Klinické hodnocení ústní vody obsahující extrakt malva sylvestris.

Design:

Je navržena jako randomizovaná klinická studie tří paralelních skupin, trojité maskování. Studie a dokument informovaného souhlasu byly přezkoumány a schváleny Comité Ético Científico ze Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) a napsány v souladu s pokyny pro psaní CONSORT (EQUATOR Network).

Populace:

Účastníci byli vybráni z oddělení ústní a parodontální chirurgie Centra zubní kliniky Universidad Austral de Chile (UACh) (Valdivia, jižní Chile) během měsíců října 2017 až prosince 2018.

Velikost vzorku:

Pro výpočet velikosti vzorku byla uvažována účinnost použití ústní vody CHX oproti placebu, což je standardizovaný průměr ve snížení gingiválního indexu podle parametrů Loe & Silness (1963) 0,21 (95% CI: 0,1-0,31). ) (15). Pravděpodobnost chyby 5 %, statistická síla 80 % a rozpětí ztráty sledování nebo absence dat 20 %. Účast 18 subjektů byla stanovena podle studijní skupiny (algoritmus výpočtu: "moc dva znamená 1,21 1, sd1 (0,2) sd2 (0,2) známých", STATA V.14.0, STATASp, Texas, USA).

Příprava extraktu a ústní vody M. sylvestris:

Pro přípravu ústní vody M. sylvestris byly použity listy registrované v herbáři Univerzity v Sao Paulu (USP). Identifikační číslo voucheru ESA # 121403. Listy byly sušeny v peci s nuceným oběhem po dobu 24 hodin při 40 °C a poté rozdrceny. Extrakce byla provedena absolutním ethanolem pod klimatickou kontrolou (25 °C) a podrobena úplné extrakci (7 dní) v rotační třepačce chráněné před světlem. V extrakční sekvenci byly vzorky filtrovány, koncentrovány odpařováním a lyofilizovány po dobu 72 hodin. EEM byl skladován při -20 °C. Chemické monitorování bylo prováděno technikou HPLC MS/MS (33). Ústní voda na bázi M. sylvestris byla připravena ve standardní koncentraci 10 % za použití 1% ethanolového vehikula pro konzervaci sloučenin v koncentraci kompatibilní s morfofunkční stabilitou (32,33). Kontrolní ústní voda obsahuje stejné vehikulum a složení jako předchozí, ale je vyňata z aktivní sloučeniny a ústní voda CHX byla připravena v koncentraci 0,12 % se stejným vehikulem jako zvýrazněná v koncentraci 0,12 %.

Záznam periodontálních indexů:

Před klinickým hodnocením prošli dva zkoušející (E.A a A.N) kalibračním procesem pro registraci klinických indexů (BPE, gingivální index a záznam kontroly plaku) u specialisty na parodontologii. Za tímto účelem bylo hodnoceno 10 pacientů z Centra stomatologických klinik ÚACh, u kterých specialista diagnostikoval gingivální index (GI) nad 90 % a středně těžkou chronickou parodontitidu v jednom ze zubních sextantů. Index kappa mezi zkoušejícím 0,89 a mezi vyšetřovatelem 0,80.

Pacientům, kteří splnili výběrová kritéria a kteří již byli dříve diagnostikováni, byl vysvětlen cíl a metodika studie. Ti, kteří souhlasili s účastí, podepsali informovaný souhlas.

V den jmenování zkoušející potvrdili splnění výběrových kritérií a zaznamenali údaje: pohlaví, věk, hygienické návyky, systémová onemocnění, užívání drog a kouření.

Poté jsme přistoupili ke klinickému vyšetření a byly vyhodnoceny následující indexy:

• Základní periodontální vyšetření (BPE): Ústa jsou rozdělena na sextanty a pomocí WHO standardizované periodontální sondy je sondování každého zubu provedeno ve 3 bodech (meziální, mediální a distální) vestibulárním a lingválně-palatinálním každého zubu, registrující nejvyšší hodnota na sextant, podle následujícího kódování: 0 (zdravá tkáň), 1 (pozitivní krvácení, absence parodontální kapsy), 2 (přítomnost zubního kamene, defektní výplně, černá plocha sondy zcela viditelná), 3 (parodontální kapsa větší než 5,5 mm) (35).
• Gingivální index (GI): Pomocí WHO standardizované periodontální sondy se sondují bukální, lingvální a interdentální papily marginální gingivální pomocí čtyřbodové škály od 0 (nepřítomnost zánětu) do 3 (těžký zánět) [37,38] .
• Záznam kontroly plaku (PC): Aplikuje se 5 kapek roztoku na odhalování plaku a pacient je instruován, aby prováděl pohyby jazykem tak, aby se dotkl všech zubních ploch během 15 sekund. Poté se vyšetřují vestibulární, lingvální a interproximální plochy všech zubů. Pro výpočet indexu sečtěte celkový počet zubních povrchů s plakem, vydělte toto číslo celkovým počtem povrchů přítomných v ústech a vynásobte 100 (39).

Randomizace a použití ústní vody:

Randomizace a maskovaná identifikace ústních vod byla provedena jediným výzkumníkem (B.B.). Všechny ústní vody byly dávkovány do 150ml bílé lahvičky a každý obsah byl identifikován odlišně barevným markerem známým pouze odpovědnému výzkumníkovi.

K určení randomizace každého pacienta v rámci tří skupin byla použita stránka www.random.org, kde byla jako výsledek vrácena čísla 1, 2 nebo 3 odpovídající skupinám G1, G2 a G3.

Za tímto účelem byli pacienti randomizováni do 3 paralelních studijních skupin:

• G1 (zelená): pozitivní kontrola (0,12 % CHX)
• G2 (oranžová): negativní kontrola (ústní voda s alkoholem 0,1 %)
• G3 (žlutá): Experimentální skupina (10% ústní voda extraktu M. sylvestris). Po klinickém vyšetření další výzkumník (V.Ll.) zaznamenal do každého klinického záznamu kódování pacienta přiřazené číslem, skupinou a barvou. Každému pacientovi, který odpovídá randomizované skupině, dodal lahvičku a dávkování, přičemž musel vyplachovat 10 ml ústní vody po dobu 1 minuty v ústech, každých 12 hodin po dobu 7 dnů. Aby se potvrdilo sledování intervence, stejný výzkumník telefonoval alespoň jednou denně, aby si zapamatoval denní výplach. Pokyny byly doručeny ústně i písemně.

Přehodnocení pacientů bylo provedeno 7 dní po první schůzce stejným vyšetřujícím registrujícím PBE, GI a PC indexy.

Kontrola rizika zkreslení:

Maskovací mechanismy pomocí kódování podle čísla, skupiny a barvy zajistily, že pacienti neznali konkrétní ústní vodu, kterou dostávali; vyšetřující E.A a A.N se omezili pouze na posouzení klinických aspektů a analýza dat byla provedena s databází pomocí číselného kódování. Pouze výzkumník B.B si byl vědom skutečného zadání podle barvy s odpovídající studijní skupinou a číslem.

Pro kontrolu rizika náhodného zkreslení změn hygienických návyků účastníků při evidenci parodontálních indexů byla registrována frekvence čištění zubů, typ zubní pasty a používání ústních antiseptických ústních vod; indikující každému účastníkovi, aby tyto návyky zachoval, aniž by musel měnit frekvenci ústní hygieny.

Statistika:

Studijní skupiny ústní vody byly definovány jako nezávislá proměnná. PC a GI analyzované na začátku a 7 dní po intervenci studie byly definovány jako závislé proměnné. Byla provedena analýza popisné statistiky následujících údajů: pohlaví (muž/žena), věk (v letech), frekvence čištění zubů/den, kouření (kouří více než 10 cigaret/den), přítomnost chronického onemocnění (ano/ne) a užívání léků (Ano/Ne). Navíc hodnoty PC a GI. Spojité proměnné byly prezentovány jako průměrné hodnoty (Standard Deviation - SD).

V analytické statistice byla normalita dat analyzována Shapiro Wilk testem (p> 0,05). Pro srovnání indexů mezi 3 skupinami před a po intervenci byla data analyzována opakovaným měřením ANOVA (MR). Neparametrická data byla prezentována jako bodový graf vzorků, srovnání s T-testem pro detekci rozdílů.

S ohledem na variabilitu počátečních dat pacientů patřících do každé studijní skupiny, která může generovat zkreslení výsledku, byla provedena analýza kovariance (ANCOVA) výchozích dat. Pro ověření hypotéz studie byly porovnány průměrné hodnoty s 95% intervalem spolehlivosti výsledků mezi studijními skupinami, čímž byla stanovena hladina významnosti p < 0,05