マルバ・シルベストリス抽出物を含むマウスウォッシュの臨床評価。

デザイン：

3つの並行グループ、トリプルマスキングの無作為化臨床試験を設計しました. 研究とインフォームド コンセントの文書は、セルビシオ デ サリュド バルディビアの委員会 (ORD 181/2017) によって審査および承認され、CONSORT (EQUATOR ネットワーク) の執筆ガイドラインに従って作成されました。

人口：

参加者は、2017 年 10 月から 2018 年 12 月にかけて、チリ南部チリ大学 (UACh) (チリ南部バルディビア) のデンタル クリニック センターの口腔および歯周外科部門から選ばれました。

サンプルサイズ：

サンプル サイズの計算では、CHX マウスウォッシュの使用の有効性をプラセボよりも考慮しました。これは Loe & Silness (1963) パラメーターによる歯肉指数の減少の標準化された平均値 0.21 (95% CI: 0.1-0.31) です。 ) (15)。 5% のエラーの確率、80% の統計的検出力、および 20% の追跡調査の損失または不在のマージン。 18 人の被験者の参加は、研究グループによって決定されました (計算アルゴリズム: "power two means 1.21 1, sd1 (0.2) sd2 (0.2) knowns"、STATA V.14.0、STATASp、Texas、USA)。

M. sylvestris 抽出物とマウスウォッシュの調製:

M. sylvestris のマウスウォッシュの調製には、サンパウロ大学 (USP) の植物標本館に登録されている葉を使用しました。 識別番号 ESA バウチャー # 121403。 葉を強制循環オーブンで 40 °C で 24 時間乾燥させた後、粉砕しました。 抽出は、気候制御下（25°C）で無水エタノールを使用して実施し、光から保護された回転シェーカーで徹底的に抽出しました（7日間）。 抽出シーケンスでは、サンプルをろ過し、蒸発により濃縮し、72 時間凍結乾燥しました。 EEM は、-20 ° C で保存されました。 化学モニタリングは、HPLC MS/MS 技術 (33) によって実施されました。 M. sylvestris に基づくうがい薬は、形態機能的安定性に適合する濃度で化合物を保存するために、1% エタノール溶媒を使用して 10% の標準濃度で調製されました (32,33)。 対照マウスウォッシュは、前のものと同じビヒクルと組成を示しますが、活性化合物は除外されています。CHX マウスウォッシュは、0.12% の濃度で強調された同じビヒクルを使用して 0.12% の濃度で調製されました。

歯周指標の記録:

臨床試験の前に、2 人の審査官 (E.A と A.N) は、歯周病専門医による臨床指標 (BPE、歯肉指標、プラーク コントロール記録) の登録のための校正プロセスを受けました。 この目的のために、UACh の歯科診療所センターの 10 人の患者が評価され、専門家によって 90% を超える歯肉指数 (GI) と、歯科六分儀の 1 つに中等度の慢性歯周炎があると診断されました。 試験官間および試験官内カッパ指数は、それぞれ 0.89 および 0.80 です。

研究の目的と方法論は、選択基準を満たし、以前に診断された患者に説明されました。 参加に同意した人は、インフォームド コンセント文書に署名しました。

予約当日、試験官は選択基準が満たされていることを確認し、性別、年齢、衛生習慣、全身疾患、薬物の使用、喫煙などのデータを記録しました。

次に、臨床検査に進み、次の指標が評価されました。

• Basic Periodontal Examination (BPE): 口腔を六分儀に分割し、WHO 標準化された歯周プローブを使用して、各歯の前庭および舌口蓋の 3 点 (近心、内側、遠心) で各歯のプロービングを行い、登録します。次のコーディングによると、六分儀ごとの最高値: 0 (健康な組織)、1 (出血陽性、歯周ポケットの欠如)、2 (歯石の存在、欠陥のある充填物、完全に見えるプローブの黒い領域)、3 (歯周5.5 mm を超えるポケット) (35)。
• 歯肉指数 (GI): WHO 標準化された歯周プローブを使用して、0 (炎症がない) から 3 (重度の炎症) までの 4 段階スケールを使用して、頬側、舌側、および歯間乳頭の辺縁歯肉を調べます (37,38)。 .
• プラーク コントロール レコード (PC): 5 滴の Plaque Revealing Solution を塗布し、15 秒間ですべての歯の表面に触れるように舌を動かすよう患者に指示します。 次に、すべての歯の前庭面、舌面、歯間面を検査します。 指数を計算するには、プラークのある歯の表面の総数を足し、この数を口の中に存在する表面の総数で割り、100 (39) を掛けます。

うがい薬の無作為化と使用：

うがい薬の無作為化とマスクされた識別は、1 人の研究者 (B.B.) によって行われました。 すべてのうがい薬は 150 mL の白いバイアルに分注され、各内容物は、担当の研究者だけが知っている異なる色のマーカーによって識別されました。

3 つのグループ内の各患者の無作為化を決定するために、ページ www.random.org が使用され、それぞれグループ G1、G2、および G3 に対応する番号 1、2、または 3 が結果として返されました。

このために、患者は 3 つの並行研究グループに無作為に割り付けられました。

• G1 (緑): 陽性対照 (0.12% CHX)
• G2 (オレンジ): 陰性対照 (アルコール車両うがい薬 0.1%)
• G3 (黄色): 実験群 (M. sylvestris 抽出物の 10% マウスウォッシュ)。 臨床検査の後、別の研究者 (V.Ll.) が、番号、グループ、および色によって割り当てられた患者のコーディングを各臨床記録に記録しました。 彼は無作為化されたグループに対応する各患者にボトルと薬を届け、7 日間 12 時間ごとに 10 ml のマウスウォッシュで 1 分間口内をすすぐ必要がありました。 介入の追跡調査を確認するために、同じ研究者が少なくとも 1 日に 1 回電話をかけ、毎日のすすぎを思い出しました。 指示は口頭と書面で行われました。

患者の再評価は、最初の予約から 7 日後に、同じ検査官が PBE、GI、および PC 指数を登録することによって実施されました。

バイアスのリスクの管理:

番号、グループ、および色によるコーディングによるマスキングメカニズムにより、患者は自分が受け取った特定のうがい薬を知りませんでした。審査官の E.A と A.N は、臨床的側面の評価のみに限定され、データ分析は数値コーディングを使用してデータベースで実行されました。 研究者 B.B だけが、色別の実際の割り当てと、それに対応する研究グループと番号を知っていました。

歯周指標の登録における参加者の衛生習慣の変化におけるランダムバイアスのリスクを制御するために、ブラッシングの頻度、歯磨き粉の種類、および口腔消毒剤のうがい薬の使用が登録されました。口腔衛生の頻度を変更する必要なく、これらの習慣を維持するよう各参加者に指示します。

統計：

うがい薬の研究グループは、独立変数として定義されました。 研究の開始時と介入の7日後に分析されたPCとGIは、従属変数として定義されました。 次のデータの記述統計の分析が行われました: 性別 (男性/女性)、年齢 (歳)、ブラッシングの頻度/日、喫煙 (10 本/日以上のタバコを吸う)、慢性疾患の存在 (はい/いいえ)と薬の消費 (はい/いいえ)。 さらに、PCとGIの値。 連続変数は平均値 (標準偏差 - SD) として提示されました。

分析統計では、データの正規性は Shapiro Wilk 検定によって分析されました (p> 0.05)。 介入前後の 3 つのグループ間の指標を比較するために、反復測定 ANOVA (MR) によってデータを分析しました。 ノンパラメトリック データはサンプルの散布図として提示され、違いを検出するために T 検定と比較されました。

結果バイアスを生成する可能性のある各研究グループに属する患者の初期データの変動性を考慮して、ベースライン データの共分散分析 (ANCOVA) が実行されました。 研究仮説を確認するために、研究グループ間の結果の 95% 信頼区間で平均値を比較し、p < 0.05 の有意水準を確立しました。