Screening af følsomhedsgener for APAP-induceret lægemiddelinduceret leverskade i den kinesiske befolkning: En case-control-undersøgelse (PAIN)

I. Studieobjekt

(i) Into Group Strategy: kontinuerlig ind i gruppe.

(ii) Grupperingsstrategi ：

1. Sagsgruppe.

   Inkluderingskriterier ：

   • En klar historie med acetaminophen (eller acetaminophen-holdige medikamenter) indtagelse.
   • Plasma- og/eller urinprøvning for acetaminophen -komponenter, hvis indtagelse af indtagelse er uklar.
   • Overvågning af alaninaminotransferase (ALT) eller aspartataminotransferase (AST) ≥ 1000 IE/L når
   • Alder ≥ 14 år gammel.
   • Emnet eller Guardian accepterer at deltage i dette projekt og underskriver en informeret samtykkeformular.

   Ekskluderingskriterier ： • Brug af medikamenter, for hvilken hyppigheden af ​​bivirkninger på leverskader defineres som "almindelig eller meget almindelig" (≥1%) i instruktionerne.

   • Samtidig brug af urter, der er tydeligt modtagelige for leverskader (se liste over definitioner i bilaget).
   • Har en kendt bestemt årsag til leverskade: aktiv viral hepatitis; alkoholisk leversygdom; Autoimmun leversygdom; primære eller sekundære levertumorer; og anden underliggende leversygdom, der har påvirket leverfunktionen.
   • De, der ikke giver komplette generelle oplysninger og kliniske oplysninger.
   • Emner eller værger, der ikke er enige om at se dette projekt, underskriver ikke formularen informeret samtykke.

2. Kontrolgruppe

   Inkluderingskriterier ：

   • En klar historie med acetaminophen (eller acetaminophen-holdige medikamenter) indtagelse.
   • Plasma- og/eller urinprøvning for acetaminophen -komponenter, hvis indtagelse af APAP -indtagelse er uklar.
   • Alder: ≥ 14 år gammel.
   • Emnet eller Guardian accepterer at deltage i dette projekt og underskriver en informeret samtykkeformular.

   Ekskluderingskriterier ： • Brug af medikamenter, for hvilken hyppigheden af ​​bivirkninger på leverskader defineres som "almindelig eller meget almindelig" (≥1%) i instruktionerne.

   • Samtidig brug af urter, der er tydeligt modtagelige for leverskader (se liste over definitioner i bilaget).

   • Der er kendte bestemte årsager til leverskade (se vedhæftet liste over definitioner): aktiv viral hepatitis; alkoholisk leversygdom; Autoimmun leversygdom; primære eller sekundære levertumorer; og anden underliggende leversygdom, der har påvirket leverfunktionen.

   • De, der ikke giver komplette generelle oplysninger og kliniske oplysninger.

   • Emner eller værger, der ikke er enige om at se dette projekt, underskriver ikke formularen Informeret samtykke.

   (iii) Matchende strategi.

   Matchende princip ：

   • Deltagere i sag- og kontrol blev matchet i henhold til indtaget dosis, varighed af modgiftadministration og varighed af gastrisk skylning.

   • 1: 2 Matching.

   Forvirrende faktorer ：

   • Dosisindtagelse: Patientrapport (primær) + blodkoncentrationstest (sekundær)

   • Modgift Brug tid: <4 timer, 4-24 timer,> 24 timer

   • Gastrisk skylningstid: <1 time, ≥1 time

   (iv) Estimering af prøvestørrelse

   Parameterkilde ：

   • Fokus på lægemiddelmetaboliserende enzymer, immunogene loci
   • Fordelingen af ​​APAP-afhængige Dili-følsomhedsallelfrekvenser i asiatiske populationer baseret på litteraturresultater.

2. parameterværdi ：

• Hypotese: Gen-miljø.
• Resultatmodel: Baseline -risiko P0 = 0,10.
• Genetisk effekt = 1,2,
• Strøm = 0,8, type I -fejlhastighed = 0,05 (tosidet).

Resultater ： Sagens prøvestørrelse skal være 113 med en kontrolprøvestørrelse på 226.

Ii. Eksponering/risikofaktorer.

(i) Definition. Eksponeringsfaktorer henviser til følsomhedsgener for DILI forårsaget af APAP, herunder ：

• 2.036.060 markørsteder
• Human leukocytantigen (HLA): HLA-A og HLA-B immunloki.
• Genotype-imputation.

(ii) Målemetoder.

1. Vedtage kandidatgenstrategi. Kandidatgenstrategien er en fleksibel tilgang med lave omkostninger, relativt enkel kvalitetskontrol og statistisk analyse og en relativt let biologisk forklaring bag foreningen, fordi de valgte gener alle er vigtige for sygdommen.
2. Ved hjælp af den hypotese-drevne tilgang. I betragtning af hypotesen om, at nogle specifikke gener kan være forbundet med undersøgelsesresultatet, blev der valgt en sekvensbaseret tilgang til analyse af potentielt funktionel enkelt nukleotidpolymorfisme (SNP'er), valg af SNP'er, der er mere tilbøjelige til at være af funktionelle værdier forbundet med lægemiddelmetaboliserende enzymer, immunogene loci, lægemiddeltransportproteiner, medikament-aktionsmæssige modtagelser og andre forbindelser, især de placerede i kandidaterne.
3. Brug af brugerdefinerede chips. Den udvidede multietniske genotypearray (MegaEx), en mikroarray bygget af konsortier med forbedrede kapaciteter for at forstå komplekse sygdomme i en række populationer. Denne kommercielt tilgængelige mikroarray bestemmer individuel lægemiddelrespons gennem påvisning af 2.036.060 markør loci. Det supplerer også HLA-A og HLA-B immun loci-information til komplet genotypeimputation.

III. Kvalitetskontrol Undersøgelsen har en streng standard testdriftsprocedure, og relevant træning udføres for det personale, der er involveret i testen inden eksperimentets start, og testen kan kun udføres efter at have bestået træningen. Vi har et kvalitetskontrolcenter med dedikeret personale, der er ansvarlig for emnet fremskridt og datakvalitetskontrol. En online digital randomiseringsplatform og informationsindgangsstyringssystem er oprettet baseret på webserverterminalen, som er i stand til rettidigt case randomiseringsgruppering og elektronisk klinisk sagobservationsformularinformation og kan effektivt og automatisk kontrollere og korrigere fejl under informationsindgangsprocessen. Det vil sige, det hjælper med at sikre nøjagtigheden og pålideligheden af ​​de indtastede oplysninger og kan give realtidsdataovervågning for tilsynsførerne. Derudover vil denne undersøgelse overvåge udførelsen af ​​eksperimenter og dataregistrering.

Iv. Datastyringsplan

• Datacenter: Datastyringscenteret, der er oprettet af National Data Management Standard, påtager sig datastyringsarbejde.
• Datastyringssystem: REDCAP bruges til at etablere formularer til elektronisk sagsrapport til online dataindsamling og -styring.
• Dataindsamling: Dataindtastning af uafhængige dataregistranter, der ikke er involveret i undersøgelsen i undersøgelsesledningen.
• Overvågning af datakonsistens: Overvågning af datakonsistens med en uafhængig tredjepartsmonitor.
• Datarevision og låsning: Data revideres, rengøres og låst af en dedikeret dataleder.

V. Statistisk analyseplan

(i) Hypotesetest. H0: Ingen forskel i gener mellem personer med og uden leverskade efter indtagelse af APAP H1: betydelige genetiske forskelle mellem personer med og uden leverskade efter indtagelse af APAP

(ii) Analytiske strategier.

• Kontinuerlige variabler blev beskrevet som gennemsnit ± standardafvigelse (SD) eller median af interkvartilt rækkevidde (IQR), og forskelle mellem grupper blev analyseret ved to-faktor ANOVA eller ikke-parametriske tests. Kategoriske variabler blev udtrykt som antal og procenter og analyseret ved logistiske regressionsmodeller.
• Hardy-Weinberg-ligevægt (HWE) mellem kontrolgrupper blev testet ved hjælp af god-af-fit χ2-testen. Ved hjælp af haplotype -analyse -visning （Haploview） 4.2 Software blev gruppen Haplotype -region valgt i betragtning af sammenhængen med sammenkoblingen mellem mærker med enkelt nukleotidpolymorfismer (TagSNP'er).
• Multivariat betinget logistisk regressionsanalyse blev udført for at estimere sammenhængen mellem genotype og risiko for DILI fra APAP ved dominansforhold (ORS) og 95% konfidensintervaller (CI'er) med gastrisk skylning og modgiftsanvendelse som covariater.
• Tre forskellige genetiske modeller blev anvendt til at syntetisere rollen som TagSNP'er. Softwarepakke til Hardy-Weinberg Analyse (SHESE) Online-program blev brugt til haplotypeanalyse under logistisk regressionsmodel.
• Alle analyser blev udført ved hjælp af statistik er en kraftfuld statistisk softwareplatform (SPSS) til Windows (version 26.0 USA). To-halede P-værdier <0,05 blev betragtet som statistisk signifikante.