Avaliação clínica de um colutório contendo extrato de Malva Sylvestris.

Projeto:

Desenha-se um ensaio clínico randomizado de três grupos paralelos, triplo mascaramento. O estudo e o documento de consentimento informado foram revisados ​​e aprovados pelo Comitê Ético Científico do Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) e redigidos de acordo com as diretrizes de redação do CONSORT (Rede EQUATOR).

População:

Os participantes foram selecionados no Departamento de Cirurgia Oral e Periodontal do Centro de Clínica Odontológica da Universidade Austral do Chile (UACh) (Valdivia, sul do Chile) durante os meses de outubro de 2017 a dezembro de 2018.

Tamanho da amostra:

Para o cálculo do tamanho da amostra, foi considerada a efetividade do uso do colutório CHX em relação ao placebo, uma média padronizada na redução do índice gengival segundo Loe & Silness (1963) parâmetros de 0,21 (IC 95%: 0,1-0,31 ) (15). Probabilidade de erro de 5%, poder estatístico de 80% e margem de perda de seguimento ou ausência de dados de 20%. A participação de 18 indivíduos foi determinada por grupo de estudo (algoritmo de cálculo: "potência dois meios 1,21 1, sd1 (0,2) sd2 (0,2) conhecidos", STATA V.14.0, STATASp, Texas, EUA).

Preparação de extrato de M. sylvestris e colutório:

Para a preparação do enxaguatório bucal de M. sylvestris foram utilizadas as folhas cadastradas no herbário da Universidade de São Paulo (USP). Número de identificação ESA voucher # 121403. As folhas foram secas em estufa de circulação forçada por 24 h, a 40 °C, e posteriormente trituradas. A extração foi realizada com etanol absoluto sob controle climático (25 °C) e submetida a extração exaustiva (7 dias) em agitador rotativo protegido da luz. Na sequência de extração, as amostras foram filtradas, concentradas por evaporação e liofilizadas por 72 h. O EEM foi armazenado a -20 °C. O monitoramento químico foi conduzido pela técnica de HPLC MS/MS (33). O colutório à base de M. sylvestris foi preparado na concentração padrão de 10% utilizando como veículo etanol 1% para preservação dos compostos em concentração compatível com estabilidade morfofuncional (32,33). O colutório controle apresenta o mesmo veículo e composição do anterior, mas é isento do princípio ativo e o colutório CHX foi preparado na concentração de 0,12% com o mesmo veículo como acentuado na concentração de 0,12%.

Registro de índices periodontais:

Antes do ensaio clínico, dois examinadores (E.A e A.N) passaram por um processo de calibração para o registro dos índices clínicos (BPE, índice gengival e registro de controle de placa) com um especialista em periodontia. Para o efeito, foram avaliados 10 doentes do Centro de Clínicas Dentárias da UACh, diagnosticados pelo especialista com índice gengival (IG) superior a 90% e periodontite crónica moderada num dos seus sextantes dentários. Índice kappa interexaminador e intraexaminador de 0,89 e 0,80, respectivamente.

O objetivo e a metodologia do estudo foram explicados aos pacientes que preencheram os critérios de seleção e que já haviam sido diagnosticados anteriormente. Aqueles que concordaram em participar assinaram um termo de consentimento informado.

No dia da consulta, os examinadores confirmaram o cumprimento dos critérios de seleção e anotaram os dados: sexo, idade, hábitos de higiene, doenças sistêmicas, uso de medicamentos e tabagismo.

Em seguida procedeu-se ao exame clínico e foram avaliados os seguintes índices:

• Exame Periodontal Básico (BPE): A boca é dividida em sextantes e usando uma sonda periodontal padronizada pela OMS, a sondagem de cada dente é realizada em 3 pontos (mesial, medial e distal) por vestibular e lingual-palatina de cada dente, registrando o maior valor por sextante, de acordo com a seguinte codificação: 0 (tecido saudável), 1 (sangramento positivo, ausência de bolsa periodontal), 2 (presença de tártaro, obturações defeituosas, área preta da sonda totalmente visível), 3 (presença de bolso maior que 5,5 mm) (35).
• Índice Gengival (GI): Com uma sonda periodontal padronizada pela OMS, as papilas gengival marginal vestibular, lingual e interdental são sondadas, usando uma escala de quatro pontos de 0 (ausência de inflamação) a 3 (inflamação grave) (37,38) .
• Registro de controle de placa (PC): são aplicadas 5 gotas de Solução Reveladora de Placa e o paciente é orientado a realizar movimentos com a língua de forma que toque todas as superfícies dentárias em um tempo de 15 segundos. As superfícies vestibular, lingual e interproximal de todos os dentes são então examinadas. Para calcular o índice, some o número total de superfícies dentárias com placa, divida esse número pelo número total de superfícies presentes na boca e multiplique por 100 (39).

Randomização e uso de bochechos:

A randomização e identificação mascarada dos bochechos foi feita por um único pesquisador (B.B.). Todos os enxaguatórios bucais foram dispensados ​​em um frasco branco de 150 mL e cada conteúdo foi identificado por um marcador de cor diferente conhecido apenas pelo investigador responsável.

Para determinar a randomização de cada paciente dentro dos três grupos, foi utilizada a página www.random.org, sendo retornados como resultado os números 1,2 ou 3 correspondentes aos grupos G1, G2 e G3, respectivamente.

Para isso, os pacientes foram randomizados em 3 grupos de estudo paralelos:

• G1 (Verde): Controle Positivo (0,12% CHX)
• G2 (laranja): Controle negativo (enxágue bucal com álcool 0,1%)
• G3 (Amarelo): Grupo experimental (colutório a 10% de extrato de M. sylvestris). Após o exame clínico, outro pesquisador (V.Ll.) registrava em cada prontuário a codificação do paciente atribuída por número, grupo e cor. Entregou o frasco e a posologia a cada paciente correspondente ao grupo randomizado, devendo fazer bochecho com 10 ml de bochecho por 1 minuto na boca, a cada 12 h durante 7 dias. Para confirmar o seguimento da intervenção, o mesmo pesquisador fez ligações telefônicas pelo menos uma vez ao dia para lembrar o enxágue diário. As instruções foram dadas verbalmente e por escrito.

A reavaliação dos pacientes foi realizada 7 dias após a primeira consulta, pelo mesmo examinador registrando os índices PBE, GI e PC.

Controle de risco de viés:

Os mecanismos de mascaramento por meio da codificação por número, grupo e cor garantiram que os pacientes não conhecessem o enxaguatório específico que recebiam; os examinadores E.A e A.N limitaram-se apenas a avaliar os aspectos clínicos e a análise dos dados foi realizada com o banco de dados por meio de codificação numérica. Apenas o pesquisador B.B tinha conhecimento da atribuição real por cor, com seu correspondente grupo de estudo e número.

Para controlar o risco de viés aleatório nas mudanças de hábitos de higiene dos participantes no registro dos índices periodontais, foi registrada a frequência de escovação, tipo de dentifrício e uso de antissépticos bucais; indicando a cada participante a manutenção desses hábitos sem a necessidade de alterar a frequência da higiene bucal.

Estatisticas:

Grupos de estudo de bochechos foram definidos como uma variável independente. O PC e o GI analisados ​​no início e 7 dias após a intervenção do estudo foram definidos como variável dependente. Foi realizada análise estatística descritiva dos seguintes dados: sexo (masculino/feminino), idade (em anos), frequência de escovação/dia, tabagismo (fuma mais de 10 cigarros/dia), presença de doença crônica (Sim/Não) e consumo de medicamentos (Sim/Não). Além disso, os valores de PC e GI. As variáveis ​​contínuas foram apresentadas como valores médios (Desvio Padrão - DP).

Na estatística analítica, a normalidade dos dados foi analisada pelo teste de Shapiro Wilk (p>0,05). Para comparar os índices entre os 3 grupos antes e depois da intervenção, os dados foram analisados ​​por medidas repetidas ANOVA (MR). Os dados não paramétricos foram apresentados como gráfico de dispersão das amostras, comparação com teste t para detectar diferenças.

Considerando a variabilidade dos dados iniciais dos pacientes pertencentes a cada grupo de estudo que pode gerar um viés de resultado, foi realizada uma análise de covariância (ANCOVA) dos dados basais. Para verificar as hipóteses do estudo, foram comparadas as médias dos valores, com intervalo de confiança de 95% dos resultados entre os grupos de estudo, estabelecendo-se um nível de significância de p < 0,05