Evaluación clínica de un enjuague bucal que contiene extracto de Malva Sylvestris.

Diseño:

Se diseña un ensayo clínico aleatorizado de tres grupos paralelos, triple enmascaramiento. El estudio y el documento de consentimiento informado fueron revisados ​​y aprobados por el Comité Ético Científico del Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) y redactados de acuerdo con las normas de redacción CONSORT (Red EQUATOR).

Población:

Los participantes fueron seleccionados del Departamento de Cirugía Oral y Periodontal del Centro de Clínica Odontológica de la Universidad Austral de Chile (UACh) (Valdivia, sur de Chile) durante los meses de octubre de 2017 a diciembre de 2018.

Tamaño de la muestra:

Para el cálculo del tamaño de la muestra se consideró la efectividad del uso del colutorio CHX frente al placebo, media estandarizada en la reducción del índice gingival según Loe & Silness (1963) parámetros de 0,21 (IC 95%: 0,1-0,31). ) (15). Probabilidad de error del 5%, potencia estadística del 80% y margen de pérdida de seguimiento o ausencia de datos del 20%. La participación de 18 sujetos se determinó por grupo de estudio (algoritmo de cálculo: "potencia dos medias 1,21 1, sd1 (0,2) sd2 (0,2) conocidos", STATA V.14.0, STATASp, Texas, EE. UU.).

Preparación del extracto y enjuague bucal de M. sylvestris:

Para la preparación del enjuague bucal de M. sylvestris, se utilizaron las hojas registradas en el herbario de la Universidad de São Paulo (USP). Número de identificación Vale ESA # 121403. Las hojas se secaron en estufa de circulación forzada durante 24 h, a 40 °C, y luego se trituraron. La extracción se realizó con etanol absoluto bajo control climático (25 °C) y se sometió a extracción exhaustiva (7 días) en un agitador rotatorio protegido de la luz. En la secuencia de extracción, las muestras fueron filtradas, concentradas por evaporación y liofilizadas durante 72 h. El EEM se almacenó a -20 °C. El seguimiento químico se realizó mediante la técnica HPLC MS/MS (33). El enjuague bucal a base de M. sylvestris se preparó a una concentración estándar del 10% utilizando un vehículo de etanol al 1% para la conservación de los compuestos a una concentración compatible con la estabilidad morfofuncional (32,33). El colutorio control presenta el mismo vehículo y composición que el anterior pero está exento de principio activo y el colutorio CHX se preparó a una concentración de 0,12% con el mismo vehículo como acentuado a una concentración de 0,12%.

Registro de índices periodontales:

Previo al ensayo clínico, dos examinadores (E.A y A.N) se sometieron a un proceso de calibración para el registro de índices clínicos (BPE, índice gingival y registro de control de placa) con un especialista en periodoncia. Para ello se evaluaron 10 pacientes del Centro de Clínicas Odontológicas de la UACh, diagnosticados por el especialista con índice gingival (IG) superior al 90% y periodontitis crónica moderada en uno de sus sextantes dentales. Índice kappa interexaminador e intraexaminador de 0,89 y 0,80, respectivamente.

Se explicó el objetivo y la metodología del estudio a los pacientes que cumplían los criterios de selección y que ya habían sido previamente diagnosticados. Quienes aceptaron participar, firmaron un documento de consentimiento informado.

El día de la cita, los examinadores, confirmaron el cumplimiento de los criterios de selección y registraron los datos: sexo, edad, hábitos de higiene, enfermedades sistémicas, uso de drogas y tabaquismo.

Luego se procedió al examen clínico y se evaluaron los siguientes índices:

• Examen Periodontal Básico (BPE): Se divide la boca en sextantes y utilizando una sonda periodontal estandarizada por la OMS, se realiza el sondaje de cada diente en 3 puntos (mesial, medial y distal) por vestibular y lingual-palatino de cada diente, registrando el mayor valor por sextante, según la siguiente codificación: 0 (tejido sano), 1 (sangrado positivo, ausencia de bolsa periodontal), 2 (presencia de sarro, obturaciones defectuosas, zona negra de la sonda completamente visible), 3 (sangrado periodontal bolsillo mayor de 5,5 mm) (35).
• Índice Gingival (GI): Con una sonda periodontal estandarizada por la OMS, se sondean las papilas gingivales marginales bucales, linguales e interdentales, utilizando una escala de cuatro puntos de 0 (ausencia de inflamación) a 3 (inflamación severa) (37,38) .
• Registro de control de placa (PC): Se aplican 5 gotas de Solución Reveladora de Placa y se instruye al paciente para que realice movimientos con la lengua de manera que toque todas las superficies dentales en un tiempo de 15 segundos. Luego se examinan las superficies vestibular, lingual e interproximal de todos los dientes. Para calcular el índice, sume el número total de superficies dentales con placa, divida este número por el número total de superficies presentes en la boca y multiplique por 100 (39).

Aleatorización y uso de enjuague bucal:

La aleatorización e identificación enmascarada de los enjuagues bucales fue realizada por un único investigador (B.B.). Todos los enjuagues bucales se dispensaron en un vial blanco de 150 ml y cada contenido se identificó con un marcador de color diferente conocido solo por el investigador a cargo.

Para determinar la aleatorización de cada paciente dentro de los tres grupos se utilizó la página www.random.org, devolviendo como resultado los números 1, 2 ó 3 correspondientes a los grupos G1, G2 y G3, respectivamente.

Para ello, los pacientes fueron aleatorizados en 3 grupos de estudio paralelos:

• G1 (Verde): Control Positivo (0.12% CHX)
• G2 (Naranja): Control negativo (colutorio vehículo alcohol 0,1%)
• G3 (Amarillo): Grupo experimental (colutorio al 10% de extracto de M. sylvestris). Luego del examen clínico, otro investigador (V.Ll.) registró en cada ficha clínica la codificación del paciente asignada por número, grupo y color. Entregó el frasco y la posología a cada paciente correspondiente al grupo aleatorizado, debiendo enjuagar con 10 ml de colutorio durante 1 minuto en la boca, cada 12 h durante 7 días. Para confirmar el seguimiento de la intervención, el mismo investigador realizó llamadas telefónicas al menos una vez al día para recordar el enjuague diario. Las instrucciones fueron entregadas verbalmente y por escrito.

La reevaluación de los pacientes se realizó 7 días después de la primera cita, por el mismo examinador registrando los índices PBE, GI y PC.

Control del riesgo de sesgo:

Los mecanismos de enmascaramiento a través de la codificación por número, grupo y color, aseguraron que los pacientes no supieran el enjuague bucal específico que recibieron; los examinadores E.A y A.N se limitaron solo a evaluar aspectos clínicos y el análisis de datos se realizó con la base de datos mediante codificación numérica. Únicamente el investigador B.B conocía la asignación real por color, con su correspondiente grupo de estudio y número.

Para controlar el riesgo de sesgo aleatorio en los cambios de hábitos de higiene de los participantes sobre el registro de los índices periodontales, se registró la frecuencia de cepillado, tipo de dentífrico y uso de colutorios antisépticos orales; indicando a cada participante que mantenga estos hábitos sin necesidad de cambiar la frecuencia de higiene bucal.

Estadísticas:

Los grupos de estudio de enjuague bucal se definieron como una variable independiente. Se definió como variable dependiente la PC y el GI analizados al inicio y 7 días después de la intervención del estudio. Se realizó un análisis de estadística descriptiva de los siguientes datos: sexo (masculino/femenino), edad (en años), frecuencia de cepillado/día, tabaquismo (fuma más de 10 cigarrillos/día), presencia de enfermedad crónica (Sí/No) y consumo de medicamentos (Sí/No). Además, los valores de PC y GI. Las variables continuas se presentaron como valores promedio (Desviación Estándar - DE).

En la estadística analítica se analizó la normalidad de los datos mediante la prueba de Shapiro Wilk (p > 0,05). Para comparar los índices entre los 3 grupos antes y después de la intervención, los datos se analizaron mediante medidas repetidas ANOVA (MR). Los datos no paramétricos se presentaron como diagrama de dispersión de las muestras, comparación con la prueba T para detectar diferencias.

Considerando la variabilidad de los datos iniciales de los pacientes pertenecientes a cada grupo de estudio que pueden generar un sesgo en los resultados, se realizó un análisis de covarianza (ANCOVA) de los datos basales. Para comprobar las hipótesis del estudio se compararon los valores medios, con un intervalo de confianza del 95% de los resultados entre los grupos de estudio, estableciéndose un nivel de significación de p < 0,05