiratoriska händelser. händelser, typ av administrerade behandlingar och inflammatoriska laboratorieparametrar.

Diagnos av HHA hos studiepatienter

Laboratorieundersökningar

1. Rutinmässiga biokemiska undersökningar Lever- och njurfunktionstester (LFT), bilirubin, blodsocker, lipider och indikerade hormonprofiler kommer att utföras på Cobas c 311& modular P autoanalysator (Roche Diagnostics, Mannheim, Tyskland), laktatdehydrogenas (LDH)

   : analys kommer att göras med Dimension Rx Max-Siemens & urinanalys, och albumin kreatinin ratio kommer att utföras för alla patienter.

2. Hematologisk analys Fullständigt blodvärde: perifera blodprover kommer att tas ut för diagnostiska laboratorieundersökningar och rutinmässig uppföljning. 2-ml blod kommer att samlas in på kalium-etylendiamintetraättiksyra (EDTA) antikoagulantbelagda rör för CBC med Cell-Dyn 3700, automatiserad cellräknare (Abbott diagnostic, Dallas, USA).

   Diagnos av ärftlig hemolytisk anemi HHA kommer att misstänkas genom klinisk/familjehistoria av patient, undersökning och laboratorietester inklusive fullständigt blodvärde (CBC), beräkning av röda blodkroppar (RBC), korrigerat retikulocytantal, perifert blodutstryk (PBS) , järnstudie, totalt och direkt bilirubin (TB, DB), ökat serum-LDH, minskat serumhaptoglobin och negativt direkt antiglobulin (Coombs) test.

   Bekräftelse av HHA och identifiering av subtyper kommer att göras genom en serie specialiserade undersökningar enligt följande:

   A. Diagnos av hemoglobinopati

   Protokollet för Hb-elektrofores, sickle-löslighetstestning och studier av Hb-fraktioner med högpresterande vätskekromatografi (HPLC) kommer att användas för diagnos av hemoglobinopatier, såsom SCA och talassemi som tidigare beskrivits.

   B. Diagnos av RBC Membranopati och Enzymopati Ärftliga röda blodkroppsmembranstörningar, såsom HS och elliptocytos kommer att identifieras genom blodutstryksundersökning, osmotisk fragilitetstest för röda blodkroppar (OFT) med och utan 24 timmars inkubation, surgjort glycerollystest (AGLT), och RBC-märkning med eosin-5'-maleimid (EMA) färgämne och efterföljande mätning av RBC medelfluorescensintensitet (MFI) genom flödescytometri som tidigare beskrivits.

   Patienter som anses ha HS kommer att baseras på kliniska och laboratoriemässiga tecken på kronisk hemolys, närvaro av sfärocyter vid PBS, plus två positiva test (OFT, AGLT och EMA bindande test) eller minst ett test med en familjehistoria av HS, och uteslutning av andra orsaker till sekundär sfärocytos.

   Alla patienter kommer att utvärderas för RBC-enzymers aktivitet, såsom glukos-6-fosfatdehydrogenas (G6PD) för att upptäcka samexistensen av RBC-enzymopatier och membranopati.

3. Detektering av HPV-B19 och HHA-patienters jämförande grupper Under studieperioden kommer alla HHA-patienter att ha manifestationer som tyder på HPV-B19-infektion (feber/ muskelsmärtor/utslag/ artropati/ lymfadenopati/ snabb minskning av Hb-nivån och retikulocytopeni) och /eller kontakt med ett misstänkt fall av erythema infectiosum kommer att undersökas för anti-parvovirus B19 IgM och IgG immunglobulinstatus. Dessa seronegativa HPV-B19 kommer att testas om 2 till 3 veckor senare. Statusen för HPV-B19-immunoglobuliner (IgM och IgG) kommer att bestämmas med kemiluminescerande immunoanalyser (CLIA) från (Diasorin, Saluggia, Italien). Dessutom kommer serologiska tester för hepatit-, HIV-, CMV- och EBV-virus att göras för att utesluta andra nya virusinfektioner. Blododlingar och känslighet kommer att utföras för att utesluta septikemi. Förekomsten av tecken, symtom, HPV-B19-specifikt IgM och frånvaro av IgM från andra virus kommer att betraktas som bevis på nyligen symtomatisk HPV-B19-infektion. Patienterna kommer att delas in i två grupper utifrån tidigare kriterier.

Grupp I= HHA-patienter med akut symtomatisk HPV-B19-infektion, Grupp II= HHA-patienter utan akut symtomatisk HPV-B19-infektion. Därefter kommer grupp I-patienter att delas in i tre undergrupper enligt underliggande sjukdom: Grupp Ia: HPV-B19(+)β-talassemi, Grupp Ib: HPV-B19(+)HS och Grupp Ic: HPV-B19(+)SCA .

De olika kännetecknen för HPV-B19-infektion, såsom ett antal cytopenier, akut njurskada (AKI), hepatit och nivån av hyperbilirubinemi i grupp I kommer att jämföras. AKI kommer att diagnostiseras och klassificeras enligt de senaste riktlinjerna. Extrem hyperbilirubinemi kommer att övervägas när totalt bilirubin >25 mg/dL. Den kliniska presentationen vid baslinjen registrerades.

7.4. Andra undersökningar Diagnosen av HPV-B19 extrahematologiska manifestationer, associerade autoimmuna störningar, cellulära och humorala immunbrister kommer att bestämmas med hjälp av flera metoder såsom detektion av flera autoantikroppar, flödescytometri, immunoglobulinnivåer i serum.

Histopatologiska studier av BM, mjälte och leverbiopsier kommer att göras efter patientens acceptans under begränsade tillstånd och enligt riktlinjer för en indikation på biopsi som:

• BM-aspiration och biopsi kommer att göras för patienter med ihållande svår BMF som inte svarat på behandlingen.
• Mjältbiopsi från patienter som ska lämnas in för elektiv splenektomi enligt rekommendationer gällande mjältoperation vid HHA(13).
• Leverbiopsi kommer att göras för patienter med ihållande onormal leverfunktion med serologiskt test positivt för autoimmun eller skleroserande kolangit för att skilja den underliggande sjukdomen åt för korrekt behandling.

Röntgenundersökning med ekokardiografi, röntgen av bröstkorg och långa ben samt bukultraljud kommer att utföras rutinmässigt för screening av alla patienter. HHA-patienter med extrem hyperbilirubinemi eller obstruktiv gulsot kommer att screenas med magnetisk resonans kolangiopankreatografi (MRCP).

Grupp I-patienter kommer att följas varje månad under minst ett år efter HPV-B19-infektion. Grupp II-patienter kommer att följas flitigt under tiden för att skriva detta manuskript. Under denna period kommer komplikationer och laboratorieprofiler inklusive BM-aspiration om patienten hade svår cytopeni att kontrolleras. Alla patienter kommer att skannas med ekokardiografi och undersökas med ultraljud för att se storleken på gallblåsan, njurarna, mjälten och levern (cm). Händelserna av intresse kommer att registreras, såsom benmärgssvikt (BMF), mjältesekvestrering, bröstsmärtor, vaso-ocklusiv kris, kolelitiasis, kolecystit och koledokolitiasis och transfusionsfrekvens