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遠心分離された異なる血小板濃縮物が歯科インプラント周囲の骨リモデリングに及ぼす影響

2021年4月14日 更新者:Muhammet Atilgan

高度な血小板に富むフィブリンと濃縮成長因子がインプラントのオッセオインテグレーションに及ぼす影響を、インプラント周囲のクレビクル液中の TNF-α、RANKL、および OPG のレベルと比較して分析する: スプリットマウス デザイン研究

血液から得られた濃縮血小板は、歯周外科手術における再生生体材料として使用されてきました。 骨形成細胞の移動と増殖に加えて、血小板は血管の形成を増加させ、炎症反応を誘発することにより、骨の再生を加速します。 実験的研究により、血小板から放出された成長因子がインプラント表面の骨芽細胞の分化を促進し、骨とインプラントの接触面を拡大することが明らかになりました。 血小板濃縮物である多血小板フィブリン (PRF) は、2001 年に Choukroun によって導入され、かなりの量のサイトカインが含まれています。 2014 年に発見された Advanced-platelet rich fibrin (A-PRF) は、より高密度の白血球濃度とより柔らかい一貫性を持つ PRF 誘導体です。 別の血小板誘導体である濃縮増殖因子 (CGF) は、A-PRF とは異なります。これは、より硬いフィブリン構造に閉じ込められた濃縮増殖因子が多数含まれているためです。 さまざまな遠心速度で得られた A-PRF と CGF の両方が、骨細胞の増殖と分化を加速することが報告されました。

刺激された骨芽細胞および骨細胞は、マクロファージコロニー刺激因子および核因子カッパ B リガンド (RANKL) の受容体活性化因子を産生することにより、リモデリングプロセスを開始します。以前の研究では、TNF-α が RANKL とは無関係に骨吸収を開始することが報告されました。 TNF ファミリーのサイトカイン受容体であり、骨芽細胞、線維芽細胞、および多くの宿主細胞によって産生されます。 OPG は RANKL に結合し、RANKL-RANK 相互作用を防止します。したがって、OPG は破骨細胞活性を阻害します。 RANKL/OPG 比は、骨のリモデリング、破骨細胞活性、または骨形成を推定するための指標として使用されます。

血栓形成中のサイトカイン、成長因子、ケモカイン、および化学メディエーター間の相互作用は、複雑なシグナル伝達プロセスをもたらします。 創傷内の高濃度のサイトカインと成長因子は、マクロファージ、好中球、およびリンパ球の移動を促進します。 したがって、フィブリンマトリックスから放出されたサイトカインがこれらのシグナル伝達経路に影響を与える可能性があることが報告されました。 この研究では、研究者は、歯科移植における CGF または A-PRF の適用が、炎症、増殖、およびリモデリング プロセスに寄与すると仮定しました。 したがって、この研究の目的は、CGF と A-PRF が歯科インプラントのオッセオインテグレーションに及ぼす影響を、臨床、X 線写真、および生化学的側面で調査することでした。

調査の概要

詳細な説明

この研究は、歯周病クリニックで実施されました。 研究プロトコルは、研究の開始前に、ハタイ ムスタファ ケマル大学人間倫理委員会によって承認されました (承認番号:)。 選択基準を満たし、研究への参加を志願した患者には、研究に関する詳細な情報が提供され、手順の前にインフォームドコンセントが提供されました。

患者の選択:

病歴から健康であることが判明し、臨床検査を受け、放射線画像検査を受けた個人の包含基準は次のとおりです。

  • 18歳以上
  • 下顎の対称的な無歯領域
  • 理想的な歯科インプラントの配置を可能にする十分な骨の幅と高さ
  • タバコを吸わない人
  • 角化した歯肉の幅が少なくとも 2 mm、インプラント部位の軟部組織の厚さが 3 mm

以下に示す基準のいずれかを満たす個人は、研究から除外されました。

  • 糖尿病、代謝性骨疾患、関節リウマチ、皮膚粘膜疾患、免疫疾患、肝炎、HIVなどの全身疾患のある患者
  • 何らかの理由で抗生物質、抗炎症剤、コルチコステロイド、免疫抑制剤、抗凝固剤、またはホルモン避妊薬を服用していた個人、処置の少なくとも6か月前、およびその時点または以前にビスフォスフォネートを服用していた人。
  • インプラント部位に病状または欠陥のある個人。
  • インプラント部位での病歴の増強。
  • 歯周病が重度で、口腔衛生状態が悪い人。
  • インプラントに隣接する歯の重度の虫歯または歯内病変。
  • プラークコントロールが困難な口腔内矯正器具や補綴物を使用している方。
  • 妊娠中および授乳中の個人。 無作為化と盲検 研究グループと手術部位の両方を、手術直前に閉じた封筒を描くことによって決定しました。 研究の臨床および放射線学的記録は、割り当てを知らなかった経験豊富な歯周病専門医によって入手されました。

外科的処置

浸潤麻酔は、1:100,000 エピネフリンを含む麻酔液で行われました。 15c のメスを使用して歯槽頂の中央を切開し、全層の皮弁を持ち上げました。 ドリルの手順は、インプラントの直径と下顎の無歯顎領域の必要性に応じて実行されました (600 rpm および 25 Ncm)。 歯槽骨の応力を最小限に抑えるために、すべてのインプラントに皿穴ドリルが使用されました。 インプラント部位に隣接して天然歯が存在する場合、歯とインプラント腔との間に少なくとも 1.5​​ mm の距離を残し、インプラントの頬側および舌側に少なくとも 1 mm の骨プレートが存在するようにしました。インプラント。 遠心分離された血液から得られたCGFまたはA-PRF自己は、PRFボックスに入れた。 このようにして、フィブリンネットワークから漏出する増殖因子および血小板に富む液体がボックス内に流入することが可能になった。 液体を注射器で集め、乾燥領域がなくなるまでインプラント表面に塗布した。 さらに、インプラント部位をこの液体で満たし、40 rpm および 25 Ncm のトルクでインプラントを 0.5 mm 骨縁下に配置しました。 CGF または A-PRF から得られた膜をインプラントの上に配置し、歯槽骨を十分に覆い、ヒーリング キャップを配置しました。 CGF または A-PRF を使用しないインプラント埋入は、対照群の顎の反対側で実施されました。 インプラントの安定性は、共振周波数分析を使用して決定されました。 手術部位は、5/0 シルクを使用して縫合されました。 すべての患者は、必要がない限り、薬を服用しないようにアドバイスされました。 抜糸は術後10日目でした。 すべての手術は5年の経験を持つ医師によって行われました CGFとA-PRFの準備手順 インプラント手術を開始する前に、患者の前腕の肘静脈から9 mLの血液を採取し、抗凝固剤を含まないチューブに移し、遠心分離しました. CGF は、自動調整された遠心分離機を使用して得られ、交互に制御された速度 (2700 rpm で 2 分、2400 rpm で 4 分、2700 rpm で 4 分、3000 rpm で 3 分) で発射されました (MEDIFUGE、Silfradentsrl、S. Sofia 、イタリア)。 A-PRF グループでは、血液を 1400 rpm で 14 分間遠心分離しました (Duo Centrifuge Process for PRF、フランス)。 遠心分離の結果、チューブ内に 3 つの層が形成されました。下部に赤血球層、上部に貧血小板血清層、中央に増殖因子と血小板を含むフィブリンゲル層です。 上層の血清を滅菌シリンジで除去し、フィブリン層をクランプを使用してチューブから除去した。 下層の赤血球は、はさみを使用してフィブリン構造から除去されました。

臨床測定および共鳴周波数分析 各ヒーリング キャップの 4 つの部位、近心、遠位、頬側、および舌側表面を、プラーク インデックス (PI)、歯肉インデックス (GI)、ポケット深さ (PD)、および歯肉出血インデックス (GBI) について分析しました。 )。 すべての臨床測定は、処置後 2、4、および 12 週間で繰り返されました。 共振周波数分析は、術中および術後に 4 か月目と 12 か月目に実施されました。

辺縁骨レベルの測定:

手術当日と 3 か月後に得られたキャリブレーション済みのパノラマ X 線写真を使用して、辺縁骨レベルを決定しました。 インプラントフィクスチャープラットフォームは、辺縁骨レベルの変化を測定するための閾値と見なされました。 歯科インプラントの周囲の辺縁骨がプラットフォームより下に減少すると、X線写真に2本の水平線が描かれました。最初の平面はインプラントフィクスチャーのプラットフォームにあり、2番目の平面は歯槽頂または骨の底にありました。欠陥。 辺縁骨損失の平均は、水平線上のインプラントの円筒部分の近心面および遠心面から引かれた線によって残された 2 点間の距離を測定することによって得られました。 すべての放射線測定は、それぞれの分野で経験を積んだ 2 人の検査官によって行われました。

インプラント周囲の隙間液 (PICF) の収集:

まず、インプラント部位を唾液から分離し、空気で乾燥させました。 吸収性濾紙片をヒーリングキャップの近心面と遠心面のポケットに 1 mm 入れ、そこに 30 秒間放置して、十分な量のインプラント周囲クレビクル液を吸収させました。 液体の体積は、較正された電子デバイス(Periotron 8010、Oraflow、Amityville、NY、USA)を使用して測定されました。 血液またはプラークで汚染された紙片は研究から除外されました。 紙片をパラフィンワックスで覆われた空のエッペンドルフチューブに移し、分析まで80°Cで保存しました。

生化学分析:

最初に、新鮮なリン酸緩衝生理食塩水 (PBS) を生理食塩水 (pH: 7.00、137 mM NaCl、10 mM Na2HPO4、および 2.7 mM KCl) で調製しました。 300 μL の PBS を 2 つの紙片が入った各エッペンドルフチューブに加え、室温で 30 分間放置した後、12,000 × g、4°C で 15 分間遠心分離しました。 遠心分離後、エッペンドルフチューブ内のストリップを取り除き、得られた上清をELISAに使用した。 腫瘍壊死因子アルファ(TNF-α)(Boster)、sRANKL(核因子-Kbリガンドの可溶性受容体活性化因子)(Elabscience)およびオステオプロテゲリン(OPG)(Boster)レベルは、市販のキットとサーモを使用して450 nmの波長でELISAによって測定されましたFisher Scientific Multiscan Go- フィンランド ELISA リーダー。 すべての分析は、製造元の指示に従って実行されました。

統計分析:

データは、SPSS 21 ソフトウェアを使用して 95% の信頼度で分析されました。 連続変数は、平均、標準偏差、中央値、最小値、および最大値として表されました。 カテゴリ変数は、度数とパーセンテージで表されます。 データの分布の正規性は、Shapiro-Wilk 検定を使用して分析し、Mann Whitney U 検定と Student t 検定を使用して、独立したグループを比較しました。 Wilcoxon の符号順位検定と Friedman 検定を使用して、従属変数を比較しました。 フリードマン検定を使用して有意差が決定された場合、ボンフェローニ補正を伴うウィルコクソン検定を使用して、2 つの測定点の比較を分析しました (p < 0.016)。 p 値は、すべての分析で 0.05 と決定されました。

研究の種類

介入

入学 (実際)

40

段階

  • 適用できない

連絡先と場所

このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。

研究場所

      • Hatay、七面鳥、31060
        • Mustafa Kemal University

参加基準

研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。

適格基準

就学可能な年齢

21年~79年 (アダルト、OLDER_ADULT)

健康ボランティアの受け入れ

はい

受講資格のある性別

全て

説明

包含基準:

  • 18歳以上
  • 下顎の対称的な無歯領域
  • 理想的な歯科インプラントの配置を可能にする十分な骨の幅と高さ
  • タバコを吸わない人
  • 角化した歯肉の幅が少なくとも 2 mm、インプラント部位の軟部組織の厚さが 3 mm

除外基準:

  • 糖尿病、代謝性骨疾患、関節リウマチ、皮膚粘膜疾患、免疫疾患、肝炎、HIVなどの全身疾患のある患者
  • 何らかの理由で抗生物質、抗炎症剤、コルチコステロイド、免疫抑制剤、抗凝固剤、またはホルモン避妊薬を服用していた個人、処置の少なくとも6か月前、およびその時点または以前にビスフォスフォネートを服用していた人。
  • インプラント部位に病状または欠陥のある個人。
  • インプラント部位での病歴の増強。
  • 歯周病が重度で、口腔衛生状態が悪い人。
  • インプラントに隣接する歯の重度の虫歯または歯内病変。
  • プラークコントロールが困難な口腔内矯正器具や補綴物を使用している方。
  • 妊娠中および授乳中の個人。

研究計画

このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。

研究はどのように設計されていますか?

デザインの詳細

  • 主な目的:処理
  • 割り当て:ランダム化
  • 介入モデル:平行
  • マスキング:四重

武器と介入

参加者グループ / アーム
介入・治療
実験的:CGFテストグループ
濃縮成長因子液をインプラント腔に注入します。 また、CGF メンブレンがインプラントとソケットを覆っていました。 それがCGF対照群とCGF試験群の唯一の違いです
濃縮成長因子(CGF)液体をインプラントキャビティに適用し、CGF膜で覆われたソケットとインプラント
実験的:A-PRFテストグループ
Advanced Platelet Rich Fibrin 液体がインプラントの空洞に適用されます。 また、A-PRF メンブレンがインプラントとソケットを覆っていました。 それがA-PRF対照群とA-PRF試験群の唯一の違いです
高度な多血小板フィブリン (A-PRF) 液体をインプラント キャビティに適用し、A-PRF 膜で覆われたソケットとインプラント
実験的:CGF コントロール グループ
歯科インプラントの適用は、伝統的な方法で行われました。
従来のインプラント方法を適用
実験的:A-PRF コントロール グループ
歯科インプラントの適用は、伝統的な方法で行われました。
従来のインプラント方法を適用

この研究は何を測定していますか?

主要な結果の測定

結果測定
メジャーの説明
時間枠
共鳴周波数解析-I
時間枠:手術直後
共鳴周波数分析は、歯科用インプラントのプライマーの安定性を判断するために使用される方法です。
手術直後
限界骨損失
時間枠:3ヶ月目
研究の 3 か月目に得られたパノラマ X 線写真の近心面および遠位面から歯科インプラントの周囲で測定された限界骨損失。
3ヶ月目
共振周波数解析-II
時間枠:4週目
共鳴周波数分析は、歯科用インプラントのプライマーの安定性を判断するために使用される方法です。
4週目
共鳴周波数解析-Ⅲ
時間枠:3ヶ月目
共鳴周波数分析は、歯科用インプラントのプライマーの安定性を判断するために使用される方法です。
3ヶ月目
TNF-α-I
時間枠:2週目
インプラント周囲のクレビクル液から分離されたTNF-α。 TNF-α のレベルは ELISA によって分析され、そのレベルは pg/dL として決定されました
2週目
TNF-α-II
時間枠:4週目
インプラント周囲のクレビクル液から分離されたTNF-α。 TNF-α のレベルは ELISA によって分析され、そのレベルは pg/dL として決定されました
4週目
TNF-α-III
時間枠:3ヶ月目
インプラント周囲のクレビクル液から分離されたTNF-α。 TNF-α のレベルは ELISA によって分析され、そのレベルは pg/dL として決定されました
3ヶ月目
RANKL-I
時間枠:2週目
RANKL は、インプラント周囲のクレビクル液から分離されました。 RANKLのレベルはELISAによって分析されており、そのレベルはpg / dLとして決定されました
2週目
ランクルⅡ
時間枠:4週目
RANKL は、インプラント周囲のクレビクル液から分離されました。 RANKLのレベルはELISAによって分析されており、そのレベルはpg / dLとして決定されました
4週目
ランクルⅢ
時間枠:3ヶ月目
RANKL は、インプラント周囲のクレビクル液から分離されました。 RANKLのレベルはELISAによって分析されており、そのレベルはpg / dLとして決定されました
3ヶ月目
OPG-I
時間枠:2週目
インプラント周囲の隙間液から分離された OPG。 OPG のレベルは ELISA によって分析されており、そのレベルは pg/dL として決定されました。
2週目
OPG-Ⅱ
時間枠:4週目
インプラント周囲の隙間液から分離された OPG。 OPG のレベルは ELISA によって分析されており、そのレベルは pg/dL として決定されました。
4週目
OPG-Ⅲ
時間枠:3ヶ月目
インプラント周囲の隙間液から分離された OPG。 OPG のレベルは ELISA によって分析されており、そのレベルは pg/dL として決定されました。
3ヶ月目
RANKL/OPG比-I
時間枠:2週目
RANKL/OPG 比は、骨のリモデリングと吸収プロセスを分析するために重要です。 RANKL/OPG 比は、RANKL レベルを OPG レベルで割ることによって得られます。
2週目
RANKL/OPG比-Ⅱ
時間枠:4週目
RANKL/OPG 比は、骨のリモデリングと吸収プロセスを分析するために重要です。 RANKL/OPG 比は、RANKL レベルを OPG レベルで割ることによって得られます。
4週目
RANKL/OPG比-Ⅲ
時間枠:3ヶ月目
RANKL/OPG 比は、骨のリモデリングと吸収プロセスを分析するために重要です。 RANKL/OPG 比は、RANKL レベルを OPG レベルで割ることによって得られます。
3ヶ月目

二次結果の測定

結果測定
メジャーの説明
時間枠
プラークインデックス-I
時間枠:2週目
プラーク インデックスは、近心、遠心、頬側、舌側を含むインプラントの 4 つの表面上の歯科インプラント周囲の目に見えるプラークの量を評価します。
2週目
プラーク指数Ⅱ
時間枠:4週目
プラーク インデックスは、近心、遠心、頬側、舌側を含むインプラントの 4 つの表面上の歯科インプラント周囲の目に見えるプラークの量を評価します。
4週目
プラーク指数Ⅲ
時間枠:3ヶ月目
プラーク インデックスは、近心、遠心、頬側、舌側を含むインプラントの 4 つの表面上の歯科インプラント周囲の目に見えるプラークの量を評価します。
3ヶ月目
歯肉指数-I
時間枠:2週目
この測定は、穏やかなプロービングでの出血の有無に基づいています。 歯肉指数 (GI) は、各部位を 0 から 3 のスケールで採点します。0 は正常で、3 は浮腫、発赤、腫れ、および自然発生を特徴とする重度の炎症です。 インプラントの 4 つの表面は、インデックス システムで評価されます。
2週目
歯肉指数-II
時間枠:4週目
この測定は、穏やかなプロービングでの出血の有無に基づいています。 歯肉指数 (GI) は、各部位を 0 から 3 のスケールで採点します。0 は正常で、3 は浮腫、発赤、腫れ、および自然発生を特徴とする重度の炎症です。 インプラントの 4 つの表面は、インデックス システムで評価されます。
4週目
歯肉指数-III
時間枠:3ヶ月目
この測定は、穏やかなプロービングでの出血の有無に基づいています。 歯肉指数 (GI) は、各部位を 0 から 3 のスケールで採点します。0 は正常で、3 は浮腫、発赤、腫れ、および自然発生を特徴とする重度の炎症です。 インプラントの 4 つの表面は、インデックス システムで評価されます。
3ヶ月目
プロービングデプス-I
時間枠:2週目
歯周プローブを使用して、各インプラントの 6 つの領域 (近頬、頬、離頬、近舌、舌、離舌) から歯肉溝の深さを測定し、読み取り値をチャートに記録します。
2週目
プロービング深度-II
時間枠:4週目
歯周プローブを使用して、各インプラントの 6 つの領域 (近頬、頬、離頬、近舌、舌、離舌) から歯肉溝の深さを測定し、読み取り値をチャートに記録します。
4週目
プロービングデプス-III
時間枠:3ヶ月目
歯周プローブを使用して、各インプラントの 6 つの領域 (近頬、頬、離頬、近舌、舌、離舌) から歯肉溝の深さを測定し、読み取り値をチャートに記録します。
3ヶ月目
歯肉出血指数-I
時間枠:2週目
伝統的に、プロービングによる出血は歯周病の存在を診断するために使用されてきました。これは、特に他の要因と組み合わせて使用​​される場合、歯肉の炎症の信頼できる指標です。 歯肉溝を精査した後、出血の有無を二分法で評価します。 プロービング後に出血が発生した場合 (+)、または (-)。
2週目
歯肉出血指数-II
時間枠:4週目
伝統的に、プロービングによる出血は歯周病の存在を診断するために使用されてきました。これは、特に他の要因と組み合わせて使用​​される場合、歯肉の炎症の信頼できる指標です。 歯肉溝を精査した後、出血の有無を二分法で評価します。 プロービング後に出血が発生した場合 (+)、または (-)。
4週目
歯肉出血指数-III
時間枠:3ヶ月目
伝統的に、プロービングによる出血は歯周病の存在を診断するために使用されてきました。これは、特に他の要因と組み合わせて使用​​される場合、歯肉の炎症の信頼できる指標です。 歯肉溝を精査した後、出血の有無を二分法で評価します。 プロービング後に出血が発生した場合 (+)、または (-)。
3ヶ月目

協力者と研究者

ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。

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捜査官

  • スタディディレクター:Osman Fatih ARPAG, PhD、Mustafa Kemal University

研究記録日

これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。

主要日程の研究

研究開始 (実際)

2019年10月3日

一次修了 (実際)

2020年12月15日

研究の完了 (実際)

2021年3月20日

試験登録日

最初に提出

2021年4月5日

QC基準を満たした最初の提出物

2021年4月14日

最初の投稿 (実際)

2021年4月20日

学習記録の更新

投稿された最後の更新 (実際)

2021年4月20日

QC基準を満たした最後の更新が送信されました

2021年4月14日

最終確認日

2021年4月1日

詳しくは

この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。

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