Klinisk evaluering af en mundskyl, der indeholder Malva Sylvestris-ekstrakt.

Design:

Det er designet til et randomiseret klinisk forsøg med tre parallelle grupper, tredobbelt maskering. Undersøgelsen og informeret samtykkedokument blev gennemgået og godkendt af Comité Ético Científico fra Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) og skrevet i henhold til CONSORT (EQUATOR Network) skriveretningslinjer.

Befolkning:

Deltagerne blev udvalgt fra afdelingen for mund- og parodontalkirurgi på tandklinikcentret på Universidad Austral de Chile (UACh) (Valdivia, det sydlige Chile) i månederne oktober 2017 til december 2018.

Prøvestørrelse:

Til beregning af prøvestørrelsen blev effektiviteten af ​​brugen af ​​CHX mundskyl betragtet i forhold til placebo, et standardiseret gennemsnit i reduktionen af ​​tandkødsindekset ifølge Loe & Silness (1963) parametre på 0,21 (95 % CI: 0,1-0,31) ) (15). Sandsynlighed for fejl på 5 %, statistisk styrke på 80 % og margin for tab af opfølgning eller fravær af data på 20 %. Deltagelsen af ​​18 forsøgspersoner blev bestemt af undersøgelsesgruppen (beregningsalgoritme: "power two betyder 1,21 1, sd1 (0,2) sd2 (0,2) kendte", STATA V.14.0, STATASp, Texas, USA).

Fremstilling af M. sylvestris ekstrakt og mundskyl:

Til fremstilling af mundskyl af M. sylvestris blev bladene registreret i herbariet på University of Sao Paulo (USP) brugt. Identifikationsnummer ESA voucher # 121403. Bladene blev tørret i en tvungen cirkulationsovn i 24 timer ved 40 °C og derefter knust. Ekstraktionen blev udført med absolut ethanol under klimatisk kontrol (25 °C) og udsat for udtømmende ekstraktion (7 dage) i en roterende ryster beskyttet mod lys. I ekstraktionssekvensen blev prøverne filtreret, koncentreret ved inddampning og lyofiliseret i 72 timer. EEM blev opbevaret ved -20 °C. Den kemiske overvågning blev udført ved HPLC MS/MS-teknik (33). Mundskylningen baseret på M. sylvestris blev fremstillet ved en standardkoncentration på 10% under anvendelse af en 1% ethanolvehikel til konservering af forbindelser i en koncentration, der er kompatibel med morfofunktionel stabilitet (32,33). Kontrolmundskyllemidlet præsenterer den samme vehikel og sammensætning som den foregående, men er fritaget for den aktive forbindelse, og CHX-mundskylningen blev fremstillet i en koncentration på 0,12 % med den samme vehikel som en accentueret i en koncentration på 0,12 %.

Periodontale indekser registrerer:

Forud for det kliniske forsøg gennemgik to eksaminatorer (E.A og A.N) en kalibreringsproces til registrering af kliniske indeks (BPE, gingivalindeks og plakkontroljournal) hos en specialist i parodonti. Til dette formål blev 10 patienter fra Center of Dental Clinics i UACh evalueret, diagnosticeret af specialisten med tandkødsindeks (GI) over 90 % og moderat kronisk parodontitis i en af ​​deres dentale sekstanter. Intereksaminator og intra-eksaminator kappa-indeks på henholdsvis 0,89 og 0,80.

Undersøgelsens formål og metodologi blev forklaret til de patienter, der opfyldte udvælgelseskriterierne, og som allerede var blevet diagnosticeret tidligere. De, der sagde ja til at deltage, underskrev et informeret samtykkedokument.

På dagen for udnævnelsen bekræftede eksaminatorerne opfyldelsen af ​​udvælgelseskriterierne og registrerede dataene: køn, alder, hygiejnevaner, systemiske sygdomme, brug af stoffer og rygning.

Derefter fortsatte vi til den kliniske undersøgelse, og følgende indeks blev evalueret:

• Grundlæggende periodontal undersøgelse (BPE): Munden er opdelt i sekstanter og ved hjælp af en WHO-standardiseret parodontal probe udføres sonderingen af ​​hver tand i 3 punkter (mesial, medial og distal) af vestibulær og lingual-palatal af hver tand, der registrerer den højeste værdi pr. sekstant ifølge følgende kodning: 0 (sundt væv), 1 (positiv blødning, fravær af periodontal lomme), 2 (tilstedeværelse af tandsten, defekte fyldninger, sort område af sonden helt synligt), 3 (parodontal lomme) lomme større end 5,5 mm) (35).
• Gingivalindeks (GI): Med en WHO-standardiseret parodontalsonde sonderes den bukkale, linguale og interdentale papiller marginale gingival ved hjælp af en firepunktsskala fra 0 (fravær af inflammation) til 3 (alvorlig inflammation) (37,38) .
• Plaque control record (PC): 5 dråber Plaque Revealing Solution påføres, og patienten instrueres i at lave bevægelser med tungen på en sådan måde, at den berører alle tandoverflader i løbet af 15 sekunder. De vestibulære, linguale og interproximale overflader af alle tænderne undersøges derefter. For at beregne indekset skal du tilføje det samlede antal tandoverflader med plak, dividere dette tal med det samlede antal overflader i munden og gange med 100 (39).

Randomisering og brug af mundskyl:

Randomiseringen og den maskerede identifikation af mundskyllevandene blev udført af en enkelt forsker (B.B.). Alle mundskyllevand blev dispenseret i et 150 ml hvidt hætteglas, og hvert indhold blev identificeret med en forskellig farvet markør, som kun den ansvarlige efterforsker kendte.

Til at bestemme randomiseringen af ​​hver patient inden for de tre grupper, blev siden www.random.org brugt, hvor tallene 1,2 eller 3 svarende til henholdsvis grupperne G1, G2 og G3 blev returneret som resultat.

Til dette blev patienterne randomiseret i 3 parallelle undersøgelsesgrupper:

• G1 (grøn): Positiv kontrol (0,12 % CHX)
• G2 (orange): Negativ kontrol (alkohol mundskyl 0,1 %)
• G3 (Gul): Eksperimentel gruppe (10 % mundskyl af M. sylvestris-ekstrakt). Efter den kliniske undersøgelse registrerede en anden forsker (V.Ll.) i hver klinisk journal patientens kodning tildelt efter nummer, gruppe og farve. Han afleverede flasken og doseringen til hver patient svarende til den randomiserede gruppe, idet han skulle skylle med 10 ml mundskyl i 1 minut i munden hver 12. time i 7 dage. For at bekræfte opfølgningen af ​​interventionen ringede den samme forsker mindst én gang om dagen for at huske den daglige skylning. Instruktionerne blev leveret mundtligt og skriftligt.

Reevalueringen af ​​patienterne blev udført 7 dage efter den første aftale, af den samme undersøger, der registrerede PBE-, GI- og PC-indeksene.

Kontrol af risiko for bias:

Maskeringsmekanismerne gennem kodning efter antal, gruppe og farve sikrede, at patienterne ikke kendte den specifikke mundskyl, de modtog; eksaminatorerne E.A og A.N var kun begrænset til at vurdere kliniske aspekter, og dataanalyse blev udført med databasen ved hjælp af numerisk kodning. Kun forsker B.B var klar over den egentlige opgave efter farve, med dens tilsvarende studiegruppe og nummer.

For at kontrollere risikoen for tilfældig bias i deltagernes ændringer i hygiejnevaner ved registreringen af ​​parodontale indekser, blev hyppigheden af ​​børstning, type tandpasta og brug af orale antiseptiske mundskyllemidler registreret; indikerer til hver deltager at opretholde disse vaner uden at skulle ændre hyppigheden af ​​mundhygiejne.

Statistikker:

Mundskylningsundersøgelsesgrupper blev defineret som en uafhængig variabel. PC og GI analyseret i begyndelsen og 7 dage efter interventionen af ​​undersøgelsen blev defineret som afhængig variabel. En analyse af beskrivende statistik over følgende data blev udført: køn (mand/kvinde), alder (i år), hyppighed af børstning/dag, rygning (ryger over 10 cigaretter/dag), tilstedeværelse af kronisk sygdom (Ja/Nej) og medicinforbrug (Ja/Nej). Hertil kommer værdierne af PC og GI. De kontinuerte variable blev præsenteret som gennemsnitsværdier (Standard Deviation - SD).

I den analytiske statistik blev normaliteten af ​​dataene analyseret ved Shapiro Wilk-testen (p> 0,05). For at sammenligne indeksene mellem de 3 grupper før og efter interventionen blev dataene analyseret ved gentagne målinger ANOVA (MR). De ikke-parametriske data blev præsenteret som scatter plot af prøverne, sammenligning med T-test for at påvise forskelle.

I betragtning af variabiliteten af ​​de indledende data for de patienter, der tilhører hver undersøgelsesgruppe, der kan generere en resultatbias, blev der udført en analyse af kovarians (ANCOVA) af baseline-dataene. For at kontrollere undersøgelsens hypoteser blev middelværdierne sammenlignet med et 95 % konfidensinterval af resultaterne mellem undersøgelsesgrupperne, hvilket etablerede et signifikansniveau på p <0,05