Screening av känslighetsgener för APAP-inducerad läkemedelsinducerad leverskada i kinesisk befolkning: En fallkontrollstudie (PAIN)

I. Studieobjekt

(i) in i gruppstrategin: kontinuerlig till grupp.

(ii) Gruppstrategi ：

1. Fallgrupp.

   Inkluderingskriterier ：

   • En tydlig historia av intag av acetaminophen (eller acetaminopheninnehållande läkemedel).
   • Plasma- och/eller urintestning för acetaminophenkomponenter om förtäringshistoria är oklar.
   • Övervakning av alaninaminotransferas (ALT) eller aspartataminotransferas (AST) ≥ 1000 IE/L när som helst efter APAP -administration och Roussel Causality Assessment Method (RUCAM) SCORE> 6
   • Ålder ≥ 14 år gammal.
   • Ämnet eller vårdnadshavaren samtycker till att delta i detta projekt och undertecknar ett informerat samtyckesformulär.

   Uteslutningskriterier ： • Användning av läkemedel för vilka frekvensen av biverkningar på leverskador definieras som "vanligt eller mycket vanligt" (≥1%) i instruktionerna.

   • Samtidig användning av örter som är tydligt mottagliga för leverskador (se lista över definitioner i bilagan).
   • Har en känd bestämd orsak till leverskada: aktiv viral hepatit; alkoholhaltig leversjukdom; autoimmun leversjukdom; primära eller sekundära levertumörer; och andra underliggande leversjukdomar som har påverkat leverfunktionen.
   • De som inte tillhandahåller fullständig allmän information och klinisk information.
   • Ämnen eller vårdnadshavare som inte samtycker till att se detta projekt undertecknar inte det informerade samtyckesformuläret.

2. Kontrollgrupp

   Inkluderingskriterier ：

   • En tydlig historia av intag av acetaminophen (eller acetaminopheninnehållande läkemedel).
   • Plasma- och/eller urintestning för acetaminophenkomponenter om historia av APAP -intag är oklar.
   • Ålder: ≥ 14 år gammal.
   • Ämnet eller vårdnadshavaren samtycker till att delta i detta projekt och undertecknar ett informerat samtyckesformulär.

   Uteslutningskriterier ： • Användning av läkemedel för vilka frekvensen av biverkningar på leverskador definieras som "vanligt eller mycket vanligt" (≥1%) i instruktionerna.

   • Samtidig användning av örter som är tydligt mottagliga för leverskador (se lista över definitioner i bilagan).

   • Det finns kända bestämda orsaker till leverskador (se bifogad lista över definitioner): aktiv viral hepatit; alkoholhaltig leversjukdom; autoimmun leversjukdom; primära eller sekundära levertumörer; och andra underliggande leversjukdomar som har påverkat leverfunktionen.

   • De som inte tillhandahåller fullständig allmän information och klinisk information.

   • Ämnen eller vårdnadshavare som inte samtycker till att se detta projekt undertecknar inte det informerade samtyckesformuläret.

   (iii) Matchande strategi.

   Matchande princip ：

   • Fall- och kontrolldeltagare matchades enligt intaget dos, antidotadministrationens varaktighet och gastrisk sköljning.

   • 1: 2 matchning.

   Förvirrande faktorer ：

   • Dosintag: Patientrapport (primär) + blodkoncentrationstest (sekundär)

   • Antidotanvändningstid: <4 timmar, 4-24 timmar,> 24 timmar

   • Gastrisk sköljningstid: <1 timme, ≥1 timme

   (iv) Uppskattning av provstorlek

   Parameterkälla ：

   • Fokusera på läkemedelsmetaboliserande enzymer, immunogena loci
   • Distributionen av APAP-beroende dili-känslighetsallelfrekvenser i asiatiska populationer baserade på litteraturresultat.

2. Parametervärde ：

• Hypotes: Gen-miljö.
• Utfallsmodell: Baslinjesrisk P0 = 0,10.
• Genetisk effekt = 1,2,
• Effekt = 0,8, typ I -felfrekvens = 0,05 (tvåsidig).

Resultat ： Fallprovstorleken bör vara 113 med en kontrollprovstorlek på 226.

Ii. Exponering/riskfaktorer.

(i) Definition. Exponeringsfaktorer hänvisar till känslighetsgener för DILI orsakade av APAP, inklusive ：

• 2,036,060 Markerplatser
• Mänskligt leukocytantigen (HLA): HLA-A och HLA-B immunloci.
• Genotyp-imputation.

(ii) Mätmetoder.

1. Anta kandidatgenstrategi. Kandidatgenstrategin är ett flexibelt tillvägagångssätt med låg kostnad, relativt enkel kvalitetskontroll och statistisk analys och en relativt enkel biologisk förklaring bakom föreningen eftersom de utvalda generna alla är viktiga för sjukdomen.
2. Med hjälp av den hypotesdrivna metoden. Med tanke på hypotesen att vissa specifika gener kan vara associerade med studieutfallet, valdes en sekvensbaserad metod för analys av potentiellt funktionella enstaka nukleotidpolymorfism (SNP), val av SNP: er som är mer benägna att vara funktionella värde associerade med läkemedelsmetaboliserande enzymer, immunogiska loci, läkemedelstransportproteiner, läkemedelsproteiner, läkemedelsreceptorer och andra kopplingar, särskilt de lokaliserade kodarna.
3. Använda anpassade chips. Den utvidgade multietniska genotypningsuppsättningen (megaex), en mikroarray byggd av konsortier med förbättrade förmågor för att förstå komplexa sjukdomar i olika populationer. Denna kommersiellt tillgängliga mikroarray bestämmer individuellt läkemedelsrespons genom detektering av 2 036 060 markörloci. Det kompletterar också HLA-A och HLA-B Immune Loci-information för att slutföra genotyp-imputation.

Iii. Kvalitetskontroll Studien har ett strikt standardtestoperationsförfarande, och relevant utbildning utförs för den personal som är involverade i testet före experimentets början, och testet kan endast genomföras efter att ha passerat utbildningen. Vi har ett kvalitetskontrollcenter med dedikerad personal som ansvarar för ämnesframsteg och datakvalitetskontroll. En online digital randomiseringsplattform och informationsinträdeshanteringssystem är inställt baserat på webbserverterminalen, som kan snabba randomiseringsgruppering och elektronisk klinisk observation av informationsformulär och kan effektivt och automatiskt kontrollera och korrigera fel under informationsprocessen. Det vill säga, det hjälper till att säkerställa noggrannheten och tillförlitligheten för den angivna informationen och kan tillhandahålla dataövervakning i realtid för handledarna. Dessutom kommer denna studie att övervaka genomförandet av experiment och datainmatning.

Iv. Datahanteringsplan

• Datacenter: Datahanteringscentret som inrättats av National Data Management Standard åtar sig datahanteringsarbete.
• Datahanteringssystem: REDCAP används för att etablera elektroniska fallrapportformulär för insamling och hantering av data.
• Datainsamling: Datainmatning av oberoende dataregistranter som inte är involverade i studien i studieledningsenheten.
• Övervakning av datakonsistens: Övervakning av datakonsistens av en oberoende tredjepartsmonitor.
• Datarevision och låsning: Data granskas, rengörs och låsts av en dedikerad datahanterare.

V. Statistisk analysplan

(i) Hypotesprovning. H0: Ingen skillnad i gener mellan försökspersoner med och utan leverskada efter intag av APAP H1: Betydande genetiska skillnader mellan försökspersoner med och utan leverskada efter intag av APAP

(ii) Analytiska strategier.

• Kontinuerliga variabler beskrevs som medelvärde ± standardavvikelse (SD) eller median av interkvartilt intervall (IQR), och skillnader mellan grupper analyserades med tvåfaktor ANOVA eller icke-parametriska test. Kategoriska variabler uttrycktes som antal och procentsatser och analyserades med logistiska regressionsmodeller.
• Hardy-Weinberg-jämvikt (HWE) mellan kontrollgrupper testades med användning av Goodness-of-Fit χ2-testet. Med hjälp av haplotypanalysvy （haploview） 4.2 Programvara valdes Haplotype -regionen gruppen med tanke på kopplingens ojämlikhet mellan taggar av enstaka nukleotidpolymorfismer (TAGSNP).
• Multivariat villkorad logistisk regressionsanalys utfördes för att uppskatta sambandet mellan genotyp och risk för DILI från APAP genom dominansförhållanden (OR) och 95% konfidensintervall (CI) med gastrisk sköljning och antidotanvändning som kovariater.
• Tre olika genetiska modeller användes för att syntetisera rollen för TAGSNPS. Programvarupaket för Hardy-Weinberg-analys (SHESIS) online-program användes för haplotypanalys under logistisk regressionsmodell.
• Alla analyser utfördes med hjälp av statistik är en kraftfull statistisk programvaruplattform (SPSS) för Windows (version 26.0 USA). Två-tailed p-värden <0,05 ansågs statistiskt signifikanta.