Infección por parvovirus B19 en pacientes con anemias hemolíticas hereditarias

El VPH-B19 es el virus de ADN lineal monocatenario más pequeño que causa enfermedades humanas. La exposición a las secreciones respiratorias es el medio más común de transmisión de este virus. La infección se asocia con una variedad de manifestaciones que van desde asintomáticas hasta complicaciones graves que dependen del estado hematológico e inmunológico del huésped. Ningún estudio comparativo prospectivo investigó los riesgos asociados con este virus patógeno y predijo el curso de la enfermedad y la morbilidad entre los pacientes con anemia hemolítica hereditaria (HHA) clasificados por sus enfermedades subyacentes.

Nadie ha estudiado las causas subyacentes de las diferentes e inusuales presentaciones en la infección aguda sintomática por VPH-B19 en pacientes con anemias hemolíticas hereditarias. Por lo tanto, este primer estudio directo para comparar pacientes con talasemia, anemia de células falciformes (SCA) y esferocitosis (HS) presentaron una infección aguda sintomática por VPH-B19.

El estudio de la relación entre la viremia, la respuesta inmune humoral y la enfermedad de base en pacientes con infección aguda sintomática por VPH-B19 debería ser útil para esclarecer los mecanismos fisiopatológicos no diagnosticados y otros factores accesorios para mejorar el diagnóstico y el manejo.

Además, el diagnóstico precoz de los factores de riesgo de las presentaciones inusuales de la infección aguda sintomática por VPH-B19 será una herramienta útil para mejorar la estrategia de tratamiento, seguimiento y pronóstico, así como para prevenir futuras complicaciones.

Los pacientes ingresados ​​en clínicas de hematología y departamentos de emergencia de los hospitales universitarios de Sohag y Assiut por complicaciones relacionadas con HHA o manifestaciones que sugieren HHA fueron examinados continuamente entre febrero de 2018 y febrero de 2020 para la inscripción en este estudio y se les hizo un seguimiento mensual durante al menos un año y 3 años después. Infección por VPH-B19.

Diseño del estudio

1. Pacientes

Los primeros 2 años, los pacientes candidatos que tendrán evidencia de HHA y/o presentarán manifestaciones que sugieran HHA y acepten cumplir con las instrucciones de seguimiento serán evaluados para la inscripción en este estudio y se les dará seguimiento adicional durante al menos un año. post-infección por VPH-B19. Se incluirán datos del paciente demográficos, comorbilidades relevantes, necesidad de ingreso hospitalario, necesidad de transfusión de sangre o plasma, terapia de reemplazo renal o recambio plasmático, duración de la estancia hospitalaria, finalización de la hospitalización (alta hospitalaria y muerte), eventos cardíacos, neurológicos y respiratorios. eventos, tipo de tratamientos administrados y parámetros de laboratorio inflamatorios.

Diagnóstico de HHA en los pacientes del estudio

Investigaciones de laboratorio

1. Investigaciones bioquímicas de rutina Se realizarán pruebas de función hepática y renal (LFT), bilirrubina, azúcar en sangre, lípidos y perfiles hormonales indicados en el analizador automático Cobas c 311 y modular P (Roche Diagnostics, Mannheim, Alemania), lactato deshidrogenasa (LDH)

   : el análisis se realizará con Dimension Rx Max-Siemens y análisis de orina, y se realizará una relación de albúmina y creatinina para todos los pacientes.

2. Análisis hematológicos Hemograma completo: se extraerán muestras de sangre periférica para investigaciones de laboratorio de diagnóstico y seguimiento de rutina. Se recolectarán 2 ml de sangre en un tubo recubierto con anticoagulante de potasio-etilendiaminotetraacético (EDTA) para CBC utilizando Cell-Dyn 3700, contador de células automatizado (Abbott diagnostic, Dallas, EE. UU.).

   Anemia hemolítica hereditaria Diagnóstico Se sospechará HHA por los antecedentes clínicos/familiares del paciente, el examen y las pruebas de laboratorio, incluido el hemograma completo (CBC), el cálculo de los índices de glóbulos rojos (RBC), el recuento de reticulocitos corregido, el frotis de sangre periférica (PBS) , estudio de hierro, bilirrubina total y directa (TB, DB), LDH sérica elevada, haptoglobina sérica disminuida y test de antiglobulina directa (Coomb) negativo.

   La confirmación de HHA y la identificación de los subtipos se realizará mediante una serie de investigaciones especializadas de la siguiente manera:

   A. Diagnóstico de hemoglobinopatía

   El protocolo de electroforesis de Hb, prueba de solubilidad falciforme y estudio de fracciones de Hb con cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) se utilizará para el diagnóstico de hemoglobinopatías, como SCA y talasemia, como se describió anteriormente.

   B. Diagnóstico de membranopatía y enzimopatía de glóbulos rojos Los trastornos hereditarios de la membrana de glóbulos rojos, como HS y eliptocitosis, se identificarán mediante un examen de frotis de sangre, prueba de fragilidad osmótica de glóbulos rojos (OFT) con y sin incubación de 24 horas, prueba de lisis de glicerol acidificado (AGLT), y marcaje de glóbulos rojos con colorante eosina-5'-maleimida (EMA) y medición posterior de la intensidad de fluorescencia media (MFI) de glóbulos rojos mediante citometría de flujo como se describió anteriormente.

   Los pacientes considerados con HS se basarán en signos clínicos y de laboratorio de hemólisis crónica, presencia de esferocitos en PBS, más dos pruebas positivas (OFT, AGLT y prueba de unión a EMA) o al menos una prueba con antecedentes familiares de HS y exclusión de otras causas de esferocitosis secundaria.

   En todos los pacientes se evaluará la actividad de las enzimas de los glóbulos rojos, como la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD), para detectar la coexistencia de enzimopatías y membranopatías de los glóbulos rojos.

3. Detección de HPV-B19 y HHA-Patients' Comparator Groups Durante el período de estudio, cualquier paciente HHA tendrá manifestaciones sugestivas de infección por HPV-B19 (fiebre/dolores musculares/erupción cutánea/artropatía/linfadenopatía/caída rápida del nivel de Hb y reticulocitopenia) y Se investigará el estado de las inmunoglobulinas IgM e IgG contra el parvovirus B19 o el contacto con un caso sospechoso de eritema infeccioso. Los seronegativos para HPV-B19 se volverán a realizar la prueba 2 o 3 semanas después. El estado de las inmunoglobulinas (IgM e IgG) del VPH-B19 se determinará mediante la tecnología de inmunoensayos quimioluminiscentes (CLIA) de (Diasorin, Saluggia, Italia). Además, se realizarán pruebas serológicas para los virus de hepatitis, VIH, CMV y EBV para excluir otras infecciones virales recientes. Se realizarán cultivos de sangre y sensibilidad para excluir septicemia. La presencia de signos, síntomas, IgM específica del VPH-B19 y la ausencia de IgM de otros virus se considerará prueba de una infección reciente sintomática por el VPH-B19. Los pacientes serán divididos en base a criterios previos en dos grupos.

Grupo I = pacientes HHA con infección aguda sintomática por VPH-B19, Grupo II = pacientes HHA sin infección aguda sintomática por VPH-B19. Luego, los pacientes del grupo I se subdividirán según la enfermedad subyacente en tres subgrupos: Grupo Ia: HPV-B19(+)β-talasemia, Grupo Ib: HPV-B19(+)HS y Grupo Ic: HPV-B19(+)SCA .

Se compararán las diferentes características de presentación de la infección por VPH-B19, como varias citopenias, lesión renal aguda (IRA), hepatitis y nivel de hiperbilirrubinemia en el grupo I. La FRA se diagnosticará y clasificará según las últimas guías. Se considerará hiperbilirrubinemia extrema cuando la bilirrubina total >25 mg/dL. Se registró la presentación clínica al inicio del estudio.

7.4. Otras investigaciones El diagnóstico de las manifestaciones extrahematológicas del VPH-B19, los trastornos autoinmunitarios asociados, las inmunodeficiencias celulares y humorales se determinarán mediante varios métodos, como la detección de varios autoanticuerpos, la citometría de flujo y el nivel de inmunoglobulinas séricas.

Los estudios histopatológicos de las biopsias de MO, bazo e hígado se realizarán después de la aceptación de los pacientes en condiciones restringidas y de acuerdo con las pautas para una indicación de biopsia como:

• La aspiración de MO y la biopsia se realizarán en pacientes con BMF grave persistente que no respondan al tratamiento.
• Biopsia esplénica de pacientes que serán sometidos a esplenectomía electiva de acuerdo con las recomendaciones sobre esplenectomía en HHA(13).
• Se realizará una biopsia de hígado para pacientes con función hepática persistentemente anormal con prueba serológica positiva a colangitis autoinmune o esclerosante para diferenciar la enfermedad subyacente para un manejo adecuado.

La evaluación radiológica mediante ecocardiografía, radiografía de tórax y huesos largos y ecografía abdominal se realizará de forma rutinaria para el cribado de todos los pacientes. Los pacientes HHA con hiperbilirrubinemia extrema o ictericia obstructiva serán examinados mediante colangiopancreatografía por resonancia magnética (CPRM).

Los pacientes del grupo I serán seguidos mensualmente durante al menos un año después de la infección por VPH-B19. Los pacientes del grupo II serán seguidos diligentemente durante el tiempo de redacción de este manuscrito. Durante este período, se revisarán las complicaciones y los perfiles de laboratorio, incluida la aspiración de MO si el paciente tuvo citopenias severas. Todos los pacientes serán escaneados por ecocardiografía y examinados por ultrasonido para ver el tamaño de la vesícula biliar, los riñones, el bazo y el hígado (cm). Se registrarán los eventos de interés, como insuficiencia medular (BMF), secuestro de bazo, dolor torácico, crisis vasooclusiva, colelitiasis, colecistitis y coledocolitiasis y frecuencia transfusional