Dépistage des gènes de sensibilité aux lésions hépatiques induites par le médicament induit par l'APAP dans la population chinoise: une étude cas-témoins (PAIN)

I. Objet d'étude

(i) Dans la stratégie de groupe: continue en groupe.

(ii) Stratégie de regroupement:

1. Groupe de cas.

   Critères d'inclusion:

   • Une histoire claire d'ingestion d'acétaminophène (ou de médicaments contenant de l'acétaminophène).
   • Test de plasma et / ou d'urine pour les composants d'acétaminophène si les antécédents d'ingestion ne sont pas clairs.
   • Surveillance de l'alanine aminotransférase (ALT) ou de l'aspartate aminotransférase (AST) ≥ 1000 UI / L à tout moment après l'administration APAP et le score de la méthode d'évaluation de la causalité Roussel (RUCAM)> 6
   • Âge ≥ 14 ans.
   • Le sujet ou Guardian accepte de participer à ce projet et signe un formulaire de consentement éclairé.

   Critères d'exclusion: • L'utilisation de médicaments pour lesquelles la fréquence des effets indésirables aux dommages hépatiques est définie comme «commune ou très courante» (≥ 1%) dans les instructions.

   • Utilisation concomitante des herbes qui sont clairement sensibles aux dommages hépatiques (voir la liste des définitions dans l'annexe).
   • Ont une cause définie connue de lésions hépatiques: l'hépatite virale active; maladie du foie alcoolique; maladie hépatique auto-immune; tumeurs hépatiques primaires ou secondaires; et d'autres maladies hépatiques sous-jacentes qui ont affecté la fonction hépatique.
   • Ceux qui ne fournissent pas d'informations générales complètes et d'informations cliniques.
   • Les sujets ou les tuteurs qui n'acceptent pas de voir ce projet ne signent pas le formulaire de consentement éclairé.

2. Groupe témoin

   Critères d'inclusion:

   • Une histoire claire d'ingestion d'acétaminophène (ou de médicaments contenant de l'acétaminophène).
   • Test de plasma et / ou d'urine pour les composants d'acétaminophène si les antécédents d'ingestion APAP ne sont pas clairs.
   • Âge: ≥ 14 ans.
   • Le sujet ou Guardian accepte de participer à ce projet et signe un formulaire de consentement éclairé.

   Critères d'exclusion: • L'utilisation de médicaments pour lesquelles la fréquence des effets indésirables aux dommages hépatiques est définie comme «commune ou très courante» (≥ 1%) dans les instructions.

   • Utilisation simultanée des herbes qui sont clairement sensibles aux dommages hépatiques (voir la liste des définitions dans l'annexe).

   • Il existe des causes définitivement connues de lésions hépatiques (voir la liste attachée des définitions): hépatite virale active; maladie du foie alcoolique; maladie hépatique auto-immune; tumeurs hépatiques primaires ou secondaires; et d'autres maladies hépatiques sous-jacentes qui ont affecté la fonction hépatique.

   • Ceux qui ne fournissent pas d'informations générales complètes et d'informations cliniques.

   • Les sujets ou les tuteurs qui n'acceptent pas de voir ce projet ne signent pas le formulaire de consentement éclairé.

   (iii) Stratégie d'appariement.

   Principe de correspondance:

   • Les participants au cas et au contrôle ont été appariés en fonction de la dose ingérée, de la durée de l'administration d'antidote et de la durée du lavage gastrique.

   • 1: 2 correspondant.

   Facteurs de confusion:

   • Apport dose: rapport du patient (primaire) + test de concentration sanguine (secondaire)

   • Temps d'utilisation de l'antidote: <4 heures, 4-24 heures,> 24 heures

   • Temps de lavage gastrique: <1 heure, ≥ 1 heure

   (iv) Estimation de la taille de l'échantillon

   Source des paramètres ：

   • Concentrez-vous sur les enzymes de métabolisation des médicaments, les loci immunogènes
   • La distribution des fréquences des allèles de sensibilité à DILI dépendantes de l'APAP dans les populations asiatiques basées sur les résultats de la littérature.

2. Valeur des paramètres ：

• Hypothèse: gène-environnement.
• Modèle de résultat: risque de base P0 = 0,10.
• Effet génétique = 1,2,
• Puissance = 0,8, taux d'erreur de type I = 0,05 (bilatéral).

Résultats: La taille de l'échantillon de boîtier doit être de 113 avec une taille d'échantillon de contrôle de 226.

Ii Facteurs d'exposition / risque.

(i) Définition. Les facteurs d'exposition se réfèrent aux gènes de sensibilité à DILI causés par l'APAP, notamment:

• 2 036 060 sites marqueurs
• Antigène des leucocytes humains (HLA): loci immunitaires HLA-A et HLA-B.
• Imputation du génotype.

(ii) Méthodes de mesure.

1. Adopter la stratégie des gènes candidats. La stratégie du gène candidate est une approche flexible avec un faible coût, un contrôle de la qualité relativement simple et une analyse statistique, et une explication biologique relativement facile derrière l'association car les gènes sélectionnés sont tous importants pour la maladie.
2. En utilisant l'approche axée sur l'hypothèse. Compte tenu de l'hypothèse selon laquelle certains gènes spécifiques peuvent être associés au résultat de l'étude, une approche basée sur des séquences a été choisie pour l'analyse du polymorphisme monoclélodidique potentiellement fonctionnel (SNP), en sélectionnant les SNP qui sont plus susceptibles d'être de valeur fonctionnelle associée à des enzymes de métabolisation médicamenteuse, à des localis immunogéniques, en particulier les gènes de transport médicamenteux, les récepteurs médicamenteux et les récepteurs des médicaments et les récepteurs de la codage médicamenteux.
3. Utilisation de puces personnalisées. Le tableau de génotypage multiethnique élargi (Megaex), un microréseau construit par des consortiums avec des capacités améliorées pour comprendre les maladies complexes dans une variété de populations. Ce microréseau disponible dans le commerce détermine la réponse des médicaments individuels par la détection de 2 036 060 loci marqueurs. Il complète également les informations sur les loci immunitaires HLA-A et HLA-B pour terminer l'importation du génotype.

Iii. Contrôle de la qualité L'étude a une procédure de fonctionnement standard strict, et une formation pertinente est menée pour le personnel impliqué dans le test avant le début de l'expérience, et le test ne peut être effectué qu'après avoir réussi la formation. Nous avons un centre de contrôle de la qualité avec du personnel dédié responsable des progrès du sujet et du contrôle de la qualité des données. Une plate-forme de randomisation numérique en ligne et un système de gestion de la saisie d'informations sont configurées en fonction du terminal du serveur Web, qui est capable de regrouper en temps opportun de randomisation de cas et de saisie électronique des informations sur le formulaire d'observation clinique, et peut vérifier efficacement et automatiquement et correctement les erreurs pendant le processus de saisie des informations. Autrement dit, il contribue à garantir la précision et la fiabilité des informations saisies et peut fournir une surveillance des données en temps réel pour les superviseurs. De plus, cette étude surveillera la conduite des expériences et de la saisie des données.

Iv. Plan de gestion des données

• Centre de données: Le centre de gestion des données créé par la norme nationale de gestion des données entreprend des travaux de gestion des données.
• Système de gestion des données: RedCap est utilisé pour établir des formulaires de rapport de cas électronique pour la collecte et la gestion des données en ligne.
• Collecte de données: la saisie des données par des inscrits indépendants des données non impliqués dans l'étude dans l'unité principale de l'étude.
• Surveillance de la cohérence des données: surveillance de la cohérence des données par un moniteur tiers indépendant.
• Audit et verrouillage des données: les données sont vérifiées, nettoyées et verrouillées par un gestionnaire de données dédié.

V. Plan d'analyse statistique

(i) Test d'hypothèse. H0: Aucune différence dans les gènes entre les sujets avec et sans lésions hépatiques après ingestion d'APAP H1: Différences génétiques significatives entre les sujets avec et sans lésions hépatiques après ingestion d'APAP

(ii) Stratégies analytiques.

• Les variables continues ont été décrites comme une moyenne ± écart-type (SD) ou médiane de la gamme interquartile (IQR), et les différences entre les groupes ont été analysées par ANOVA à deux facteurs ou tests non paramétriques. Les variables catégorielles ont été exprimées en nombres et en pourcentage et analysées par des modèles de régression logistique.
• L'équilibre de Hardy-Weinberg (HWE) entre les groupes témoins a été testé à l'aide du test de bonté d'ajustement χ2. En utilisant la vue d'analyse d'haplotype （Haploview） 4.2 Logiciel, le groupe de région haplotype a été sélectionné en considérant le déséquilibre de liaison entre les étiquettes des polymorphismes mononucléotidiques (TagsNP).
• Une analyse de régression logistique conditionnelle multivariée a été réalisée pour estimer l'association entre le génotype et le risque de DILI à partir des rapports APAP par dominance (OR) et des intervalles de confiance à 95% (CIS) avec un lavage gastrique et une utilisation d'antidote comme covariables.
• Trois modèles génétiques différents ont été utilisés pour synthétiser le rôle des TAGSNP. Le programme logiciel pour le programme en ligne Hardy-Weinberg Analysis (Shesis) a été utilisé pour l'analyse des haplotypes sous un modèle de régression logistique.
• Toutes les analyses ont été effectuées à l'aide de statistiques est une puissante plate-forme logicielle statistique (SPSS) pour Windows (version 26.0 USA). Les valeurs de P bilatérales <0,05 ont été considérées comme statistiquement significatives.