Klinisk utvärdering av ett munvatten som innehåller Malva Sylvestris-extrakt.

Design:

Den har utformats för en randomiserad klinisk prövning av tre parallella grupper, trippelmaskering. Studien och informerat samtyckesdokument granskades och godkändes av Comité Ético Científico vid Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) och skrevs enligt CONSORT (EQUATOR Network) skrivriktlinjer.

Befolkning:

Deltagarna valdes ut från Department of Oral and Parodontal Surgery vid Dental Clinic Center vid Universidad Austral de Chile (UACh) (Valdivia, södra Chile) under månaderna oktober 2017 till december 2018.

Provstorlek:

För beräkningen av provstorleken ansågs effektiviteten av användningen av CHX munvatten jämfört med placebo, ett standardiserat medelvärde för minskningen av gingivalindex enligt Loe & Silness (1963) parametrar på 0,21 (95 % KI: 0,1-0,31) ) (15). Sannolikhet för fel på 5 %, statistisk styrka på 80 % och marginal för förlust av uppföljning eller frånvaro av data på 20 %. Deltagandet av 18 försökspersoner bestämdes av studiegruppen (beräkningsalgoritm: "power two betyder 1,21 1, sd1 (0,2) sd2 (0,2) kända", STATA V.14.0, STATASp, Texas, USA).

Beredning av M. sylvestris-extrakt och munvatten:

För beredning av munvatten från M. sylvestris användes bladen registrerade i herbariet vid University of Sao Paulo (USP). Identifikationsnummer ESA-voucher # 121403. Bladen torkades i en forcerad cirkulationsugn i 24 timmar vid 40 °C och krossades sedan. Extraktionen utfördes med absolut etanol under klimatkontroll (25 °C) och utsattes för uttömmande extraktion (7 dagar) i en roterande shaker skyddad mot ljus. I extraktionssekvensen filtrerades proverna, koncentrerades genom indunstning och lyofiliserades i 72 timmar. EEM lagrades vid -20°C. Den kemiska övervakningen utfördes med HPLC MS/MS-teknik (33). Munvatten baserad på M. sylvestris framställdes vid en standardkoncentration av 10% med användning av en 1% etanolvehikel för konservering av föreningar vid en koncentration som är kompatibel med morfofunktionell stabilitet (32,33). Kontrollmunsköljet uppvisar samma vehikel och sammansättning som den föregående men är befriad från den aktiva föreningen och CHX munvatten bereddes i en koncentration av 0,12 % med samma vehikel som en accentuerad vid en koncentration av 0,12 %.

Periodontala index rekord:

Inför den kliniska prövningen genomgick två granskare (E.A och A.N) en kalibreringsprocess för registrering av kliniska index (BPE, gingivalindex och plackkontrolljournal) hos en specialist i parodontik. För detta ändamål utvärderades 10 patienter från Center of Dental Clinics i UACh, diagnostiserade av specialisten med gingivalindex (GI) över 90 % och måttlig kronisk parodontit i en av deras tandsextanter. Mellangranskare och inomgranskare kappa index på 0,89 respektive 0,80.

Målet och metodiken för studien förklarades för de patienter som uppfyllde urvalskriterierna och som redan tidigare hade diagnostiserats. De som tackade ja till att delta skrev under ett informerat samtycke.

På dagen för utnämningen bekräftade examinatorerna uppfyllandet av urvalskriterierna och registrerade uppgifterna: kön, ålder, hygienvanor, systemiska sjukdomar, användning av droger och rökning.

Sedan fortsatte vi till den kliniska undersökningen och följande index utvärderades:

• Grundläggande periodontal undersökning (BPE): Munnen delas in i sextanter och med hjälp av en WHO-standardiserad parodontal sond utförs sonderingen av varje tand i 3 punkter (mesial, medial och distal) av vestibulär och lingual-palatal av varje tand, registrerande det högsta värdet per sextant, enligt följande kodning: 0 (frisk vävnad), 1 (positiv blödning, frånvaro av parodontitficka), 2 (närvaro av tandsten, defekta fyllningar, svart område av sonden helt synligt), 3 (parodontal ficka). ficka större än 5,5 mm) (35).
• Gingivalindex (GI): Med en WHO-standardiserad periodontal sond undersöks den buckala, linguala och interdentala papillens marginala gingival, med hjälp av en fyrgradig skala från 0 (avsaknad av inflammation) till 3 (allvarlig inflammation) (37,38) .
• Plackkontrollprotokoll (PC): 5 droppar Plaque Revealing Solution appliceras och patienten instrueras att göra rörelser med tungan på ett sådant sätt att den vidrör alla dentala ytorna inom en tid av 15 sekunder. De vestibulära, linguala och interproximala ytorna på alla tänder undersöks sedan. För att beräkna indexet, addera det totala antalet tandytor med plack, dividera detta antal med det totala antalet ytor som finns i munnen och multiplicera med 100 (39).

Randomisering och användning av munvatten:

Randomiseringen och den maskerade identifieringen av munvatten gjordes av en enda forskare (B.B.). Alla munvatten dispenserades i en 150 ml vit flaska och varje innehåll identifierades av en annan färgad markör som endast var känd av den ansvariga utredaren.

För att bestämma randomiseringen av varje patient inom de tre grupperna användes sidan www.random.org, där siffrorna 1,2 eller 3 motsvarande grupperna G1, G2 respektive G3 returnerades som ett resultat.

För detta randomiserades patienterna i tre parallella studiegrupper:

• G1 (grön): positiv kontroll (0,12 % CHX)
• G2 (orange): Negativ kontroll (munsköljmedel med alkohol 0,1 %)
• G3 (Gul): Experimentell grupp (10 % munvatten av M. sylvestris-extrakt). Efter den kliniska undersökningen antecknade en annan forskare (V.Ll.) i varje klinisk journal patientens kodning tilldelad efter nummer, grupp och färg. Han gav flaskan och doseringen till varje patient som motsvarade den randomiserade gruppen, och han måste skölja med 10 ml munvatten i 1 minut i munnen, var 12:e timme i 7 dagar. För att bekräfta uppföljningen av interventionen ringde samma forskare telefonsamtal minst en gång om dagen för att komma ihåg den dagliga sköljningen. Instruktionerna levererades muntligt och skriftligt.

Omvärderingen av patienterna utfördes 7 dagar efter det första besöket, av samma granskare som registrerade PBE-, GI- och PC-indexen.

Kontroll av risken för partiskhet:

Maskeringsmekanismerna genom kodning efter nummer, grupp och färg säkerställde att patienterna inte kände till det specifika munvatten de fick; Examinatorerna E.A och A.N var begränsade till att endast bedöma kliniska aspekter och dataanalys utfördes med databasen med numerisk kodning. Endast forskaren B.B kände till den verkliga uppgiften efter färg, med motsvarande studiegrupp och nummer.

För att kontrollera risken för slumpmässig bias i förändringar av hygienvanor hos deltagarna vid registreringen av parodontala index, registrerades frekvensen av borstning, typ av tandkräm och användning av orala antiseptiska munvatten; indikerande för varje deltagare att behålla dessa vanor utan att behöva ändra munhygienfrekvensen.

Statistik:

Studiegrupper för munvatten definierades som en oberoende variabel. PC och GI som analyserades i början och 7 dagar efter ingripandet av studien definierades som beroende variabel. En analys av beskrivande statistik av följande data utfördes: kön (man/kvinna), ålder (i år), frekvens av borstning/dag, rökning (röker över 10 cigaretter/dag), förekomst av kronisk sjukdom (Ja/Nej) och läkemedelskonsumtion (Ja/Nej). Dessutom värdena för PC och GI. De kontinuerliga variablerna presenterades som medelvärden (Standard Deviation - SD).

I den analytiska statistiken analyserades normaliteten hos data med Shapiro Wilk-testet (p> 0,05). För att jämföra indexen mellan de 3 grupperna före och efter interventionen analyserades data med upprepade mätningar ANOVA (MR). De icke-parametriska data presenterades som spridningsdiagram av proverna, jämförelse med T-test för att upptäcka skillnader.

Med tanke på variabiliteten hos de initiala data från patienter som tillhör varje studiegrupp som kan generera en resultatbias, utfördes en analys av kovarians (ANCOVA) av baslinjedata. För att kontrollera studiehypoteserna jämfördes medelvärdena, med ett 95 % konfidensintervall av resultaten mellan studiegrupperna, vilket fastställde en signifikansnivå på p <0,05