転移性分化型甲状腺癌の迅速な検出のためのサイログロブリン ポイント オブ ケア アッセイ

方法と材料

仮説: 新しい POC-Tg の診断精度は、DTC 転移が疑われる子宮頸部 LN の評価に使用される現在の診断方法に匹敵します。

標的

1. FNA クリニックで POC-Tg を検証するには: DTC が既知または疑われる患者の不確定または疑わしい子宮頸部 LN は、新しい POC-Tg と正式な評価 (Tg および細胞診の正式なイムノアッセイ) の両方を使用して評価されます。
2. OR で POC-Tg を検証するには: DTC のために手術を受けた患者の不確定または疑わしい子宮頸部 LN は、新しい POC-Tg と正式な評価 (病理施設での凍結切片および/または最終組織学) の両方を使用して評価されます。

重要性: 正確な POC-Tg は、転移性 DTC が疑われる患者の現在の診断および治療アプローチを変更し、患者管理を改善する可能性があります。

研究デザイン:

研究者は、多施設研究を実施します。 すべてのコード化されたデータは、ソロカ大学医療センター (SUMC) 臨床研究センターによって、電子症例報告フォームを使用して一元的に管理されます。 新しい POC-Tg の感度および特異性評価のすべてのデータ、および DTC 子宮頸部 LN 転移の現在の診断方法は、参照 (「ゴールド」) 基準に対して遡及的に分析されます (以下を参照)。 臨床的決定は、現在のガイドラインと、DTC 転移が疑われる子宮頸部 LN の評価のための受け入れられたアプローチに従って行われます (FNA クリニックでは、FNAC と FNA-Tg の組み合わせ; 手術室では、凍結切片および/または最終的な組織学）。

詳細な研究プロトコル

1. FNAクリニック部門：

   募集されたすべての患者は、12.5 MHz リニア フェーズド アレイ トランスデューサーを備えた US スキャナーを使用して首の US 検査を受けます。 疑わしいまたは不確定なLNのUSガイドFNAは、臨床的に示されているように、経験豊富な医師（内分泌学者、耳鼻咽喉科医、または放射線科医）によって実行されます。 LN は、次の画像特徴のいずれかが存在する場合に疑わしいと分類されます: 石灰化、嚢胞性変化、高エコー原性、またはカラードップラー画像での末梢またはびまん性血管分布の増加。 LN は、明確な良性も疑わしい画像特徴も見つからない場合、不確定な疑わしいものとして分類されます (疑わしい所見がない場合、エコー源性肺門も肺門血管分布もありません)。 FNA 手順は、各医療センターで定期的に行われているように、3 ～ 10 mL の注射器に接続された 22 ～ 25 ゲージの針を使用するフリーハンド技術を使用して、米国のガイダンスの下で実行されます。 技術的および臨床的に可能であれば、各 LN は 2 回サンプリングされます: 細胞学のための 1 つの通路と FNA-Tg ウォッシュアウトのための 1 つの通路。

   細胞診用の FNA (FNAC) - FNAC 標本は、各医療センターで定期的に実施されているように、直接塗抹標本および/または液体ベースの細胞診から調製されます。 SUMC の FNA クリニックでは、標本をスライドに塗抹し、直接塗抹法を使用して 95% エタノールで直ちに固定します。 液体ベースの細胞診法では、ThinPrep PreservCyt® (Hologic Ins., Marlborough, MA, USA) を使用して標本を調製します。 細胞診の所見は、甲状腺細胞診を専門とする細胞病理学者によって解釈されます。 対象の LN から得られた細胞診の結果は、悪性、良性、または不確定に分類されます。

   FNA-Tg および POC-Tg- 針が目的の LN 内に局在化された後、注射器のハンドルによって負圧が発生し、内向きおよび回転運動を実行しながら、近位端に血まみれの物質が見られるまで針。 その後、100 μL の 0.9% (w/v) 生理食塩水が針を介して注射器に引き込まれます。この注射器には、対象の LN からの 100 μL の軽度の血吸引が含まれます。 吸引物は、FNA手順に使用されたのと同じ針を通してエッペンドルフチューブに移されます。 この時点でPOC-Tgキットの製品袋が開封されます。 使い捨てピペットを使用して、40 μL がエッペンドルフ チューブから吸引され、POC-Tg キットのサンプル ウェルの中央に滴下されます。 その後、2 滴のバッファーがサンプルウェルの中央に分注されます。 POC-Tg の結果は、10 分後に取得され、文書化されます。 POC-Tg キットの精度を、各機関で使用されている Tg の正式なイムノアッセイと比較するために、0.9% 生理食塩水が吸引液に追加され、エッペンドルフ チューブに残され、最終容量 0.6 mL になり、転送されます。ゲルを含むチューブに入れ、Tg 測定を行う臨床検査室に送ります。

   参照 (「ゴールド」) 標準 - LN は、悪性 FNA 細胞診 (Bethesda 6) を示すか、次の基準の少なくとも 1 つを満たす場合、最終的に転移性と診断されます: (i) 外科標本 (組織学) に基づく悪性確認、( ii) それぞれ Bethesda 6 または DTC を報告するその後の FNA またはコア針生検の繰り返し、または (iii) 転移の明確な米国の特徴を示す 1 年後の画像によるフォローアップ。 同じ基準による転移性疾患のない良性または不確定な FNA 細胞診を有する LN は、最終的に良性と診断されます。

   ルーチン検査室評価 - 血漿 Tg、抗 Tg 抗体、抗甲状腺ペルオキシダーゼ、TSH、遊離 T4、および遊離 T3 などの分析物は、甲状腺疾患が疑われる、または既知の患者のルーチン評価の一環として実行されます。

   必要なデータ (取得するデータ):

   • 技術データ（センターごと）：各機関で使用されている米国の会社、FNA-Tgイムノアッセイのタイプ（タイプ、会社、検出限界、報告された精度）、使用された細胞学的評価（タイプと会社）。
   • 人口統計学的および臨床的データ：生年月日、インデックス手順の日付、インデックス手順時の年齢（年）、橋本甲状腺炎の過去の診断（ICD9 コード 2452）、バセドウ病の過去の診断（ICD9 コード 2420）、治療レボチロキシンまたは抗甲状腺薬を使用している、甲状腺手術の既往（いいえ、肺葉切除 [左/右]、甲状腺亜全摘、甲状腺全摘）、頸部郭清（中央 [いいえ、右、左]、側面レベル 2 ～ 4） [いいえ、右、左]、側面レベル 5 [いいえ、右、左])。
   • インデックス手順前の検査データ (それぞれが実施された検査室で使用された単位で報告され、標準の X 上限として報告されます): TSH、Tg、抗 Tg- 抗体、遊離 T4、遊離 T3、抗-甲状腺ペルオキシダーゼ。
   • 米国での甲状腺の所見に関して、最も疑わしい結節について次の情報にアクセスします: TIRADS ポイント、TIRADS クラス、米国甲状腺協会クラス、3 次元、およびボリューム。
   • 手順が行われたLNの米国所見（それぞれについてはい/いいえ）：エコー源性門部、肺門血管分布、石灰化、嚢胞性変化、超エコー源性、カラードップラー画像での末梢またはびまん性血管分布の増加、最終的な解釈（不確定/疑わしい） ）。
   • 最も疑わしい/関連性の高い甲状腺結節の細胞学的レポート: Bethesda システム スコア。
   • 手順が行われる LN の細胞学的所見: 良性、不確定、または悪性に分類されます。
   • FNA-Tg- 機関の研究室によって報告されたユニット、および標準の X 上限。
   • POC-Tg-陽性または陰性。
   • 最終組織学
2. OR アーム:

甲状腺/首の手術およびEx-vivo FNA-募集されたすべての患者は、DTCの一次治療の一部として、または持続性または再発性DTCのいずれかとして、臨床的に示されるように手術されます。 甲状腺と頸部の解剖手術は、経験豊富な耳鼻咽喉科医または内分泌外科医が担当します。 不確定または疑わしい LN が発見され、LN の凍結切片レポートが手術範囲を変更する可能性があるとみなされる場合はいつでも、LN は解剖され、正式な評価凍結切片と POC-Tg の両方によって評価されます。 LN の解剖に続いて、ex-vivo FNA-Tg および POC-Tg は、上記で詳述したように実施されます (「FNA-Tg および POC-Tg」セクションの下)。

凍結切片 - 凍結切片の関連する標本は、臨床的に示され、各医療センターで定期的に実施されるように、解剖され、処理され、病理学的評価に送られます。 手術中のすべての臨床的決定は、凍結切片の結果または臨床的判断に従って行われます。 目的の LN から得られた凍結切片分析の組織学的結果は、悪性、良性、または不確定/不確定に分類されます。

参照 (「ゴールド」) 標準 - LN は、最終的な組織学的レポートに従って最終的に良性または悪性 (DTC 転移) と診断されます。

必要なデータ:

• 技術データ (センターごと): 凍結切片装置、FNA-Tg イムノアッセイの種類 (種類、会社、検出限界、報告された精度)。
• 人口統計学的および臨床的データ：生年月日、インデックス手順の日付、インデックス手順時の年齢（年）、橋本甲状腺炎の過去の診断（ICD9 コード 2452）、バセドウ病の過去の診断（ICD9 コード 2420）、治療レボチロキシンまたは抗甲状腺薬を使用している、甲状腺手術の既往（いいえ、肺葉切除 [左/右]、甲状腺亜全摘、甲状腺全摘）、頸部郭清（中央 [いいえ、右、左]、側面レベル 2 ～ 4） [いいえ、右、左]、側面レベル 5 [いいえ、右、左])。
• インデックス手順前の検査データ (それぞれが実施された検査室で使用された単位で報告され、標準の X 上限として報告されます): TSH、Tg、抗 Tg- 抗体、遊離 T4、遊離 T3、抗-甲状腺ペルオキシダーゼ。
• 最も疑わしい/関連する甲状腺結節の細胞学的報告: Bethesda システム。
• 関連する LN の細胞学的所見: 良性、不確定、または悪性に分類されます。
• 予定されている手術：肺葉切除[左/右]、甲状腺部分切除、甲状腺全摘、頸部郭清(中央[いいえ、右、左]、外側レベル2-4[いいえ、右、左]、外側レベル5[いいえ、右左]）。
• FNA-Tg- 機関の研究室によって報告されたユニット、および標準の X 上限。
• POC-Tg-陽性または陰性。
• 凍結切片レポート: 悪性、良性、または不確定/不確定。
• 凍結切片の評価に必要な全体の時間 - 解剖からレポートまで (分)。
• 実行された操作: 計画どおり/延長されました (指定)。
• 最終組織学

統計分析：

感度と特異度の推定値は、陽性サンプルと陰性サンプルについてそれぞれ計算されますが、それらの状態は参照 (「ゴールド」) 標準 (細胞学と組織学の結果、およびその他の臨床情報に応じた診断手順) を使用して定義されます。 研究の主な目的に対処するために、95% 信頼区間が各検証パラメーターの周りに構築されます。 標準誤差のサンドイッチ推定量を使用して、同じ患者に由来する OR で採取されたサンプルの設計効果が考慮されます。 さらに、研究者は、参照 (「ゴールド」) 基準との診断テストの一致と不一致に関連する潜在的な要因を調査します。 具体的には、診断が参照 (「ゴールド」) 基準と一致した患者の特徴を、結果が一致しない患者と比較します。 このタイプの分析は、もしあれば、テストを利用すべきではない母集団を示します。 比較は、標準的な統計手法を使用して実施されます。 カテゴリ変数のカイ 2 乗またはフィッシャーの正確確率検定、および連続パラメーターの t 検定、ANOVA、またはノンパラメトリック代替検定。 信頼区間は、クラスター化された観測値に応じて調整されます。