Efeitos de diferentes concentrados de plaquetas centrifugadas na remodelação óssea ao redor de implantes dentários

Este estudo foi realizado em clínicas de Periodontologia. O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética Humana da Hatay Mustafa Kemal University antes do início do estudo (número de aprovação:). Os pacientes que atenderam aos critérios de inclusão e que se voluntariaram para participar do estudo receberam informações detalhadas sobre o estudo e forneceram consentimento informado antes do procedimento.

Seleção do paciente:

Os critérios de inclusão dos indivíduos considerados hígidos a partir do histórico médico e que realizaram exame clínico e exames radiológicos foram os seguintes:

• Acima de 18 anos de idade
• Áreas edêntulas simétricas na mandíbula
• Largura e altura óssea suficientes permitindo a colocação ideal de implantes dentários
• Indivíduos que não fumam
• Pelo menos 2 mm de largura de gengiva queratinizada e 3 mm de espessura de tecido mole no local do implante

Indivíduos que atendem a qualquer um dos critérios listados abaixo foram excluídos do estudo:

• Pacientes com distúrbios sistêmicos, incluindo diabetes mellitus, doença óssea metabólica, artrite reumatoide, distúrbios mucocutâneos, distúrbios imunológicos, hepatite ou HIV
• Indivíduos que estavam em uso de antibióticos, anti-inflamatórios, corticosteroides, imunossupressores, anticoagulantes ou anticoncepcionais hormonais por qualquer motivo, pelo menos 6 meses antes do procedimento, e aqueles que estavam em uso de bisfosfonatos na época ou anteriormente.
• Indivíduos com qualquer patologia ou defeito no local do implante.
• Aumento da história no local do implante.
• Indivíduos com doença periodontal severa e má higiene oral.
• Cárie severa ou lesões endodônticas em dentes adjacentes ao implante.
• Aqueles que usam aparelhos intraorais ortodônticos ou protéticos que dificultam o controle da placa.
• Pessoas grávidas e lactantes. Randomização e cegamento Ambos os grupos de estudo e o local da cirurgia foram determinados por sorteio de um envelope fechado imediatamente antes da cirurgia. Os registros clínicos e radiológicos do estudo foram obtidos por um periodontista experiente que desconhecia a alocação

Procedimento Cirúrgico

A anestesia infiltrativa foi fornecida com uma solução anestésica contendo epinefrina 1:100.000. Uma incisão no meio da crista foi feita com um bisturi 15c e um retalho de espessura total foi elevado. O procedimento de perfuração foi realizado (600 rpm e 25 Ncm) de acordo com o diâmetro do implante e a necessidade de uma área edêntula na mandíbula. Uma broca escareada foi usada para todos os implantes para minimizar o estresse da crista óssea. No caso da presença de um dente natural adjacente ao local do implante, foi deixada uma distância de pelo menos 1,5 mm entre o dente e a cavidade do implante e a presença de placas ósseas de pelo menos 1 mm nas faces vestibular e lingual do implantar. CGF ou A-PRF autólogo obtido de sangue centrifugado foi colocado em uma caixa de PRF. Desta forma, o líquido rico em fator de crescimento e plaquetas vazando da rede de fibrina pode fluir para dentro da caixa. O líquido foi coletado com uma seringa e aplicado sobre a superfície do implante até não restar nenhuma área seca. Além disso, o local do implante foi preenchido com este líquido e a colocação subcrestal de 0,5 mm do implante foi fornecida a 40 rpm e torque de 25 Ncm. A membrana obtida do CGF ou A-PRF foi colocada sobre o implante, o suficiente para cobrir a crista óssea, e uma tampa de cicatrização foi colocada. A colocação do implante sem CGF ou A-PRF foi realizada no lado oposto da mandíbula no grupo controle. A estabilidade do implante foi determinada usando análise de frequência de ressonância. O sítio cirúrgico foi suturado com fio de seda 5/0. Todos os pacientes foram orientados a não tomar qualquer medicamento, a menos que necessário. Os pontos foram removidos aos 10 dias após a cirurgia. Todas as cirurgias foram realizadas por um médico com cinco anos de experiência Procedimento de preparo de CGF e A-PRF Antes de iniciar a cirurgia de implante, 9 mL de sangue foram retirados da veia cubital do antebraço do paciente, transferidos para um tubo sem anticoagulante e centrifugados . O CGF foi obtido usando um dispositivo de centrifugação ajustado automaticamente, disparado em velocidades alternadas e controladas (2 min a 2700 rpm, 4 min a 2400 rpm, 4 min a 2700 rpm e 3 min a 3000 rpm) (MEDIFUGE, Silfradentsrl, S. Sofia , Itália). No grupo A-PRF, o sangue foi centrifugado a 1400 rpm por 14 min (Duo Centrifuge Process for PRF, França). A centrifugação resultou em três camadas no tubo: uma camada de glóbulos vermelhos na parte inferior, uma camada de soro pobre em plaquetas na parte superior e uma camada de gel de fibrina contendo fatores de crescimento e plaquetas no meio. O soro da camada superior foi removido com uma seringa estéril e a camada de fibrina foi removida do tubo com uma pinça. Os glóbulos vermelhos na camada inferior foram removidos da estrutura de fibrina usando uma tesoura.

Medições clínicas e análise de frequência de ressonância Quatro locais de cada coroa de cicatrização, superfícies mesial, distal, bucal e lingual, foram analisados ​​quanto ao índice de placa (PI), índice gengival (GI), profundidade de bolsa (PD) e índice de sangramento gengival (GBI ). Todas as medições clínicas foram repetidas em 2, 4 e 12 semanas após o procedimento. A análise da frequência de ressonância foi realizada no intraoperatório e no pós-operatório no quarto e décimo segundo mês.

Medição dos níveis ósseos marginais:

Radiografias panorâmicas calibradas obtidas no dia da cirurgia e 3 meses após foram usadas para determinar o nível ósseo marginal. A plataforma de fixação do implante foi considerada como o limiar para medir as mudanças no nível do osso marginal. Quando o osso marginal ao redor do implante dentário diminuiu abaixo da plataforma, duas linhas horizontais foram traçadas na radiografia: o primeiro plano estava localizado na plataforma do implante e o segundo estava na crista alveolar ou na parte inferior do osso defeito. A média da perda óssea marginal foi obtida medindo-se a distância entre os dois pontos deixados pelas linhas traçadas das faces mesial e distal da parte cilíndrica do implante nas linhas horizontais. Todas as medidas radiológicas foram realizadas por dois examinadores experientes em suas áreas.

Coleta de Fluido Crevicular Peri-implantar (PICF):

Primeiro, o local do implante foi isolado da saliva e seco com ar. Uma tira de papel de filtro absorvente foi colocada 1 mm no bolso nas superfícies mesial e distal da tampa de cicatrização e foi deixada lá por 30 segundos para permitir a absorção de uma quantidade suficiente de fluido crevicular peri-implantar. O volume do fluido foi medido usando um dispositivo eletrônico calibrado (Periotron 8010, Oraflow, Amityville, NY, EUA). Tiras de papel contaminadas com sangue ou placa foram excluídas do estudo. As tiras de papel foram transferidas para um tubo Eppendorf vazio coberto com cera de parafina e armazenadas a 80 °C até a análise.

Análise Bioquímica:

Inicialmente, solução salina tamponada com fosfato (PBS) fresca foi preparada com solução salina (pH: 7,00 137 mM NaCl, 10 mM Na2HPO4 e 2,7 mM KCl]. PBS de 300 µL) foi adicionado a cada tubo Eppendorf com duas tiras de papel dentro, deixado em temperatura ambiente por 30 min e depois centrifugado a 12.000 × g a 4°C por 15 min. Após a centrifugação, as tiras do tubo Eppendorf foram retiradas e o sobrenadante obtido foi utilizado para ELISA. Os níveis de fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) (Boster), sRANKL (ativador solúvel do receptor do fator nuclear-Kb) (Elabscience) e osteoprotegerina (OPG) (Boster) foram medidos por ELISA em comprimento de onda de 450 nm usando kits comerciais e Thermo Fisher Scientific Multiscan Go- Finland ELISA Reader. Todas as análises foram realizadas de acordo com as instruções do fabricante.

Análise estatística:

Os dados foram analisados ​​com 95% de confiança usando o software SPSS 21. As variáveis ​​contínuas foram expressas como média, desvio padrão, mediana, mínimo e máximo. As variáveis ​​categóricas são expressas como frequências e porcentagens. A normalidade da distribuição dos dados foi analisada pelo teste de Shapiro-Wilk, e os testes Mann Whitney U e t de Student foram usados ​​para comparar grupos independentes. O teste de postos sinalizados de Wilcoxon e o teste de Friedman foram usados ​​para comparar as variáveis ​​dependentes. As comparações de dois pontos de medição foram analisadas pelo teste de Wilcoxon com correção de Bonferroni (p < 0,016) se uma diferença significativa fosse determinada pelo teste de Friedman. O valor de p foi determinado como 0,05, para todas as análises.