Évaluation clinique d'un bain de bouche contenant de l'extrait de Malva Sylvestris.

Conception:

Il a conçu un essai clinique randomisé de trois groupes parallèles, triple masquage. L'étude et le document de consentement éclairé ont été examinés et approuvés par le Comité Ético Científico du Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) et rédigés conformément aux directives de rédaction CONSORT (EQUATOR Network).

Population:

Les participants ont été sélectionnés dans le département de chirurgie buccale et parodontale du centre de clinique dentaire de l'Universidad Austral de Chile (UACh) (Valdivia, sud du Chili) au cours des mois d'octobre 2017 à décembre 2018.

Taille de l'échantillon:

Pour le calcul de la taille de l'échantillon, l'efficacité de l'utilisation du rince-bouche CHX a été considérée par rapport au placebo, une moyenne standardisée dans la réduction de l'indice gingival selon les paramètres de Loe & Silness (1963) de 0,21 (IC à 95 % : 0,1-0,31 ) (15). Probabilité d'erreur de 5%, puissance statistique de 80% et marge de perte de suivi ou d'absence de données de 20%. La participation de 18 sujets a été déterminée par groupe d'étude (algorithme de calcul : "puissance deux signifie 1,21 1, sd1 (0,2) sd2 (0,2) connus", STATA V.14.0, STATASp, Texas, USA).

Préparation de l'extrait et du bain de bouche de M. sylvestris :

Pour la préparation du bain de bouche de M. sylvestris, les feuilles enregistrées dans l'herbier de l'Université de Sao Paulo (USP) ont été utilisées. Numéro d'identification du bon ESA # 121403. Les feuilles ont été séchées dans une étuve à circulation forcée pendant 24 h, à 40 °C, puis broyées. L'extraction a été réalisée avec de l'éthanol absolu sous contrôle climatique (25 °C) et soumise à une extraction exhaustive (7 jours) dans un agitateur rotatif à l'abri de la lumière. Dans la séquence d'extraction, les échantillons ont été filtrés, concentrés par évaporation et lyophilisés pendant 72 h. L'EEM a été conservé à -20 °C. Le contrôle chimique a été effectué par la technique HPLC MS/MS (33). Le bain de bouche à base de M. sylvestris a été préparé à une concentration standard de 10 % en utilisant un véhicule d'éthanol à 1 % pour la conservation des composés à une concentration compatible avec la stabilité morphofonctionnelle (32,33). Le bain de bouche témoin présente le même véhicule et la même composition que le précédent mais est exempté du composé actif et le bain de bouche CHX a été préparé à une concentration de 0,12% avec le même véhicule qu'un accentué à une concentration de 0,12%.

Les indices parodontaux enregistrent :

Avant l'essai clinique, deux examinateurs (E.A et A.N) ont subi un processus d'étalonnage pour l'enregistrement des indices cliniques (BPE, index gingival et dossier de contrôle de plaque) avec un spécialiste en parodontie. À cette fin, 10 patients du Centre des cliniques dentaires de l'UACh ont été évalués, diagnostiqués par le spécialiste avec un indice gingival (IG) supérieur à 90 % et une parodontite chronique modérée dans l'un de leurs sextants dentaires. Indice kappa inter-examinateur et intra-examinateur de 0,89 et 0,80, respectivement.

L'objectif et la méthodologie de l'étude ont été expliqués aux patients qui remplissaient les critères de sélection et qui avaient déjà été préalablement diagnostiqués. Ceux qui ont accepté de participer ont signé un document de consentement éclairé.

Le jour du rendez-vous, les examinateurs ont confirmé le respect des critères de sélection et enregistré les données : sexe, âge, habitudes d'hygiène, maladies systémiques, consommation de drogues et tabagisme.

Ensuite, nous avons procédé à l'examen clinique et les indices suivants ont été évalués :

• Examen parodontal de base (EPB) : La bouche est divisée en sextants et à l'aide d'une sonde parodontale normalisée par l'OMS, le sondage de chaque dent est effectué en 3 points (mésial, médial et distal) par vestibulaire et lingual-palatin de chaque dent, en enregistrant la valeur la plus élevée par sextant, selon la codification suivante : 0 (tissu sain), 1 (saignement positif, absence de poche parodontale), 2 (présence de tartre, obturations défectueuses, zone noire de la sonde complètement visible), 3 (parodontale poche supérieure à 5,5 mm) (35).
• Index gingival (IG) : Avec une sonde parodontale normalisée par l'OMS, les papilles gingivales marginales buccales, linguales et interdentaires sont sondées, à l'aide d'une échelle à quatre points allant de 0 (absence d'inflammation) à 3 (inflammation sévère) (37,38) .
• Plaque control record (PC) : 5 gouttes de Plaque Revealing Solution sont appliquées et le patient est invité à faire des mouvements avec la langue de manière à ce qu'elle touche toutes les surfaces dentaires en 15 secondes. Les surfaces vestibulaires, linguales et interproximales de toutes les dents sont ensuite examinées. Pour calculer l'indice, additionnez le nombre total de surfaces dentaires avec plaque, divisez ce nombre par le nombre total de surfaces présentes dans la bouche et multipliez par 100 (39).

Randomisation et utilisation du bain de bouche :

La randomisation et l'identification masquée des bains de bouche ont été réalisées par un seul chercheur (B.B.). Tous les bains de bouche ont été distribués dans un flacon blanc de 150 ml et chaque contenu a été identifié par un marqueur de couleur différente connu uniquement de l'investigateur responsable.

Pour déterminer la randomisation de chaque patient au sein des trois groupes, la page www.random.org a été utilisée, les chiffres 1, 2 ou 3 correspondant respectivement aux groupes G1, G2 et G3 étant renvoyés en conséquence.

Pour cela, les patients ont été randomisés en 3 groupes d'étude parallèles :

• G1 (vert) : contrôle positif (0,12 % CHX)
• G2 (Orange) : Contrôle négatif (bain de bouche véhicule alcoolisé 0,1%)
• G3 (Jaune) : groupe expérimental (bain de bouche à 10 % d'extrait de M. sylvestris). Après l'examen clinique, un autre chercheur (V.Ll.) a inscrit dans chaque dossier clinique le codage du patient attribué par numéro, groupe et couleur. Il a délivré le flacon et la posologie à chaque patient correspondant au groupe randomisé, devant se rincer avec 10 ml de bain de bouche pendant 1 minute dans la bouche, toutes les 12 h pendant 7 jours. Pour confirmer le suivi de l'intervention, le même chercheur a passé des appels téléphoniques au moins une fois par jour pour se souvenir du rinçage quotidien. Les instructions ont été données verbalement et par écrit.

La réévaluation des patients a été effectuée 7 jours après le premier rendez-vous, par le même examinateur enregistrant les indices PBE, GI et PC.

Maîtrise du risque de biais :

Les mécanismes de masquage par codage par numéro, groupe et couleur garantissaient que les patients ne connaissaient pas le rince-bouche spécifique qu'ils recevaient ; les examinateurs E.A et A.N se sont limités à évaluer les aspects cliniques et l'analyse des données a été effectuée avec la base de données en utilisant un codage numérique. Seul le chercheur B.B était au courant de la véritable affectation par couleur, avec son groupe d'étude et son numéro correspondants.

Pour contrôler le risque de biais aléatoire dans les changements d'habitudes d'hygiène des participants sur l'enregistrement des indices parodontaux, la fréquence de brossage, le type de dentifrice et l'utilisation de bains de bouche antiseptiques oraux ont été enregistrés ; indiquant à chaque participant de maintenir ces habitudes sans avoir besoin de changer la fréquence d'hygiène bucco-dentaire.

Statistiques:

Les groupes d'étude des bains de bouche ont été définis comme une variable indépendante. Les PC et GI analysés au début et 7 jours après l'intervention de l'étude ont été définis comme variable dépendante. Une analyse des statistiques descriptives des données suivantes a été réalisée : sexe (masculin/féminin), âge (en années), fréquence de brossage/jour, tabagisme (fume plus de 10 cigarettes/jour), présence de maladie chronique (Oui/Non) et la consommation de médicaments (Oui/Non). De plus, les valeurs de PC et GI. Les variables continues ont été présentées sous forme de valeurs moyennes (Standard Deviation - SD).

Dans les statistiques analytiques, la normalité des données a été analysée par le test de Shapiro Wilk (p> 0,05). Pour comparer les indices entre les 3 groupes avant et après l'intervention, les données ont été analysées par mesures répétées ANOVA (MR). Les données non paramétriques ont été présentées sous forme de diagramme de dispersion des échantillons, comparaison avec le test T pour détecter les différences.

Compte tenu de la variabilité des données initiales des patients appartenant à chaque groupe d'étude pouvant générer un biais de résultat, une analyse de covariance (ANCOVA) des données de base a été réalisée. Pour vérifier les hypothèses de l'étude, les valeurs moyennes ont été comparées, avec un intervalle de confiance à 95% des résultats entre les groupes d'étude, établissant un niveau de signification de p <0,05