Parvovirus-B19-Infektion bei Patienten mit hereditärer hämolytischer Anämie

HPV-B19 ist das kleinste einzelsträngige, lineare DNA-Virus, das beim Menschen Krankheiten verursacht. Der Kontakt mit Atemwegssekreten ist der häufigste Übertragungsweg dieses Virus. Eine Infektion ist mit einer Vielzahl von Manifestationen verbunden, die von asymptomatischen bis hin zu schweren Komplikationen reichen und vom hämatologischen und immunologischen Status des Wirts abhängen. Keine prospektiven Vergleichsstudien untersuchten die mit diesem pathogenen Virus verbundenen Risiken und sagten den Krankheitsverlauf und die Morbidität bei Patienten mit hereditärer hämolytischer Anämie (HHA) voraus, klassifiziert nach ihren Grunderkrankungen.

Niemand hat die zugrunde liegenden Ursachen für die unterschiedlichen und ungewöhnlichen Erscheinungsformen einer akuten symptomatischen HPV-B19-Infektion bei Patienten mit hereditärer hämolytischer Anämie untersucht. Damit ist diese erste direkte Studie zum Vergleich von Patienten mit Thalassämie, Sichelzellenanämie (SCA) und Sphärozytose (HS) mit akuter symptomatischer HPV-B19-Infektion möglich.

Die Untersuchung des Zusammenhangs zwischen Virämie, humoraler Immunantwort und der zugrunde liegenden Erkrankung bei Patienten mit akuter symptomatischer HPV-B19-Infektion sollte hilfreich sein, um die nicht diagnostizierten pathophysiologischen Mechanismen und andere zusätzliche Faktoren zu klären und so die Diagnose und Behandlung zu verbessern.

Darüber hinaus wird die frühzeitige Diagnose von Risikofaktoren ungewöhnlicher Erscheinungsformen einer akuten symptomatischen HPV-B19-Infektion ein nützliches Instrument für eine bessere Behandlungsstrategie, Nachsorge und Prognose sowie zur Vermeidung künftiger Komplikationen sein

Patienten, die aus hämatologischen Kliniken und Notaufnahmen der Universitätskliniken Sohag und Assiut wegen HHA-bedingter Komplikationen oder Manifestationen, die auf HHA hindeuten, aufgenommen wurden, wurden zwischen Februar 2018 und Februar 2020 kontinuierlich auf die Aufnahme in diese Studie untersucht und mindestens ein Jahr und drei Jahre danach monatlich beobachtet HPV-B19-Infektion.

Design der Studie

1. Patienten

In den ersten zwei Jahren werden die Kandidatenpatienten, die Hinweise auf HHA haben und/oder Symptome aufweisen, die auf HHA hinweisen und sich bereit erklären, die Anweisungen zur Nachsorge einzuhalten, auf die Aufnahme in diese Studie überprüft und weitere werden mindestens ein Jahr lang beobachtet nach einer HPV-B19-Infektion. Zu den Patientendaten gehören Demografie, relevante Komorbiditäten, Notwendigkeit einer Krankenhauseinweisung, Notwendigkeit einer Blut- oder Plasmatransfusion, Nierenersatztherapie oder Plasmaaustausch, Krankenhausaufenthaltsdauer, Abschluss des Krankenhausaufenthalts (Entlassung aus dem Krankenhaus und Tod), kardiale Ereignisse, neurologische und respiratorische Ereignisse Ereignisse, Art der verabreichten Behandlungen und entzündliche Laborparameter.

Diagnose von HHA bei den Studienpatienten

Laboruntersuchungen

1. Routinemäßige biochemische Untersuchungen: Leber- und Nierenfunktionstests (LFTs), Bilirubin, Blutzucker, Lipid und angegebene Hormonprofile werden mit dem automatischen Analysegerät Cobas c 311 & modular P (Roche Diagnostics, Mannheim, Deutschland) sowie Laktatdehydrogenase (LDH) durchgeführt.

   : Die Analyse wird mit Dimension Rx Max-Siemens und einer Urinanalyse durchgeführt, und das Albumin-Kreatinin-Verhältnis wird für alle Patienten durchgeführt.

2. Hämatologische Analyse Vollständiges Blutbild: Es werden periphere Blutproben für diagnostische Laboruntersuchungen und routinemäßige Nachuntersuchungen entnommen. 2 ml Blut werden in einem mit Kalium-Ethylendiamin-Tetraessigsäure (EDTA) beschichteten Röhrchen für Blutbild unter Verwendung des automatischen Zellzählers Cell-Dyn 3700 (Abbott Diagnostic, Dallas, USA) gesammelt.

   Diagnose einer hereditären hämolytischen Anämie: Der Verdacht auf HHA wird durch die klinische/familiäre Vorgeschichte des Patienten, Untersuchungen und Labortests, einschließlich vollständigem Blutbild (CBC), Berechnung der Indizes roter Blutkörperchen (RBCs), korrigierter Retikulozytenzahl, peripherer Blutausstrich (PBS), gestellt. , Eisenstudie, Gesamt- und direktes Bilirubin (TB, DB), erhöhtes Serum-LDH, verringertes Serum-Haptoglobin und negativer direkter Antiglobulintest (Coombs).

   Die Bestätigung von HHA und die Identifizierung von Subtypen erfolgt durch eine Reihe spezialisierter Untersuchungen wie folgt:

   A. Diagnose einer Hämoglobinopathie

   Das Protokoll der Hb-Elektrophorese, des Sichellöslichkeitstests und der Untersuchung von Hb-Fraktionen mit Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) wird für die Diagnose von Hämoglobinopathien wie SCA und Thalassämie verwendet, wie zuvor beschrieben.

   B. Diagnose von Erythrozytenmembranopathie und Enzymopathie. Erbliche Erkrankungen der Erythrozytenmembran wie HS und Elliptozytose werden durch Blutausstrichuntersuchung, Erythrozyten-Osmotischer Fragilitätstest (OFT) mit und ohne 24-stündiger Inkubation, angesäuerten Glycerin-Lyse-Test (AGLT) und und RBC-Markierung mit Eosin-5'-Maleimid (EMA)-Farbstoff und anschließende Messung der mittleren RBC-Fluoreszenzintensität (MFI) mittels Durchflusszytometrie, wie zuvor beschrieben.

   Patienten, von denen angenommen wird, dass sie HS haben, basieren auf klinischen und laborchemischen Anzeichen einer chronischen Hämolyse, dem Vorhandensein von Sphärozyten bei PBS sowie zwei positiven Tests (OFT, AGLT und EMA-Bindungstest) oder mindestens einem Test mit einer HS-Familienanamnese und dem Ausschluss von HS andere Ursachen der sekundären Sphärozytose.

   Alle Patienten werden auf die Aktivität von Erythrozyten-Enzymen wie Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PD) untersucht, um die Koexistenz von Erythrozyten-Enzymopathien und Membranopathien festzustellen.

3. Nachweis der Vergleichsgruppen von HPV-B19- und HHA-Patienten Während des Studienzeitraums weist jeder HHA-Patient Manifestationen auf, die auf eine HPV-B19-Infektion hinweisen (Fieber/Muskelschmerzen/Hautausschlag/Arthropathie/Lymphadenopathie/schneller Abfall des Hb-Spiegels und Retikulozytopenie) und /oder Kontakt mit einem Verdacht auf Erythema infectiosum wird auf den Anti-Parvovirus-B19-IgM- und IgG-Immunglobulinstatus untersucht. Diese HPV-B19-seronegativen Patienten werden 2 bis 3 Wochen später erneut getestet. Der Status der HPV-B19-Immunglobuline (IgM und IgG) wird durch Chemilumineszenz-Immunoassays (CLIA)-Technologie von (Diasorin, Saluggia, Italien) bestimmt. Darüber hinaus werden serologische Tests auf Hepatitis-, HIV-, CMV- und EBV-Viren durchgeführt, um andere kürzlich aufgetretene Virusinfektionen auszuschließen. Um eine Septikämie auszuschließen, werden Blutkulturen und Empfindlichkeiten durchgeführt. Das Vorhandensein von Anzeichen, Symptomen, HPV-B19-spezifischem IgM und das Fehlen von IgM anderer Viren wird als Beweis für eine kürzliche symptomatische HPV-B19-Infektion gewertet. Die Patienten werden anhand vorheriger Kriterien in zwei Gruppen eingeteilt.

Gruppe I = HHA-Patienten mit akuter symptomatischer HPV-B19-Infektion, Gruppe II = HHA-Patienten ohne akute symptomatische HPV-B19-Infektion. Anschließend werden Patienten der Gruppe I entsprechend der Grunderkrankung in drei Untergruppen unterteilt: Gruppe Ia: HPV-B19(+)β-Thalassämie, Gruppe Ib: HPV-B19(+)HS und Gruppe Ic: HPV-B19(+)SCA .

Die verschiedenen Merkmale einer HPV-B19-Infektion, wie z. B. eine Reihe von Zytopenien, akute Nierenschädigung (AKI), Hepatitis und der Grad der Hyperbilirubinämie in Gruppe I, werden verglichen. AKI wird gemäß den letzten Richtlinien diagnostiziert und klassifiziert. Eine extreme Hyperbilirubinämie wird in Betracht gezogen, wenn das Gesamtbilirubin >25 mg/dl beträgt. Das klinische Erscheinungsbild zu Studienbeginn wurde aufgezeichnet.

7.4. Sonstige Untersuchungen Die Diagnose von extrahämatologischen Manifestationen von HPV-B19, damit verbundenen Autoimmunerkrankungen sowie zellulären und humoralen Immundefekten wird mithilfe verschiedener Methoden wie dem Nachweis mehrerer Autoantikörper, Durchflusszytometrie und dem Serum-Immunglobulinspiegel ermittelt.

Histopathologische Untersuchungen von BM-, Milz- und Leberbiopsien werden nach der Aufnahme durch die Patienten unter eingeschränkten Bedingungen und gemäß den Richtlinien für die Indikation einer Biopsie durchgeführt, wie zum Beispiel:

• Bei Patienten mit anhaltendem schwerem BMF, der nicht auf die Behandlung anspricht, werden eine BM-Aspiration und eine Biopsie durchgeführt.
• Milzbiopsie von Patienten, bei denen gemäß den Empfehlungen zur Splenektomie bei HHA eine elektive Splenektomie durchgeführt wird(13).
• Bei Patienten mit anhaltend abnormaler Leberfunktion und einem positiven serologischen Test auf Autoimmun- oder sklerosierende Cholangitis wird eine Leberbiopsie durchgeführt, um die Grunderkrankung für eine ordnungsgemäße Behandlung zu differenzieren.

Zur Untersuchung aller Patienten wird routinemäßig eine radiologische Untersuchung mittels Echokardiographie, Röntgen des Brustkorbs und der Röhrenknochen sowie einer Ultraschalluntersuchung des Abdomens durchgeführt. Die HHA-Patienten mit extremer Hyperbilirubinämie oder obstruktivem Ikterus werden mittels Magnetresonanz-Cholangiopankreatikographie (MRCP) untersucht.

Patienten der Gruppe I werden mindestens ein Jahr lang nach der HPV-B19-Infektion monatlich beobachtet. Patienten der Gruppe II werden während der Erstellung dieses Manuskripts sorgfältig betreut. Während dieses Zeitraums werden Komplikationen und Laborprofile einschließlich der BM-Aspiration überprüft, wenn der Patient eine schwere Zytopenie hatte. Alle Patienten werden mittels Echokardiographie gescannt und per Ultraschall untersucht, um die Größe von Gallenblase, Nieren, Milz und Leber (cm) anzuzeigen. Die interessierenden Ereignisse werden aufgezeichnet, wie z. B. Knochenmarkversagen (BMF), Milzsequestrierung, Brustschmerzen, vasookklusive Krise, Cholelithiasis, Cholezystitis und Choledocholithiasis sowie Transfusionshäufigkeit