Screening av følsomhetsgener for APAP indusert medikamentindusert leverskade i kinesisk populasjon: en casekontrollstudie (PAIN)

I. Studieobjekt

(i) Inn i gruppestrategien: kontinuerlig inn i gruppe.

(ii) Gruppestrategi ：

1. Saksgruppe.

   Inkluderingskriterier ：

   • En klar historie med acetaminophen (eller inntak av acetaminophenholdige).
   • Plasma og/eller urintesting for acetaminophenkomponenter hvis inntakshistorien er uklar.
   • Overvåking av alaninaminotransferase (ALT) eller aspartataminotransferase (AST) ≥ 1000 IE/L når som helst etter APAP -administrering og Roussel Causality Assessment Method (RUCAM) score> 6
   • Alder ≥ 14 år gammel.
   • Emnet eller Guardian samtykker i å delta i dette prosjektet og signerer et informert samtykkeskjema.

   Eksklusjonskriterier ： • Bruk av medisiner som frekvensen av bivirkninger på leverskader er definert som "vanlig eller veldig vanlig" (≥1%) i instruksjonene.

   • Samtidig bruk av urter som er tydelig utsatt for leverskade (se liste over definisjoner i vedlegget).
   • Har en kjent bestemt årsak til leverskade: aktiv viral hepatitt; alkoholisk leversykdom; autoimmun leversykdom; primære eller sekundære leversvulster; og annen underliggende leversykdom som har påvirket leverfunksjonen.
   • De som ikke klarer å gi fullstendig generell informasjon og klinisk informasjon.
   • Emner eller foresatte som ikke er enige om å se dette prosjektet, signerer ikke det informerte samtykkeskjemaet.

2. Kontrollgruppe

   Inkluderingskriterier ：

   • En klar historie med acetaminophen (eller inntak av acetaminophenholdige).
   • Plasma og/eller urintesting for acetaminophenkomponenter hvis inntak av apap -inntak er uklar.
   • Alder: ≥ 14 år gammel.
   • Emnet eller Guardian samtykker i å delta i dette prosjektet og signerer et informert samtykkeskjema.

   Eksklusjonskriterier ： • Bruk av medisiner som frekvensen av bivirkninger på leverskader er definert som "vanlig eller veldig vanlig" (≥1%) i instruksjonene.

   • Samtidig bruk av urter som er tydelig utsatt for leverskade (se liste over definisjoner i vedlegget).

   • Det er kjente bestemte årsaker til leverskade (se vedlagt liste over definisjoner): aktiv viral hepatitt; alkoholisk leversykdom; autoimmun leversykdom; primære eller sekundære leversvulster; og annen underliggende leversykdom som har påvirket leverfunksjonen.

   • De som ikke klarer å gi fullstendig generell informasjon og klinisk informasjon.

   • Emner eller foresatte som ikke er enige om å se dette prosjektet, signerer ikke det informerte samtykkeskjemaet.

   (iii) Matchende strategi.

   Matchende prinsipp ：

   • Deltakerne i sak og kontroll ble matchet i henhold til inntatt dose, varigheten av motgiftsadministrasjon og varighet av gastrisk skylling.

   • 1: 2 Matching.

   Forvirrende faktorer ：

   • Doseinntak: Pasientrapport (primær) + blodkonsentrasjonstest (sekundær)

   • Motgift Bruk tid: <4 timer, 4-24 timer,> 24 timer

   • Gastrisk skyllingstid: <1 time, ≥1 time

   (iv) Estimering av prøvestørrelse

   Parameterkilde ：

   • Fokus på medikamentmetaboliserende enzymer, immunogene loki
   • Fordelingen av APAP-avhengige dili-mottakelighetsallelfrekvenser i asiatiske populasjoner basert på litteraturfunn.

2. Parameterverdi ：

• Hypotese: Gen-miljø.
• Resultatmodell: Baseline Risk P0 = 0,10.
• Genetisk effekt = 1.2,
• Strøm = 0,8, type I feilhastighet = 0,05 (tosidig).

Resultater ： Saksprøvestørrelsen skal være 113 med en kontrollprøvestørrelse på 226.

Ii. Eksponering/risikofaktorer.

(i) Definisjon. Eksponeringsfaktorer refererer til følsomhetsgener for DILI forårsaket av APAP, inkludert ：

• 2.036.060 markørnettsteder
• Human leukocyttantigen (HLA): HLA-A og HLA-B immunloki.
• Genotypeimputasjon.

(ii) Målemetoder.

1. Vedta kandidatgenstrategi. Kandidatgenstrategien er en fleksibel tilnærming med lave kostnader, relativt enkel kvalitetskontroll og statistisk analyse, og en relativt enkel biologisk forklaring bak assosiasjonen fordi genene som er valgt er alle viktige for sykdommen.
2. Ved å bruke den hypotesedrevne tilnærmingen. Tatt i betraktning hypotesen om at noen spesifikke gener kan være assosiert med studieutfallet, ble en sekvensbasert tilnærming valgt for analyse av potensielt funksjonell enkelt nukleotidpolymorfisme (SNP), valg av SNP som er mer sannsynlig å være av funksjonelle verdi som er assosiert med medikament-metabiserende enzym, immunogene som er medikamentell transportproteiner.
3. Bruke tilpassede brikker. Den utvidede multietniske genotyping-arrayen (MEGAEX), en mikroarray bygget av konsortier med forbedrede evner for å forstå komplekse sykdommer i en rekke populasjoner. Denne kommersielt tilgjengelige mikroarrayen bestemmer individuell medikamentrespons gjennom påvisning av 2.036.060 markørloki. Det kompletterer også HLA-A- og HLA-B immunloki-informasjon for å fullføre genotypeimputasjon.

Iii. Kvalitetskontroll Studien har en streng standard testoperasjonsprosedyre, og relevant opplæring utføres for personellet som er involvert i testen før eksperimentet starter, og testen kan bare utføres etter å ha bestått opplæringen. Vi har et kvalitetskontrollsenter med dedikert personell som er ansvarlig for fremgang og datakvalitetskontroll. En online digital randomiseringsplattform og informasjonsinngangsstyringssystem er satt opp basert på webserverterminalen, som er i stand til rettidig case randomiseringsgruppering og elektronisk klinisk case observasjonsskjema informasjonsinnføring, og kan effektivt og automatisk sjekke og rette opp feil under informasjonsinngangsprosessen. Det vil si at det hjelper til med å sikre nøyaktigheten og påliteligheten til den angitte informasjonen, og kan gi sanntids dataovervåking for veilederne. I tillegg vil denne studien overvåke gjennomføringen av eksperimenter og datainnføring.

IV. Datadministrasjonsplan

• Datasenter: Datadministrasjonssenteret som er opprettet av National Data Management Standard, foretar datahåndteringsarbeid.
• Datahåndteringssystem: REDCAP brukes til å etablere elektroniske saksrapportskjemaer for online datainnsamling og styring.
• Datainnsamling: Dataregistrering av uavhengige dataregistranter som ikke er involvert i studien i studieledningsenheten.
• Overvåking av datakonsekvens: Overvåking av datakonsekvens av en uavhengig tredjepartsmonitor.
• Datarevisjon og låsing: Data blir revidert, rengjort og låst av en dedikert datasjef.

V. Statistisk analyseplan

(i) Hypotesetesting. H0: Ingen forskjell i gener mellom personer med og uten leverskade etter inntak av APAP H1: signifikante genetiske forskjeller mellom personer med og uten leverskade etter inntak av APAP

(ii) Analytiske strategier.

• Kontinuerlige variabler ble beskrevet som gjennomsnitt ± standardavvik (SD) eller median av interkvartilt område (IQR), og forskjeller mellom gruppene ble analysert ved to-faktor ANOVA eller ikke-parametriske tester. Kategoriske variabler ble uttrykt som antall og prosenter og analysert ved logistiske regresjonsmodeller.
• Hardy-Weinberg likevekt (HWE) mellom kontrollgrupper ble testet ved bruk av godhet-av-fit χ2-testen. Ved å bruke haplotypeanalysevisning （Haploview） 4.2 -programvaren, ble haplotype -regiongruppen valgt med tanke på koblings -ulikhet mellom tagger av enkeltnukleotidpolymorfismer (TAGSNPs).
• Multivariat betinget logistisk regresjonsanalyse ble utført for å estimere sammenhengen mellom genotype og risiko for DILI fra APAP etter dominansforhold (OR) og 95% konfidensintervaller (CIS) med gastrisk skylling og antidotbruk som kovariater.
• Tre forskjellige genetiske modeller ble brukt til å syntetisere rollen som TAGSNPs. Programvarepakke for Hardy-Weinberg-analyse (SHESIS) Online-program ble brukt til haplotypeanalyse under logistisk regresjonsmodell.
• Alle analyser ble utført ved bruk av statistikk er en kraftig statistisk programvareplattform (SPSS) for Windows (versjon 26.0 USA). To-tailed p-verdier <0,05 ble ansett som statistisk signifikante.