Parvovirus B19-infeksjon hos pasienter med arvelig hemolytisk anemi

HPV-B19 er det minste enkeltstrengede, lineære DNA-viruset som forårsaker sykdommer hos mennesker. Eksponering for luftveissekret er den vanligste måten å overføre dette viruset på. Infeksjon er assosiert med en rekke manifestasjoner som spenner fra asymptomatiske til alvorlige komplikasjoner som avhenger av vertens hematologiske og immunologiske status. Ingen prospektive komparative studier undersøkte risikoen forbundet med dette patogene viruset og forutså sykdomsforløpet og sykeligheten blant pasienter med arvelig hemolytisk anemi (HHA) klassifisert etter deres underliggende sykdommer.

Ingen har studert de underliggende årsakene til de forskjellige og uvanlige presentasjonene ved akutt symptomatisk HPV-B19-infeksjon hos pasienter med arvelig hemolytisk anemi. Slik at denne første head-to-head-studien for å sammenligne thalassemi, sigdcelleanemi (SCA) og sfærocytose (HS)-pasienter presenterte med akutt symptomatisk HPV-B19-infeksjon.

Å studere forholdet mellom viremi, humoral immunrespons og den underliggende sykdommen hos pasienter med akutt symptomatisk HPV-B19-infeksjon bør være nyttig for å klargjøre de udiagnostiserte patofysiologiske mekanismene og andre tilleggsfaktorer for å forbedre diagnosen og behandlingen.

Dessuten vil tidlig diagnostisering av risikofaktorer for uvanlige presentasjoner av akutt symptomatisk HPV-B19-infeksjon være et nyttig verktøy for bedre behandlingsstrategi, oppfølging og prognose samt forebygge fremtidige komplikasjoner

Pasienter innlagt fra hematologiske klinikker og akuttmottak ved Sohag og Assiut universitetssykehus for HHA-relaterte komplikasjoner eller manifestasjoner som tyder på HHA, ble screenet kontinuerlig mellom februar 2018 og februar 2020 for registrering i denne studien og fulgt månedlig i minst ett år og 3 år etter HPV-B19 infeksjon.

Design av studiet

1. Pasienter

De første 2 årene vil kandidatpasientene som vil ha bevis for HHA og/eller vil presentere manifestasjoner som tyder på HHA og samtykker i å følge oppfølgingsinstruksjonene, bli screenet for registrering i denne studien og ytterligere vil bli fulgt i minst ett år post-HPV-B19-infeksjon. Pasientdata vil inkluderes demografi, relevante komorbiditeter, behov for sykehusinnleggelse, behov for blod- eller plasmatransfusjon, nyreerstatningsterapi eller plasmautveksling, sykehusopphold, fullført sykehusinnleggelse (sykehusutskrivning og død), hjertehendelser, nevrologiske og respiratoriske hendelser. hendelser, type behandlinger som administreres og inflammatoriske laboratorieparametre.

Diagnose av HHA hos studiepasientene

Laboratorieundersøkelser

1. Rutinemessige biokjemiske undersøkelser Lever- og nyrefunksjonstester (LFT), bilirubin, blodsukker, lipid og indikerte hormonprofiler vil bli utført på Cobas c 311& modulær P autoanalysator (Roche Diagnostics, Mannheim, Tyskland), laktatdehydrogenase (LDH)

   : analyse vil bli utført med Dimension Rx Max-Siemens & urinanalyse, og albumin kreatinin ratio vil bli utført for alle pasienter.

2. Hematologisk analyse Fullstendig blodtelling: perifere blodprøver vil bli tatt ut for diagnostiske laboratorieundersøkelser og rutinemessig oppfølging. 2 ml blod vil bli samlet på kalium-etylendiamintetraeddiksyre (EDTA) antikoagulantbelagt rør for CBC ved bruk av Cell-Dyn 3700, automatisert celleteller (Abbott diagnostic, Dallas, USA).

   Arvelig hemolytisk anemi-diagnose HHA vil bli mistenkt av klinisk/familiehistorie av pasient, undersøkelser og laboratorietester inkludert fullstendig blodtelling (CBC), beregning av røde blodlegemer (RBC), korrigert retikulocyttantall, perifert blodutstryk (PBS) , jernstudie, totalt og direkte bilirubin (TB, DB), økt serum LDH, redusert serum haptoglobin og negativ direkte antiglobulin (Coombs) test.

   Bekreftelse av HHA og identifikasjon av undertyper vil bli gjort av en rekke spesialiserte undersøkelser som følger:

   A. Diagnose av hemoglobinopati

   Protokollen for Hb-elektroforese, sigdløselighetstesting og studier av Hb-fraksjoner med høyytelses væskekromatografi (HPLC) vil bli brukt for diagnostisering av hemoglobinopatier, slik som SCA og talassemi som tidligere beskrevet.

   B. Diagnostisering av RBC Membranopati og Enzymopati Arvelige røde blodlegemer membranforstyrrelser, som HS og elliptocytose vil bli identifisert ved blodprøveundersøkelse, røde blodlegemer osmotisk fragilitetstest (OFT) med og uten 24 timers inkubasjon, surgjort glyserollysetest (AGLT), og RBC-merking med eosin-5'-maleimid (EMA) fargestoff og påfølgende måling av RBC gjennomsnittlig fluorescensintensitet (MFI) ved flowcytometri som tidligere beskrevet.

   Pasienter som vurderes å ha HS vil basere seg på kliniske og laboratoriemessige tegn på kronisk hemolyse, tilstedeværelse av sfærocytter ved PBS, pluss to positive tester (OFT, AGLT og EMA bindingstest) eller minst én test med en familiehistorie med HS, og ekskludering av andre årsaker til sekundær sfærocytose.

   Alle pasienter vil bli evaluert for RBC-enzymes aktivitet, slik som glukose-6-fosfatdehydrogenase (G6PD) for å oppdage sameksistensen av RBC-enzymopatier og membranopati.

3. Påvisning av HPV-B19 og HHA-pasienters sammenligningsgrupper I løpet av studieperioden vil enhver HHA-pasient ha manifestasjoner som tyder på HPV-B19-infeksjon (feber/ muskelsmerter/utslett/ artropati/ lymfadenopati/ raskt fall i Hb-nivå og retikulocytopeni) og /eller kontakt med et mistenkt tilfelle av erythema infectiosum vil bli undersøkt for anti-parvovirus B19 IgM og IgG immunglobulinstatus. De HPV-B19 seronegative vil bli testet på nytt 2 til 3 uker senere. HPV-B19 immunoglobuliner (IgM og IgG) status vil bli bestemt ved kjemiluminescerende immunoassays (CLIA) teknologi fra (Diasorin, Saluggia, Italia). I tillegg vil serologiske tester for hepatitt-, HIV-, CMV- og EBV-virus bli utført for å utelukke andre nylige virusinfeksjoner. Blodkulturer og sensitivitet vil bli utført for å utelukke septikemi. Tilstedeværelsen av tegn, symptomer, HPV-B19-spesifikk IgM og fravær av IgM fra andre virus vil bli vurdert som bevis på nylig symptomatisk HPV-B19-infeksjon. Pasientene vil bli delt inn i to grupper basert på tidligere kriterier.

Gruppe I= HHA-pasienter med akutt symptomatisk HPV-B19-infeksjon, Gruppe II= HHA-pasienter uten akutt symptomatisk HPV-B19-infeksjon. Deretter vil gruppe I-pasienter i henhold til underliggende sykdom deles inn i tre undergrupper: Gruppe Ia: HPV-B19(+)β-thalassemi, gruppe Ib: HPV-B19(+)HS og gruppe Ic: HPV-B19(+)SCA .

De forskjellige presenterende trekk ved HPV-B19-infeksjon, som en rekke cytopenier, akutt nyreskade (AKI), hepatitt og nivå av hyperbilirubinemi i gruppe I vil bli sammenlignet. AKI vil bli diagnostisert og klassifisert i henhold til de siste retningslinjene. Ekstrem hyperbilirubinemi vil bli vurdert når total bilirubin >25 mg/dL. Den kliniske presentasjonen ved baseline ble registrert.

7.4. Andre undersøkelser Diagnosen av HPV-B19 ekstrahematologiske manifestasjoner, assosierte autoimmune lidelser, cellulære og humorale immundefekter vil bli bestemt ved hjelp av flere metoder som påvisning av flere autoantistoffer, flowcytometri, serumimmunoglobulinnivå.

Histopatologiske studier av BM-, milt- og leverbiopsier vil bli gjort etter pasientens aksept under begrensede forhold og i henhold til retningslinjer for en indikasjon på biopsi som:

• BM-aspirasjon og biopsi vil bli utført for pasienter med vedvarende alvorlig BMF som ikke responderte på behandling.
• Miltbiopsi fra pasienter som skal sendes til elektiv splenektomi i henhold til anbefalinger vedrørende miltoperasjon ved HHA(13).
• Leverbiopsi vil bli gjort for pasienter med vedvarende unormal leverfunksjon med serologisk test positiv til autoimmun eller skleroserende kolangitt for å skille den underliggende sykdommen for riktig behandling.

Radiologisk vurdering ved ekkokardiografi, røntgen av bryst og lange bein, og abdominal ultralyd vil rutinemessig bli utført for screening av alle pasienter. HHA-pasientene med ekstrem hyperbilirubinemi eller obstruktiv gulsott vil bli screenet med magnetisk resonans kolangiopankreatografi (MRCP).

Gruppe I-pasienter vil bli fulgt månedlig i minst ett år etter HPV-B19-infeksjon. Gruppe II-pasienter vil bli flittig fulgt under skriving av dette manuskriptet. I løpet av denne perioden vil komplikasjoner og laboratorieprofiler inkludert BM-aspirasjon hvis pasienten hadde alvorlig cytopeni, bli kontrollert. Alle pasienter vil bli skannet med ekkokardiografi og undersøkt med ultralyd for å se størrelsen på galleblæren, nyrene, milten og leveren (cm). Hendelsene av interesse vil bli registrert, slik som benmargssvikt (BMF), miltsekvestrering, brystsmerter, vaso-okklusiv krise, kolelithiasis, kolecystitt og koledokolitiasis og transfusjonsfrekvens