APAP誘発性薬物誘発性肝損傷の感受性遺伝子のスクリーニング：症例対照研究 (PAIN)

I.オブジェクトを調査します

（i）グループ戦略へ：継続的なグループ。

（ii）グループ化戦略：

1. ケースグループ。

   包含基準：

   • アセトアミノフェン（またはアセトアミノフェン含有薬）摂取の明確な歴史。
   • 摂取の履歴が不明な場合、アセトアミノフェン成分の血漿および/または尿検査。
   • アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）またはアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）≥1000IU/LのAPAP投与およびルーセル因果関係評価方法（RUCAM）スコア> 6
   • 14歳以上の年齢。
   • 被験者またはガーディアンは、このプロジェクトに参加することに同意し、インフォームドコンセントフォームに署名します。

   除外基準：•肝臓損傷に対する副作用の頻度の頻度が、指示で「一般的または非常に一般的な」（≥1％）として定義される薬物の使用。

   • 肝臓の損傷を受けやすいハーブの同時使用（付録の定義のリストを参照）。
   • 肝臓損傷の明確な原因を知っています：活動性ウイルス性肝炎。アルコール性肝疾患;自己免疫肝疾患;原発性または二次肝臓腫瘍;および肝機能に影響を与えた他の基礎となる肝疾患。
   • 完全な一般情報と臨床情報を提供できない人。
   • このプロジェクトを見ることに同意しない被験者または保護者は、インフォームドコンセントフォームに署名していません。

2. コントロールグループ

   包含基準：

   • アセトアミノフェン（またはアセトアミノフェン含有薬）摂取の明確な歴史。
   • APAP摂取の履歴が不明な場合、アセトアミノフェン成分の血漿および/または尿検査。
   • 年齢：14歳以上。
   • 被験者またはガーディアンは、このプロジェクトに参加することに同意し、インフォームドコンセントフォームに署名します。

   除外基準：•肝臓損傷に対する副作用の頻度の頻度が、指示で「一般的または非常に一般的な」（≥1％）として定義される薬物の使用。

   •肝臓の損傷を受けやすいハーブの同時使用（付録の定義のリストを参照）。

   •肝臓損傷には既知の明確な原因があります（定義の添付リストを参照）：アクティブなウイルス性肝炎。アルコール性肝疾患;自己免疫肝疾患;原発性または二次肝臓腫瘍;および肝機能に影響を与えた他の基礎となる肝疾患。

   •完全な一般情報と臨床情報を提供できない人。

   •このプロジェクトを見ることに同意しない被験者または保護者は、インフォームドコンセントフォームに署名しない。

   （iii）マッチング戦略。

   一致する原則：

   •症例および対照参加者は、摂取された用量、解毒剤投与の期間、および胃洗浄の期間に応じて一致しました。

   •1：2マッチング。

   交絡要因：

   •用量摂取量：患者レポート（一次） +血液濃度検査（セカンダリ）

   •解毒剤の使用時間：<4時間、4〜24時間、> 24時間

   •胃洗浄時間：<1時間、1時間以上

   （iv）サンプルサイズの推定

   パラメーターソース：

   • 薬物代謝酵素、免疫原性遺伝子座に焦点を当てます
   • 文献の調査結果に基づいたアジアの個体群におけるAPAP依存性双子感受性対立遺伝子頻度の分布。

2。パラメーター値：

• 仮説：遺伝子環境。
• 結果モデル：ベースラインリスクP0 = 0.10。
• 遺伝的効果= 1.2、
• 電源= 0.8、タイプIエラー率= 0.05 （両面）。

結果：ケースサンプルサイズは113で、コントロールサンプルサイズは226である必要があります。

ii。暴露/危険因子。

（i）定義。 曝露因子は、APAPによって引き起こされるDILIの感受性遺伝子を指します。

• 2,036,060マーカーサイト
• ヒト白血球抗原（HLA）：HLA-AおよびHLA-B免疫遺伝子座。
• 遺伝子型のインプット。

（ii）測定方法。

1. 候補遺伝子戦略を採用します。 候補遺伝子戦略は、低コスト、比較的単純な品質制御と統計分析を伴う柔軟なアプローチであり、選択された遺伝子がすべて疾患にとって重要であるため、関連性の背後にある比較的簡単な生物学的説明です。
2. 仮説駆動型アプローチを使用します。 いくつかの特定の遺伝子が研究の結果に関連している可能性があるという仮説を考慮して、潜在的に機能的な単一ヌクレオチド多型（SNP）の分析のために配列ベースのアプローチが選択され、薬物代謝酵素、免疫原性局所、薬物輸送の存在を想定している薬物輸送の存在をコードする薬物輸送に関連する薬物代謝型の存在に関連する機能的価値が高いSNPを選択しました。
3. カスタムチップを使用します。 さまざまな集団の複雑な疾患を理解するための能力が強化されたコンソーシアムによって構築されたマイクロアレイである拡張された多民族ジェノタイピングアレイ（Megaex）。 この市販のマイクロアレイは、2,036,060マーカー遺伝子座の検出を通じて個々の薬物反応を決定します。 また、HLA-AおよびHLA-B免疫遺伝子座情報を補完して、遺伝子型想像を完了します。

iii。品質管理研究には厳しい標準テスト操作手順があり、実験の開始前にテストに関与する人員に対して関連するトレーニングが行われ、テストはトレーニングに合格した後にのみ実施できます。 科目の進捗状況とデータ品質管理を担当する専用の人員を持つ品質管理センターがあります。 オンラインデジタルランダム化プラットフォームと情報入力管理システムは、タイムリーなケースランダム化グループ化および電子臨床症例観察フォーム情報入力が可能なWebサーバー端末に基づいてセットアップされており、情報入力プロセス中にエラーを効果的かつ自動的に確認および修正できます。 つまり、入力された情報の正確性と信頼性を確保するのに役立ち、監督者にリアルタイムのデータ監視を提供できます。 さらに、この研究では、実験とデータ入力の実施を監視します。

IV。データ管理計画

• データセンター：National Data Management Standardによって設立されたデータ管理センターは、データ管理作業を実施しています。
• データ管理システム：RedCapは、オンラインデータ収集と管理のための電子ケースレポートフォームを確立するために使用されます。
• データ収集：独立したデータ登録者によるデータ入力研究リードユニットの研究に関与していない。
• データの一貫性監視：独立したサードパーティモニターによるデータの一貫性監視。
• データ監査とロック：データは、専用のデータマネージャーによって監査、クリーニング、ロックされています。

V.統計分析計画

（i）仮説検査。 H0：APAPの摂取後の肝臓損傷の有無にかかわらず被験者間の遺伝子に差はありませんH1：肝臓損傷の有無にかかわらず被験者間の有意な遺伝的差異

（ii）分析戦略。

• 連続変数は、平均±標準偏差（SD）または四分位範囲（IQR）の中央値として説明され、グループ間の違いは2要素ANOVAまたはノンパラメトリックテストによって分析されました。 カテゴリ変数は、数とパーセンテージとして表され、ロジスティック回帰モデルによって分析されました。
• 対照群間のHardy-Weinberg平衡（HWE）は、適合度χ2検定を使用してテストされました。 ハプロタイプ分析ビューを使用して、ハプロビュー）4.2ソフトウェア、ハプロタイプ領域グループが選択され、単一ヌクレオチド多型（TAGSNP）のタグ間の結合の不均衡を考慮して選択されました。
• 多変量条件付きロジスティック回帰分析を実施して、胃洗浄および解毒剤を共変量として使用した、ドミナンス比（OR）および95％信頼区間（CI）によるAPAPからの遺伝子型とDILIのリスクとの関連を推定しました。
• TagSNPの役割を合成するために、3つの異なる遺伝モデルが使用されました。 Hardy-Weinberg Analysis（SHESIS）オンラインプログラムのソフトウェアパッケージは、ロジスティック回帰モデルの下でハプロタイプ分析に使用されました。
• すべての分析は、統計を使用して実行されました。これは、Windows（バージョン26.0 USA）の強力な統計ソフトウェアプラットフォーム（SPSS）です。 両側P値<0.05は統計的に有意であると見なされました。