Klinische evaluatie van een mondwater met Malva Sylvestris-extract.

Ontwerp:

Het heeft een gerandomiseerde klinische studie ontworpen van drie parallelle groepen, driedubbele maskering. Het onderzoek en het document met geïnformeerde toestemming zijn beoordeeld en goedgekeurd door het Comité Ético Científico van Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) en geschreven volgens de CONSORT (EQUATOR Network) schrijfrichtlijnen.

Bevolking:

De deelnemers werden geselecteerd uit de afdeling Orale en Parodontale Chirurgie van het Dental Clinic Center van de Universidad Austral de Chile (UACh) (Valdivia, Zuid-Chili) in de maanden oktober 2017 tot december 2018.

Steekproefgrootte:

Voor de berekening van de steekproefomvang werd de effectiviteit van het gebruik van CHX-mondwater vergeleken met placebo, een gestandaardiseerd gemiddelde in de reductie van de tandvleesindex volgens Loe & Silness (1963) parameters van 0,21 (95% CI: 0,1-0,31 ) (15). Kans op fouten van 5%, statistische power van 80% en marge van verlies van follow-up of afwezigheid van gegevens van 20%. De deelname van 18 proefpersonen werd per studiegroep bepaald (berekeningsalgoritme: "power two means 1.21 1, sd1 (0.2) sd2 (0.2) knowns", STATA V.14.0, STATASp, Texas, USA).

Bereiding van M. sylvestris-extract en mondwater:

Voor de bereiding van het mondwater van M. sylvestris werden de bladeren gebruikt die zijn geregistreerd in het herbarium van de Universiteit van Sao Paulo (USP). Identificatienummer ESA-voucher # 121403. De bladeren werden 24 uur gedroogd in een oven met geforceerde circulatie bij 40°C en vervolgens geplet. De extractie werd uitgevoerd met absolute ethanol onder klimaatregeling (25 °C) en onderworpen aan uitputtende extractie (7 dagen) in een roterende schudder beschermd tegen licht. In de extractievolgorde werden de monsters gefilterd, geconcentreerd door verdamping en gedurende 72 uur gelyofiliseerd. De EEM werd bewaard bij -20 °C. De chemische monitoring werd uitgevoerd met HPLC MS/MS-techniek (33). De mondspoeling op basis van M. sylvestris werd bereid in een standaardconcentratie van 10% met behulp van een 1% ethanolvehiculum voor conservering van verbindingen in een concentratie die compatibel is met morfofunctionele stabiliteit (32,33). De controle-mondspoeling heeft dezelfde drager en samenstelling als de vorige, maar is vrijgesteld van de actieve verbinding en de CHX-mondspoeling werd bereid in een concentratie van 0,12% met dezelfde drager als geaccentueerd in een concentratie van 0,12%.

Parodontale indexen registreren:

Voorafgaand aan de klinische proef ondergingen twee examinatoren (E.A en A.N) een kalibratieproces voor de registratie van klinische indicatoren (BPE, gingivale index en plaque control record) met een specialist in parodontologie. Daartoe werden 10 patiënten van het Centrum voor Tandheelkundige Klinieken van de UACh geëvalueerd, gediagnosticeerd door de specialist met gingivale index (GI) van meer dan 90% en matige chronische parodontitis in een van hun tandheelkundige sextanten. Inter-examinator en intra-examinator kappa-index van respectievelijk 0,89 en 0,80.

Het doel en de methodologie van de studie werden uitgelegd aan de patiënten die voldeden aan de selectiecriteria en bij wie al eerder de diagnose was gesteld. Degenen die ermee instemden om deel te nemen, ondertekenden een document met geïnformeerde toestemming.

Op de dag van de afspraak bevestigden de examinatoren dat aan de selectiecriteria werd voldaan en registreerden ze de gegevens: geslacht, leeftijd, hygiënische gewoonten, systemische ziekten, drugsgebruik en roken.

Daarna gingen we over tot het klinisch onderzoek en de volgende indices werden geëvalueerd:

• Parodontaal basisonderzoek (BPE): de mond is verdeeld in sextanten en met behulp van een door de WHO gestandaardiseerde parodontale sonde wordt het sonderen van elke tand uitgevoerd op 3 punten (mesiaal, mediaal en distaal) door vestibulair en linguaal-palataal van elke tand, waarbij de hoogste waarde per sextant, volgens de volgende codering: 0 (gezond weefsel), 1 (positieve bloeding, afwezigheid van parodontale pocket), 2 (aanwezigheid van tandsteen, defecte vullingen, zwart gedeelte van de sonde volledig zichtbaar), 3 (parodontaal zak groter dan 5,5 mm) (35).
• Gingival Index (GI): Met een door de WHO gestandaardiseerde parodontale sonde worden de buccale, linguale en interdentale papillen marginale gingivale onderzocht, met behulp van een vierpuntsschaal van 0 (afwezigheid van ontsteking) tot 3 (ernstige ontsteking) (37,38) .
• Plaque control record (PC): 5 druppels Plaque Revealing Solution worden aangebracht en de patiënt wordt geïnstrueerd om bewegingen met de tong te maken op een zodanige manier dat deze alle tandoppervlakken raakt in een tijd van 15 seconden. Vervolgens worden de vestibulaire, linguale en interproximale oppervlakken van alle tanden onderzocht. Om de index te berekenen, telt u het totale aantal tandoppervlakken met tandplak op, deelt u dit aantal door het totale aantal oppervlakken in de mond en vermenigvuldigt u dit met 100 (39).

Randomisatie en gebruik van mondwater:

De randomisatie en gemaskeerde identificatie van de mondspoelingen werd gedaan door een enkele onderzoeker (B.B.). Alle mondspoelingen werden geleverd in een wit flesje van 150 ml en elke inhoud werd geïdentificeerd door een markering in een andere kleur die alleen bekend was bij de verantwoordelijke onderzoeker.

Om de randomisatie van elke patiënt binnen de drie groepen te bepalen, werd de pagina www.random.org gebruikt, met als resultaat de nummers 1, 2 of 3 die overeenkomen met respectievelijk de groepen G1, G2 en G3.

Hiervoor werden de patiënten gerandomiseerd in 3 parallelle onderzoeksgroepen:

• G1 (groen): positieve controle (0,12% CHX)
• G2 (oranje): negatieve controle (alcoholische mondspoeling 0,1%)
• G3 (Geel): Experimentele groep (10% mondwater van M. sylvestris-extract). Na het klinisch onderzoek registreerde een andere onderzoeker (V.Ll.) in elk klinisch dossier de codering van de patiënt die was toegewezen op nummer, groep en kleur. Hij leverde de fles en de dosering af aan elke patiënt die overeenkomt met de gerandomiseerde groep, die gedurende 7 dagen elke 12 uur gedurende 1 minuut met 10 ml mondwater in de mond moest spoelen. Om het vervolg van de ingreep te bevestigen, pleegde dezelfde onderzoeker minstens één keer per dag telefoongesprekken om de dagelijkse spoeling te herinneren. De instructies werden mondeling en schriftelijk gegeven.

De herevaluatie van de patiënten werd 7 dagen na de eerste afspraak uitgevoerd door dezelfde onderzoeker die de PBE-, GI- en PC-indexen registreerde.

Beheersing van het risico op vooringenomenheid:

De maskeringsmechanismen door codering op nummer, groep en kleur zorgden ervoor dat de patiënten niet wisten welk mondwater ze hadden gekregen; examinatoren E.A en A.N waren beperkt tot het beoordelen van klinische aspecten en gegevensanalyse werd uitgevoerd met de database met behulp van numerieke codering. Alleen onderzoeker B.B was op de hoogte van de echte opdracht per kleur, met bijbehorende studiegroep en nummer.

Om het risico van willekeurige vertekening in de veranderingen van de hygiënegewoonten van de deelnemers bij de registratie van de parodontale indexen, de frequentie van poetsen, het type tandpasta en het gebruik van orale antiseptische mondspoelingen te beheersen; elke deelnemer aangeven om deze gewoonten te behouden zonder de frequentie van mondhygiëne te hoeven veranderen.

Statistieken:

Onderzoeksgroepen voor mondwater werden gedefinieerd als een onafhankelijke variabele. De pc en GI die aan het begin en 7 dagen na de interventie van het onderzoek werden geanalyseerd, werden gedefinieerd als afhankelijke variabelen. Een analyse van beschrijvende statistieken van de volgende gegevens werd uitgevoerd: geslacht (man/vrouw), leeftijd (in jaren), poetsfrequentie/dag, roken (rookt meer dan 10 sigaretten/dag), aanwezigheid van chronische ziekte (ja/nee) en medicijngebruik (ja/nee). Bovendien zijn de waarden van PC en GI. De continue variabelen werden gepresenteerd als gemiddelde waarden (Standard Deviation - SD).

In de analytische statistieken werd de normaliteit van de gegevens geanalyseerd door de Shapiro Wilk-test (p> 0,05). Om de indices tussen de 3 groepen voor en na de interventie te vergelijken, werden de gegevens geanalyseerd door ANOVA (MR) met herhaalde metingen. De niet-parametrische gegevens werden gepresenteerd als spreidingsdiagram van de monsters, vergelijking met T-test om verschillen te detecteren.

Gezien de variabiliteit van de initiële gegevens van de patiënten die tot elke onderzoeksgroep behoren die een resultaatbias kan genereren, werd een analyse van covariantie (ANCOVA) van de basislijngegevens uitgevoerd. Om de onderzoekshypothesen te controleren, werden de gemiddelde waarden vergeleken, met een betrouwbaarheidsinterval van 95% van de resultaten tussen onderzoeksgroepen, waarbij een significantieniveau van p <0,05 werd vastgesteld