Скрининг генов восприимчивости на APAP индуцировал лекарство, вызванное повреждением печени в китайской популяции: исследование случай-контроль (PAIN)

I. Объект изучения

(i) в групповую стратегию: непрерывно в группу.

(ii) Стратегия группировки:

1. Делуя группа.

   Критерии включения:

   • Четкая история ацетаминофена (или ацетаминофенсодержащих препаратов).
   • Плазма и/или тестирование мочи на компоненты ацетаминофена, если история проглатывания неясна.
   • Мониторинг аланин -аминотрансфераза (ALT) или аспартат -аминотрансфераза (AST) ≥ 1000 МЕ/л в любое время после введения APAP и метода оценки причинности Русселя (RUCAM)> 6 Оценка> 6
   • Возраст ≥ 14 лет.
   • Субъект или опекун соглашается участвовать в этом проекте и подписывает форму информированного согласия.

   Критерии исключения: • Использование лекарств, для которых частота побочных реакций на повреждение печени определяется как «распространенная или очень распространенная» (≥1%) в инструкциях.

   • Одновременное использование трав, которые явно подвержены повреждению печени (см. Список определений в Приложении).
   • Иметь известную определенную причину повреждения печени: активный вирусный гепатит; алкогольная болезнь печени; Аутоиммунная болезнь печени; первичные или вторичные опухоли печени; и другие основные заболевания печени, которая повлияла на функцию печени.
   • Те, кто не предоставит полной общей информации и клинической информации.
   • Субъекты или опекуны, которые не согласны видеть этот проект, не подписывают форму информированного согласия.

2. Контрольная группа

   Критерии включения:

   • Четкая история ацетаминофена (или ацетаминофенсодержащих препаратов).
   • Плазма и/или тестирование мочи на компоненты ацетаминофена, если неясно.
   • Возраст: ≥ 14 лет.
   • Субъект или опекун соглашается участвовать в этом проекте и подписывает форму информированного согласия.

   Критерии исключения: • Использование лекарств, для которых частота побочных реакций на повреждение печени определяется как «распространенная или очень распространенная» (≥1%) в инструкциях.

   • Одновременное использование трав, которые явно восприимчивы к повреждению печени (см. Список определений в Приложении).

   • Существуют известные определенные причины повреждения печени (см. Прикрепленный список определений): активный вирусный гепатит; алкогольная болезнь печени; Аутоиммунная болезнь печени; первичные или вторичные опухоли печени; и другие основные заболевания печени, которая повлияла на функцию печени.

   • Те, кто не предоставляет полной общей информации и клинической информации.

   • Субъекты или опекуны, которые не согласны видеть этот проект, не подписывают форму информированного согласия.

   (iii) Стратегия сопоставления.

   Принцип сопоставления:

   • Участники дела и контроля были сопоставлены в соответствии с проглатываемой дозой, продолжительностью введения противоядия и продолжительностью желудочного лаважа.

   • 1: 2 Сопоставление.

   Смешающие факторы:

   • Потребление дозы: отчет пациента (первичный) + тест концентрации в крови (вторичный)

   • Время использования антидота: <4 часа, 4-24 часа,> 24 часа

   • Время лаважа желудка: <1 час, ≥1 час

   (iv) оценка размера выборки

   Источник параметров ：

   • Сосредоточиться на метаболизирующих ферментах, иммуногенных локусах, иммуногенных локусах
   • Распределение зависимых от APAP частот аллелей чувствительности DiLI в азиатских популяциях на основе литературных результатов.

2. Значение параметра:

• Гипотеза: среда гена.
• Модель результата: базовый риск P0 = 0,10.
• Генетический эффект = 1,2,
• Мощность = 0,8, частота ошибок типа I = 0,05 (двусторонний).

Результаты: размер выборки должен быть 113 с размером контрольной выборки 226.

II Факторы воздействия/риска.

(i) определение. Коэффициенты воздействия относятся к генам восприимчивости для DILI, вызванных APAP, в том числе ：

• 2 036 060 маркерных сайтов
• Антиген лейкоцитов человека (HLA): иммунные локусы HLA-A и HLA-B.
• Генотип-импутация.

(ii) Методы измерения.

1. Принять стратегию гена -кандидата. Стратегия гена -кандидата является гибким подходом с низким затратом, относительно простым контролем качества и статистическим анализом, а также относительно легким биологическим объяснением ассоциации, поскольку выбранные гены важны для этой болезни.
2. Используя подход, основанный на гипотезе. Принимая во внимание гипотезу о том, что некоторые специфические гены могут быть связаны с исходом исследования, был выбран основополагающий подход для анализа потенциально функционального однонуклеотидного полиморфизма (SNP), выбоя SNP, которые с большей вероятностью имеют функциональную ценность, связанную с метаболизирующими лекарственными средствами, особенно в кафических геновых, особенно в кандидатах.
3. Используя пользовательские чипы. Расширенный многоэтнический массив генотипирования (MEGAEX), микрочип, построенный консорциумом с расширенными возможностями для понимания сложных заболеваний в различных популяциях. Этот коммерчески доступный микрочип определяет индивидуальную реакцию лекарственного средства посредством обнаружения 2 036 060 маркеров. Это также дополняет информацию HLA-A и HLA-B-иммунные локусы для завершения генотип-импутации.

Iii. Контроль качества. Исследование имеет строгую стандартную процедуру эксплуатации, и соответствующая обучение проводится для персонала, участвующего в тесте до начала эксперимента, и тест может проводиться только после прохождения обучения. У нас есть центр контроля качества с выделенным персоналом, ответственным за предмет прогресса и контроля качества данных. Онлайновая платформа для цифровой рандомизации и система управления вводом информации создается на основе терминала веб -сервера, которая способна к своевременной группировке рандомизации и электронного клинического наблюдения за информацией, а также может эффективно и автоматически проверять и исправлять ошибки во время процесса ввода информации. То есть это помогает обеспечить точность и надежность введенной информации и может обеспечить мониторинг данных в реальном времени для руководителей. Кроме того, это исследование будет отслеживать проведение экспериментов и ввода данных.

IV План управления данными

• Центр обработки данных: Центр управления данными, созданный Национальным стандартом управления данными, проводит работу по управлению данными.
• Система управления данными: REDCAP используется для создания форм электронного отчета о случаях для сбора и управления онлайн -данных.
• Сбор данных: ввод данных независимыми жителями данных, не участвующими в исследовании в основном ведущем подразделении.
• Мониторинг согласованности данных: мониторинг согласованности данных независимым сторонним монитором.
• Аудит и блокировку данных: данные проверяются, очищаются и заблокированы специальным диспетчера данных.

V. План статистического анализа

(i) Тестирование гипотезы. H0: нет различий в генах между субъектами с повреждением печени и без него после проглатывания APAP H1: значительные генетические различия между субъектами с повреждением печени и без него после проглатывания APAP

(ii) Аналитические стратегии.

• Непрерывные переменные были описаны как среднее ± стандартное отклонение (SD) или медиана межквартильного диапазона (IQR), и различия между группами были проанализированы с помощью двухфакторных ANOVA или непараметрических тестов. Категориальные переменные были выражены в виде чисел и процентов и проанализированы с помощью моделей логистической регрессии.
• Равновесие Харди-Вайнберг (HWE) между контрольными группами было протестировано с использованием теста χ2 добра. Используя представление анализа гаплотипов (Happloview) 4.2 Программное обеспечение, была выбрана группа гаплотипов области с учетом неравновесного сцепления между тегами отдельных нуклеотидных полиморфизмов (TAGSNP).
• Многофакторный условный логистический регрессионный анализ был проведен для оценки связи между генотипом и риском дили из APAP по коэффициентам доминирования (ORS) и 95% доверительными интервалами (CIS) с желудочным лаважем и употреблением антидота в качестве ковариат.
• Три разных генетических моделях были использованы для синтеза роли TAGSNP. Программный пакет для онлайн-программы Hardy-Weinberg (SHESE) использовался для анализа гаплотипа в рамках модели логистической регрессии.
• Все анализы были выполнены с использованием статистики представляют собой мощную статистическую программную платформу (SPSS) для Windows (версия 26.0 США). Двусторонние значения P <0,05 считались статистически значимыми.