筛选APAP诱导药物诱导的中国人群肝损伤的易感基因：一项病例对照研究 (PAIN)

I.研究对象

（i）进入小组策略：连续成组。

（ii）分组策略：

1. 案例组。

   纳入标准：

   • 对乙酰氨基酚（或含有乙酰氨基酚的药物）摄入的清晰史。
   • 如果摄入史尚不清楚，则血浆和/或尿液测试对乙酰氨基酚成分。
   • 在APAP给药和Roussel因果关系评估方法（RUCAM）得分> 6> 6
   • 年龄≥14岁。
   • 主题或监护人同意参加该项目并签署知情同意书。

   排除标准：•使用指示中对肝损害不良反应的频率的药物使用中的“常见或非常常见”（≥1％）。

   • 同时使用的草药显然容易受到肝脏损害（请参阅附件中的定义清单）。
   • 具有肝损伤的已知确定原因：主动病毒肝炎；酒精性肝病；自身免疫性肝病；原发性或继发性肝肿瘤；以及其他影响肝功能的潜在肝病。
   • 那些无法提供完整的一般信息和临床信息的人。
   • 不同意看到该项目的受试者或监护人不会签署知情同意书。

2. 对照组

   纳入标准：

   • 对乙酰氨基酚（或含有乙酰氨基酚的药物）摄入的清晰史。
   • 如果尚不清楚APAP摄入史，则血浆和/或尿液测试对乙酰氨基酚成分。
   • 年龄：≥14岁。
   • 主题或监护人同意参加该项目并签署知情同意书。

   排除标准：•使用指示中对肝损害不良反应的频率的药物使用中的“常见或非常常见”（≥1％）。

   •同时使用明显易受肝损害的草药（请参阅附件中的定义清单）。

   •有肝损害的已知原因（请参阅附件的定义清单）：主动病毒肝炎；酒精性肝病；自身免疫性肝病；原发性或继发性肝肿瘤；以及其他影响肝功能的潜在肝病。

   •那些无法提供完整的一般信息和临床信息的人。

   •不同意看到该项目的受试者或监护人不签署知情同意书。

   （iii）匹配策略。

   匹配原则：

   •根据摄入的剂量，解毒剂的持续时间和胃灌洗持续时间，病例和对照参与者匹配。

   •1：2匹配。

   混杂因素：

   •剂量摄入量：患者报告（初级） +血液浓度测试（次要）

   •解毒剂使用时间：<4小时，4-24小时，> 24小时

   •胃灌洗时间：<1小时，≥1小时

   （iv）样本量的估计

   参数来源：

   • 专注于药物代谢酶，免疫原子基因座
   • 基于文献发现，亚洲人群中APAP依赖性DILI易感性等位基因频率的分布。

2。参数值：

• 假设：基因环境。
• 结果模型：基线风险P0 = 0.10。
• 遗传效应= 1.2，
• 电源= 0.8，I型错误率= 0.05 （双面）。

结果：情况样本量应为113，对照样本量为226。

ii。暴露/风险因素。

（i）定义。 暴露因素是指由APAP引起的DILI的易感基因，包括：

• 2,036,060个标记站点
• 人白细胞抗原（HLA）：HLA-A和HLA-B免疫位点。
• 基因型输入。

（ii）测量方法。

1. 采用候选基因策略。 候选基因策略是一种灵活的方法，具有低成本，相对简单的质量控制和统计分析，并且在关联背后的生物学解释相对容易，因为所选基因对疾病都很重要。
2. 使用假设驱动的方法。 考虑到某些特定基因可能与研究结果相关的假设，选择了一种基于序列的方法来分析潜在功能性单核苷酸多态性（SNP），选择更可能与药物代谢相关的功能价值的SNP与药物代谢值相关，该酶，免疫原性，药物转运蛋白，药物，其他构造群和其他定位的candistion和其他定位的群构成。
3. 使用自定义芯片。 扩展的多种族基因分型阵列（Megaex）是由财团建造的微阵列，具有增强的能力，可以理解各种人群中的复杂疾病。 该市售的微阵列通过检测2,036,060个标记基因座来决定个体药物反应。 它还补充了HLA-A和HLA-B免疫基因座信息以完成基因型输入。

iii。质量控制该研究具有严格的标准测试操作程序，并且在实验开始之前对参与测试的人员进行了相关培训，并且仅在通过培训后才能进行测试。 我们有一个质量控制中心，负责主题进度和数据质量控制的专用人员。 在线数字随机平台和信息输入管理系统是根据Web服务器终端设置的，该系统能够及时案例随机分组和电子临床案例观察表格信息输入，并可以在信息输入过程中有效，自动检查并正确检查并正确错误。 也就是说，它有助于确保输入信息的准确性和可靠性，并可以为主管提供实时数据监视。 此外，这项研究将监测实验和数据输入的行为。

iv。数据管理计划

• 数据中心：国家数据管理标准建立的数据管理中心从事数据管理工作。
• 数据管理系统：REDCAP用于建立用于在线数据收集和管理的电子案例报告表。
• 数据收集：独立数据注册人的数据输入不参与研究领先单位的研究。
• 数据一致性监视：独立第三方监视器的数据一致性监视。
• 数据审核和锁定：专用数据管理器对数据进行了审核，清洁和锁定。

V.统计分析计划

（i）假设检验。 H0：摄入APAP H1后有和没有肝脏损害的受试者之间的基因没有差异

（ii）分析策略。

• 连续变量被描述为平均值±标准偏差（SD）或四分位间范围（IQR）的中位数，两组之间的差异通过两因素ANOVA或非参数测试分析。 分类变量表示为数字和百分比，并通过逻辑回归模型进行分析。
• 使用拟合优度测试测试了对照组之间的Hardy-Weinberg平衡（HWE）。 使用单倍型分析视图（Haploview）4.2软件，考虑了单型区域组，考虑了单核苷酸多态性（TAGSNP）的标签之间的连锁不平衡。
• 进行了多元条件逻辑回归分析，以估计基因型与APAP的风险在APAP（ORS）和95％置信区间（CIS）与胃灌洗和胃液和解毒作用作为协变量之间的关联。
• 使用三种不同的遗传模型来合成TAGSNP的作用。 Hardy-Weinberg分析（SHES）在线程序的软件包用于在Logistic回归模型下进行单倍型分析。
• 所有分析均使用Statistics进行，是Windows（美国版本26.0）的功能强大的统计软件平台（SPSS）。 两尾p值<0.05被认为具有统计学意义。