전이성 분화 갑상선 암종의 신속한 검출을 위한 티로글로불린 현장 진료 분석

방법 및 재료

가설: 새로운 POC-Tg의 진단 정확도는 DTC 전이로 의심되는 자궁 경부 LN 평가에 사용되는 현재 진단 방법과 비슷할 것입니다.

목표

1. FNA 클리닉에서 POC-Tg를 검증하려면: DTC가 알려졌거나 의심되는 환자의 불확실하거나 의심스러운 자궁 경부 LN은 새로운 POC-Tg와 공식 평가(Tg 및 세포학에 대한 공식 면역분석)를 모두 사용하여 평가됩니다.
2. 수술실에서 POC-Tg를 확인하려면: DTC 수술을 받은 환자의 불확실하거나 의심스러운 자궁경부 LN은 새로운 POC-Tg와 공식 평가(병리 기관의 동결 절편 및/또는 최종 조직학)를 모두 사용하여 평가됩니다.

의의: 정확한 POC-Tg는 전이성 DTC가 의심되는 환자의 현재 진단 및 치료 접근 방식을 변경하고 환자 관리를 개선할 수 있습니다.

연구 설계:

조사관은 다기관 연구를 수행할 것입니다. 코딩된 모든 데이터는 소로카 대학 의료 센터(SUMC) 임상 연구 센터에서 전자 증례 보고서 양식을 사용하여 중앙에서 관리됩니다. 새로운 POC-Tg의 민감도 및 특이도 평가를 위한 모든 데이터와 DTC 자궁 경부 LN 전이의 현재 진단 방법은 참조('골드') 표준(아래 참조)에 대해 후향적으로 분석됩니다. 임상 결정은 DTC 전이로 의심되는 자궁경부 림프절의 평가를 위해 현재 지침 및 허용된 접근 방식에 따라 이루어집니다(FNA 클리닉에서는 FNAC 및 FNA-Tg의 조합, 수술실에서는 동결 절편 및/또는 최종 조직학).

상세한 연구 프로토콜

1. FNA 진료소:

   모집된 모든 환자는 12.5MHz 선형 위상 배열 변환기가 있는 US 스캐너를 사용하여 목에 대한 US 검사를 받게 됩니다. 의심스럽거나 불확실한 LN의 US 유도 FNA는 임상적으로 지시된 대로 경험이 풍부한 의사(내분비학자, 이비인후과 의사 또는 방사선과 의사)가 수행합니다. LN은 석회화, 낭포성 변화, 고에코, 컬러 도플러 영상에서 말초 또는 미만성 혈관 증가와 같은 영상 특징 중 하나라도 있는 경우 의심스러운 것으로 분류됩니다. LN은 명확한 양성 또는 의심스러운 영상 특징이 발견되지 않을 때 불확실한 의심으로 분류됩니다(의심스러운 소견이 없는 경우 에코성 hilum 또는 hilar vascularity도 없음). FNA 시술은 각 의료기관에서 일상적으로 시행하는 3~10mL 주사기에 연결된 22~25게이지 바늘을 사용하는 프리핸드 기법으로 미국 지침에 따라 시행된다. 기술적으로나 임상적으로 가능한 경우 각 LN은 두 번 샘플링됩니다: 세포학을 위한 한 계대와 FNA-Tg 세척을 위한 한 계대.

   세포학을 위한 FNA(FNAC) - FNAC 표본은 각 의료 센터에서 일상적으로 수행되는 대로 직접 도말 및/또는 액체 기반 세포학에서 준비됩니다. SUMC의 FNA 클리닉에서는 표본을 슬라이드에 도말하고 직접 도말 방법을 사용하여 95% 에탄올에 즉시 고정합니다. 액체 기반 세포학 방법에서는 ThinPrep PreservCyt®(Hologic Ins., Marlborough, MA, USA)를 사용하여 표본을 준비합니다. 세포학 소견은 갑상선 세포학을 전문으로 하는 세포병리학자에 의해 해석될 것입니다. 관심 LN에서 얻은 세포학 결과는 악성, 양성 또는 불확정으로 분류됩니다.

   FNA-Tg 및 POC-Tg- 바늘이 관심 있는 LN 내부에 국한된 후 주사기 손잡이에 의해 음압이 생성되고, 내부-외부 및 회전 운동을 수행하면서 혈액의 근위 단부에 혈액 물질이 보일 때까지 바늘. 그 후, 0.9%(w/v) 식염수의 100 μL이 바늘을 통해 관심 있는 LN에서 100 μL의 약간 피가 섞인 흡인을 포함하는 주사기로 그려집니다. 그런 다음 흡인물은 FNA 절차에 사용된 것과 동일한 바늘을 통해 Eppendorf 튜브로 옮겨집니다. 이때 POC-Tg 키트의 제품백이 개봉됩니다. 일회용 피펫을 사용하여 Eppendorf 튜브에서 40µL를 흡입하여 POC-Tg 키트의 샘플 웰 중앙에 떨어뜨립니다. 그런 다음 버퍼 두 방울이 샘플 웰의 중앙으로 분배됩니다. POC-Tg의 결과는 10분 후에 얻어지고 문서화됩니다. POC-Tg 키트의 정확도를 각 기관에서 사용하는 Tg에 대한 공식 면역분석법과 비교하기 위해 0.9% 식염수를 Eppendorf 튜브에 남길 흡인액에 첨가하여 최종 부피 0.6 mL로 만든 후 이송합니다. 젤 함유 튜브에 넣고 Tg 측정을 수행하는 임상 실험실로 보냅니다.

   참조('골드') 표준-LN은 악성 FNA 세포학(Bethesda 6)을 나타내거나 다음 기준 중 하나 이상을 충족하는 경우 최종적으로 전이성으로 진단됩니다: (i) 수술 표본(조직학)에 기반한 악성 확인, ( ii) 각각 Bethesda 6 또는 DTC를 보고하는 후속 반복 FNA 또는 코어 바늘 생검, 또는 (iii) 명확한 미국 전이 특징을 나타내는 1년 후 영상 추적. 동일한 기준에 의해 전이성 질환이 없는 양성 또는 불확실한 FNA 세포학을 가진 LN은 최종적으로 양성으로 진단됩니다.

   정기 실험실 평가 - 혈장 Tg, 항-Tg-항체, 항-갑상선-과산화효소, TSH, 유리 T4 및 유리 T3와 같은 분석물은 갑상선 질환이 의심되거나 알려진 환자의 일상 평가의 일부로 수행됩니다.

   필수 데이터(캡처할 데이터):

   • 기술 데이터(센터당): 각 기관에서 사용된 미국 회사, FNA-Tg 면역분석의 유형(유형, 회사, 검출 한계, 보고된 정확도), 사용된 세포학적 평가(유형 및 회사).
   • 인구통계학적 및 임상 데이터: 생년월일, 지수 시술 날짜, 지수 시술 당시 연령(세), 과거 하시모토 갑상선염 진단(ICD9 코드 2452), 과거 그레이브스병 진단(ICD9 코드 2420), 치료 레보티록신 또는 항갑상샘 약물 사용, 이전 갑상선 수술(아니오, 폐엽 절제술[왼쪽/오른쪽], 갑상선 아전절제술, 전체 갑상선 절제술), 이전 경부 절제술(중앙[아니오, 오른쪽, 왼쪽], 측면 레벨 2-4 [아니오, 오른쪽, 왼쪽], 측면 레벨 5 [아니오, 오른쪽, 왼쪽]).
   • 인덱스 절차 이전의 검사실 데이터(각각 검사가 수행된 검사실에서 사용된 단위와 X 정상 상한으로 보고됨): TSH, Tg, 항-Tg-항체, 유리 T4, 유리 T3, 항- 갑상선 과산화효소.
   • 갑상선의 미국 소견과 관련하여 가장 의심스러운 결절에 대해 다음 정보에 액세스합니다: TIRADS 포인트, TIRADS 클래스, 미국 갑상선 협회 클래스, 3차원 및 용적.
   • 절차가 수행되는 림프절의 미국 소견(각각에 대해 예/아니오): 에코성 폐문, 폐문 혈관, 석회화, 낭성 변화, 고에코, 말초 또는 미만성 컬러 도플러 영상에서 증가된 혈관, 최종 해석(불확정/의심 ).
   • 가장 의심스러운/관련 갑상선 결절의 세포학적 보고: Bethesda 시스템 점수.
   • 절차가 수행되는 LN의 세포학적 소견: 양성, 불확정 또는 악성으로 분류됩니다.
   • 기관 연구실에서 보고한 FNA-Tg- 단위 및 표준의 X 상한.
   • POC-Tg- 양성 또는 음성.
   • 최종 조직학
2. 수술실:

갑상선/경부 수술 및 Ex-vivo FNA - 모집된 모든 환자는 임상적으로 지시된 대로 DTC 또는 지속성 또는 재발성 DTC에 대한 1차 치료의 일부로 수술됩니다. 갑상선 및 목 해부 수술은 경험이 풍부한 이비인후과 의사 또는 내분비 외과 의사가 주도합니다. 불명확하거나 의심스러운 LN이 발견되고 LN의 동결 절편 보고서가 수술 범위를 변경할 수 있다고 간주될 때마다 LN을 해부하고 공식 평가-동결 절편과 POC-Tg에 의해 평가합니다. LN의 해부 후, 전 생체 FNA-Tg 및 POC-Tg는 위에서 설명한 대로 수행됩니다('FNA-Tg 및 POC-Tg' 섹션 아래).

동결 절편 - 동결 절편에 해당하는 검체를 해부하고 치료한 후 임상적 지시에 따라 병리학적 평가를 실시하고 각 의료원에서 일상적으로 실시합니다. 수술 중 모든 임상적 결정은 동결 절편 결과 또는 임상적 판단에 따라 이루어집니다. 관심 LN에서 얻은 동결 절편 분석의 조직학 결과는 악성, 양성 또는 미확정/미확정으로 분류됩니다.

참조('골드') 표준- LN은 최종 조직학적 보고서에 따라 최종적으로 양성 또는 악성(DTC 전이)으로 진단됩니다.

필요한 데이터:

• 기술 데이터(센터당): 냉동 섹션 장비, FNA-Tg 면역분석 유형(유형, 회사, 검출 한계, 보고된 정확도).
• 인구통계학적 및 임상 데이터: 생년월일, 지수 시술 날짜, 지수 시술 당시 연령(세), 과거 하시모토 갑상선염 진단(ICD9 코드 2452), 과거 그레이브스병 진단(ICD9 코드 2420), 치료 레보티록신 또는 항갑상샘 약물 사용, 이전 갑상선 수술(아니오, 폐엽 절제술[왼쪽/오른쪽], 갑상선 아전절제술, 전체 갑상선 절제술), 이전 경부 절제술(중앙[아니오, 오른쪽, 왼쪽], 측면 레벨 2-4 [아니오, 오른쪽, 왼쪽], 측면 레벨 5 [아니오, 오른쪽, 왼쪽]).
• 인덱스 절차 이전의 검사실 데이터(각각 검사가 수행된 검사실에서 사용된 단위와 X 정상 상한으로 보고됨): TSH, Tg, 항-Tg-항체, 유리 T4, 유리 T3, 항- 갑상선 과산화효소.
• 가장 의심스러운/관련 갑상선 결절의 세포학적 보고: Bethesda 시스템.
• 관련 LN의 세포학적 소견: 양성, 불확정 또는 악성으로 분류됨.
• 계획된 수술: 폐엽절제술[좌/우], 갑상선 아전절제술, 갑상선 완전절제술, 경부절제술(중앙[없음, 오른쪽, 왼쪽], 측면 2-4[없음, 오른쪽, 왼쪽], 측면 5[없음, 오른쪽 왼쪽]).
• 기관 연구실에서 보고한 FNA-Tg- 단위 및 표준의 X 상한.
• POC-Tg- 양성 또는 음성.
• 고정 섹션 보고서: 악성, 양성 또는 불확정/미확정.
• 고정 절편 평가에 필요한 전체 시간 - 해부에서 보고까지(분).
• 실행된 작업: 계획/확장된 대로(구체적으로).
• 최종 조직학

통계 분석:

민감도와 특이도의 추정치는 각각 양성 및 음성 샘플에 대해 계산되며, 상태는 참조('골드') 표준(세포학 및 조직학 결과 및 기타 임상 정보에 따른 진단 절차)을 사용하여 정의됩니다. 연구의 주요 목적을 다루기 위해 각 검증 매개변수 주위에 95% 신뢰 구간이 구성됩니다. 표준 오차의 샌드위치 추정기를 사용하여 동일한 환자에서 유래한 수술실에서 채취한 샘플에 대해 설계 효과가 고려됩니다. 또한 연구원들은 참조('골드') 표준과 진단 테스트의 일치 및 불일치와 관련된 잠재적 요인을 탐색할 것입니다. 구체적으로, 진단이 기준('골드') 표준과 일치하는 환자의 특성은 일치하지 않는 결과를 가진 환자와 비교됩니다. 이러한 유형의 분석은 테스트를 활용해서는 안 되는 모집단(있는 경우)을 나타냅니다. 비교는 표준 통계 방법론을 사용하여 수행됩니다. 범주형 변수에 대한 카이-제곱 또는 피셔의 정확 검정 및 연속 매개변수에 대한 t-검정, ANOVA 또는 비모수 대체 검정. 신뢰 구간은 군집 관찰에 적절하게 조정됩니다.