Parvovirus B19-infectie bij patiënten met erfelijke hemolytische anemie

HPV-B19 is het kleinste enkelstrengs, lineair DNA-virus dat ziekten bij de mens veroorzaakt. Blootstelling aan respiratoire secreties is de meest gebruikelijke manier om dit virus over te dragen. Infectie gaat gepaard met een verscheidenheid aan manifestaties, variërend van asymptomatisch tot ernstige complicaties, afhankelijk van de hematologische en immunologische status van de gastheer. Er waren geen prospectieve vergelijkende studies die de risico's van dit pathogene virus onderzochten en het ziekteverloop en de morbiditeit voorspelden bij patiënten met erfelijke hemolytische anemie (HHA), ingedeeld naar hun onderliggende ziekten.

Niemand heeft de onderliggende oorzaken bestudeerd van de verschillende en ongebruikelijke presentaties bij acute symptomatische HPV-B19-infectie bij patiënten met erfelijke hemolytische anemie. Zodat deze eerste rechtstreekse studie om patiënten met thalassemie, sikkelcelanemie (SCA) en sferocytose (HS) te vergelijken zich presenteerde met een acute symptomatische HPV-B19-infectie.

Het bestuderen van de relatie tussen viremie, humorale immuunrespons en de onderliggende ziekte bij patiënten met acute symptomatische HPV-B19-infectie zou nuttig moeten zijn om de niet-gediagnosticeerde pathofysiologische mechanismen en andere bijkomende factoren te verduidelijken om de diagnose en het beheer te verbeteren.

Bovendien zal een vroege diagnose van risicofactoren van ongebruikelijke presentaties van acute symptomatische HPV-B19-infectie een nuttig hulpmiddel zijn voor een betere behandelingsstrategie, follow-up en prognose, en om toekomstige complicaties te voorkomen.

Patiënten die werden opgenomen in hematologieklinieken en spoedeisende hulpafdelingen van de Universitaire Ziekenhuizen Sohag en Assiut voor HHA-gerelateerde complicaties of manifestaties die HHA suggereren, werden tussen februari 2018 en februari 2020 continu gescreend voor deelname aan deze studie en maandelijks gevolgd gedurende ten minste één jaar en drie jaar daarna. HPV-B19-infectie.

Ontwerp van de studie

1. Patiënten

De eerste 2 jaar zullen de kandidaat-patiënten die bewijs van HHA hebben en/of manifestaties vertonen die HHA suggereren en ermee instemmen de vervolginstructies op te volgen, worden gescreend voor deelname aan dit onderzoek en daarnaast zullen ze gedurende ten minste één jaar worden gevolgd post-HPV-B19-infectie. Patiëntgegevens omvatten demografische gegevens, relevante comorbiditeiten, behoefte aan ziekenhuisopname, behoefte aan bloed- of plasmatransfusie, nierfunctievervangende therapie of plasma-uitwisseling, opnameduur in het ziekenhuis, voltooiing van ziekenhuisopname (ontslag uit het ziekenhuis en overlijden), cardiale gebeurtenissen, neurologische en respiratoire gebeurtenissen, type toegediende behandelingen en inflammatoire laboratoriumparameters.

Diagnose van HHA bij de studiepatiënten

Laboratorium onderzoeken

1. Routinematige biochemische onderzoeken Lever- en nierfunctietesten (LFT's), bilirubine, bloedsuiker, lipiden en aangegeven hormonale profielen zullen worden uitgevoerd op Cobas c 311& modulaire P autoanalysator (Roche Diagnostics, Mannheim, Duitsland), lactaatdehydrogenase (LDH)

   : analyse zal worden gedaan met Dimension Rx Max-Siemens & urine-analyse, en albumine creatinine ratio zal worden uitgevoerd voor alle patiënten.

2. Hematologische analyse Volledig bloedbeeld: monsters van perifeer bloed worden afgenomen voor diagnostisch laboratoriumonderzoek en routinematige follow-up. 2 ml bloed zal worden verzameld op met kalium-ethyleendiaminetetra-azijnzuur (EDTA) antistollingsmiddel gecoate buis voor CBC met behulp van Cell-Dyn 3700, geautomatiseerde celteller (Abbott diagnostic, Dallas, VS).

   Diagnose van erfelijke hemolytische anemie HHA zal worden vermoed op basis van de klinische/familiale voorgeschiedenis van de patiënt, onderzoek en laboratoriumtests, waaronder volledig compleet bloedbeeld (CBC), berekening van rode bloedcellen (RBC's) indices, gecorrigeerd aantal reticulocyten, uitstrijkje van perifeer bloed (PBS) , ijzeronderzoek, totaal en direct bilirubine (TB, DB), verhoogd serum LDH, verlaagd serum haptoglobine en negatieve directe antiglobuline (Coomb's) test.

   Bevestiging van HHA en identificatie van subtypes zal worden gedaan door een reeks gespecialiseerde onderzoeken, zoals de volgende:

   A. Diagnose van hemoglobinopathie

   Het protocol van Hb-elektroforese, het testen van de sikkeloplosbaarheid en het bestuderen van Hb-fracties met krachtige vloeistofchromatografie (HPLC) zal worden gebruikt voor de diagnose van hemoglobinopathieën, zoals SCA en thalassemie, zoals eerder beschreven.

   B. Diagnose van RBC-membranopathie en enzymopathie Erfelijke aandoeningen van het rode celmembraan, zoals HS en elliptocytose, worden geïdentificeerd door middel van bloeduitstrijkjes, rode-cel-osmotische-fragiliteitstest (OFT) met en zonder 24-uurs incubatie, aangezuurde glycerollysistest (AGLT), en RBC-labeling met eosine-5'-maleïmide (EMA) kleurstof en daaropvolgende meting van RBC gemiddelde fluorescentie-intensiteit (MFI) door flowcytometrie zoals eerder beschreven.

   Patiënten waarvan wordt aangenomen dat ze HS hebben, zullen gebaseerd zijn op klinische en laboratoriumsymptomen van chronische hemolyse, aanwezigheid van sferocyten bij PBS, plus twee positieve tests (OFT-, AGLT- en EMA-bindingstest) of ten minste één test met een familiegeschiedenis van HS en uitsluiting van andere oorzaken van secundaire sferocytose.

   Alle patiënten zullen worden beoordeeld op de activiteit van RBC-enzymen, zoals glucose-6-fosfaatdehydrogenase (G6PD) om het naast elkaar bestaan ​​van RBC-enzymopathieën en membranopathie op te sporen.

3. Detectie van HPV-B19- en HHA-patiëntenvergelijkingsgroepen Tijdens de onderzoeksperiode zal elke HHA-patiënt symptomen vertonen die wijzen op een HPV-B19-infectie (koorts/spierpijn/huiduitslag/artropathie/lymfadenopathie/snelle daling van het Hb-gehalte en reticulocytopenie) en /of contact met een vermoedelijk geval van erythema infectiosum zal worden onderzocht op anti-parvovirus B19 IgM- en IgG-immunoglobulinestatus. Die HPV-B19-seronegatieven worden 2 tot 3 weken later opnieuw getest. De status van HPV-B19-immunoglobulinen (IgM en IgG) zal worden bepaald door middel van chemiluminescente immunoassays (CLIA)-technologie van (Diasorin, Saluggia, Italië). Bovendien zullen serologische tests voor hepatitis-, HIV-, CMV- en EBV-virussen worden uitgevoerd om andere recente virale infecties uit te sluiten. Bloedkweken en gevoeligheid zullen worden uitgevoerd om septikemie uit te sluiten. De aanwezigheid van tekenen, symptomen, HPV-B19-specifiek IgM en afwezigheid van IgM van andere virussen wordt beschouwd als bewijs van een recente symptomatische HPV-B19-infectie. Patiënten zullen worden verdeeld op basis van eerdere criteria in twee groepen.

Groep I= HHA-patiënten met acute symptomatische HPV-B19-infectie, Groep II= HHA-patiënten zonder acute symptomatische HPV-B19-infectie. Vervolgens worden groep I-patiënten volgens onderliggende ziekte onderverdeeld in drie subgroepen: groep Ia: HPV-B19(+)β-thalassemie, groep Ib: HPV-B19(+)HS en groep Ic: HPV-B19(+)SCA .

De verschillende presenterende kenmerken van HPV-B19-infectie, zoals een aantal cytopenieën, acuut nierletsel (AKI), hepatitis en niveau van hyperbilirubinemie in groep I zullen worden vergeleken. AKI wordt gediagnosticeerd en geclassificeerd volgens de laatste richtlijnen. Extreme hyperbilirubinemie wordt overwogen wanneer totaal bilirubine >25 mg/dL. De klinische presentatie bij aanvang werd geregistreerd.

7.4. Andere onderzoeken De diagnose van HPV-B19 extra-hematologische manifestaties, geassocieerde auto-immuunziekten, cellulaire en humorale immuundeficiënties zal worden bepaald met behulp van verschillende methoden, zoals detectie van verschillende auto-antilichamen, flowcytometrie, serumimmunoglobulinenniveau.

Histopathologische onderzoeken van BM-, milt- en leverbiopten zullen worden uitgevoerd na acceptatie door de patiënt in beperkte omstandigheden en volgens richtlijnen voor een indicatie van biopsie als:

• BM aspiratie en biopsie zullen worden gedaan voor patiënten met aanhoudende ernstige BMF die niet op de behandeling reageerden.
• Miltbiopsie van patiënten die worden ingediend voor electieve splenectomie volgens aanbevelingen met betrekking tot splenectomie bij HHA(13).
• Leverbiopsie zal worden uitgevoerd voor patiënten met een aanhoudend abnormale leverfunctie met een serologische test die positief is voor auto-immuun- of scleroserende cholangitis om de onderliggende ziekte te differentiëren voor een juiste behandeling.

Radiologische beoordeling door middel van echocardiografie, röntgenfoto's van borst en pijpbeenderen en abdominale echografie zullen routinematig worden uitgevoerd om alle patiënten te screenen. De HHA-patiënten met extreme hyperbilirubinemie of obstructieve geelzucht zullen worden gescreend door magnetische resonantie cholangiopancreatografie (MRCP).

Groep I-patiënten zullen maandelijks worden gevolgd gedurende ten minste één jaar na de HPV-B19-infectie. Groep II-patiënten zullen ijverig worden gevolgd tijdens het schrijven van dit manuscript. Gedurende deze periode zullen complicaties en laboratoriumprofielen, inclusief BM-aspiratie, worden gecontroleerd als de patiënt ernstige cytopenie had. Alle patiënten worden gescand door middel van echocardiografie en onderzocht door middel van echografie om de grootte van de galblaas, nieren, milt en lever (cm) te bekijken. De relevante gebeurtenissen worden geregistreerd, zoals beenmergfalen (BMF), miltsekwestratie, pijn op de borst, vaso-occlusieve crisis, cholelithiasis, cholecystitis en choledocholithiasis en transfusiefrequentie