Klinisk evaluering av et munnvann som inneholder Malva Sylvestris-ekstrakt.

Design:

Det er designet en randomisert klinisk studie av tre parallelle grupper, trippel maskering. Studien og informert samtykkedokument ble gjennomgått og godkjent av Comité Ético Científico av Servicio de Salud Valdivia (ORD 181/2017) og skrevet i henhold til CONSORT (EQUATOR Network) skriveretningslinjer.

Befolkning:

Deltakerne ble valgt ut fra avdelingen for oral og periodontal kirurgi ved Tannklinikken ved Universidad Austral de Chile (UACh) (Valdivia, sørlige Chile) i løpet av månedene oktober 2017 til desember 2018.

Eksempelstørrelse:

For beregning av prøvestørrelsen ble effektiviteten av bruken av CHX munnvann vurdert fremfor placebo, et standardisert gjennomsnitt i reduksjonen av gingivalindeksen i henhold til Loe & Silness (1963) parametere på 0,21 (95 % KI: 0,1-0,31) ) (15). Sannsynlighet for feil på 5 %, statistisk styrke på 80 % og margin for tap av oppfølging eller fravær av data på 20 %. Deltakelsen til 18 forsøkspersoner ble bestemt av studiegruppen (beregningsalgoritme: "power two betyr 1,21 1, sd1 (0,2) sd2 (0,2) kjente", STATA V.14.0, STATASp, Texas, USA).

Tilberedning av M. sylvestris ekstrakt og munnvann:

For tilberedning av munnvannet til M. sylvestris ble bladene registrert i herbariet til University of Sao Paulo (USP) brukt. Identifikasjonsnummer ESA-kupong # 121403. Bladene ble tørket i en tvungen sirkulasjonsovn i 24 timer, ved 40 °C, og deretter knust. Ekstraksjonen ble utført med absolutt etanol under klimatisk kontroll (25 °C) og utsatt for uttømmende ekstraksjon (7 dager) i en roterende shaker beskyttet mot lys. I ekstraksjonssekvensen ble prøvene filtrert, konsentrert ved fordampning og lyofilisert i 72 timer. EEM ble lagret ved -20 °C. Den kjemiske overvåkingen ble utført ved HPLC MS/MS-teknikk (33). Munnvannet basert på M. sylvestris ble fremstilt ved en standardkonsentrasjon på 10 % ved bruk av en 1 % etanolbærer for konservering av forbindelser ved en konsentrasjon som er forenlig med morfofunksjonell stabilitet (32,33). Kontrollmunnvannet har samme bærer og sammensetning som den forrige, men er unntatt fra den aktive forbindelsen, og CHX-munnvannet ble fremstilt i en konsentrasjon på 0,12 % med samme bærer som en aksentuert ved en konsentrasjon på 0,12 %.

Periodontale indekser viser:

I forkant av den kliniske utprøvingen har to sensorer (E.A og A.N) gjennomgått en kalibreringsprosess for registrering av kliniske indekser (BPE, gingivalindeks og plakkkontrolljournal) hos spesialist i periodonti. For dette formål ble 10 pasienter fra Center of Dental Clinics of the UACh evaluert, diagnostisert av spesialisten med gingivalindeks (GI) over 90 % og moderat kronisk periodontitt i en av deres dentale sekstanter. Intereksaminator og intra-eksaminator kappa-indeks på henholdsvis 0,89 og 0,80.

Målet og metodikken for studien ble forklart til pasientene som oppfylte seleksjonskriteriene og som allerede hadde fått diagnosen tidligere. De som takket ja til å delta, signerte et informert samtykkedokument.

På oppnevningsdagen bekreftet sensorene oppfyllelsen av utvelgelseskriteriene og registrerte dataene: kjønn, alder, hygienevaner, systemiske sykdommer, bruk av rusmidler og røyking.

Deretter gikk vi videre til den kliniske undersøkelsen og følgende indekser ble evaluert:

• Grunnleggende periodontal undersøkelse (BPE): Munnen deles inn i sekstanter og ved hjelp av en WHO-standardisert periodontal probe utføres sonderingen av hver tann i 3 punkter (mesial, medial og distal) av vestibulær og lingual-palatal av hver tann, og registrerer den høyeste verdien per sekstant, i henhold til følgende koding: 0 (sunt vev), 1 (positiv blødning, fravær av periodontal lomme), 2 (tilstedeværelse av tannstein, defekte fyllinger, svart område av sonden helt synlig), 3 (periodontal) lomme større enn 5,5 mm) (35).
• Gingival Index (GI): Med en WHO-standardisert periodontal probe undersøkes den bukkale, linguale og interdentale papiller marginal gingival, ved hjelp av en firepunkts skala fra 0 (fravær av betennelse) til 3 (alvorlig betennelse) (37,38) .
• Plaque control record (PC): 5 dråper Plaque Revealing Solution påføres, og pasienten instrueres om å gjøre bevegelser med tungen på en slik måte at den berører alle tannoverflater i løpet av 15 sekunder. De vestibulære, linguale og interproksimale overflatene på alle tennene undersøkes deretter. For å beregne indeksen, legg til det totale antallet tannoverflater med plakk, del dette tallet på det totale antallet overflater i munnen og gang med 100 (39).

Randomisering og bruk av munnvann:

Randomiseringen og maskert identifikasjon av munnvannene ble gjort av en enkelt forsker (B.B.). Alle munnvann ble dispensert i et 150 ml hvitt hetteglass, og hvert innhold ble identifisert med en forskjellig farget markør kjent bare for den ansvarlige etterforskeren.

For å bestemme randomiseringen av hver pasient innenfor de tre gruppene, ble siden www.random.org brukt, hvor tallene 1,2 eller 3 som tilsvarer henholdsvis gruppene G1, G2 og G3 ble returnert som et resultat.

For dette ble pasientene randomisert inn i 3 parallelle studiegrupper:

• G1 (grønn): positiv kontroll (0,12 % CHX)
• G2 (oransje): Negativ kontroll (munnvann med alkohol 0,1 %)
• G3 (Gul): Eksperimentell gruppe (10 % munnvann av M. sylvestris-ekstrakt). Etter den kliniske undersøkelsen registrerte en annen forsker (V.Ll.) i hver klinisk journal pasientens koding tildelt etter nummer, gruppe og farge. Han leverte flasken og doseringen til hver pasient tilsvarende den randomiserte gruppen, og måtte skylle med 10 ml munnvann i 1 minutt i munnen, hver 12. time i 7 dager. For å bekrefte oppfølgingen av intervensjonen ringte den samme forskeren minst én gang om dagen for å huske den daglige skyllingen. Instruksjonene ble levert muntlig og skriftlig.

Reevalueringen av pasientene ble utført 7 dager etter første avtale, av samme undersøker som registrerte PBE-, GI- og PC-indeksene.

Kontroll av risiko for skjevhet:

Maskeringsmekanismene gjennom koding etter antall, gruppe og farge, sørget for at pasientene ikke kjente til det spesifikke munnvannet de fikk; Undersøkerne E.A og A.N var begrenset til å vurdere kliniske aspekter og dataanalyse ble utført med databasen ved bruk av numerisk koding. Bare forsker B.B var klar over den virkelige tildelingen etter farge, med tilhørende studiegruppe og nummer.

For å kontrollere risikoen for tilfeldig skjevhet i endringene i hygienevanene til deltakerne ved registrering av periodontale indekser, ble hyppigheten av børsting, type tannkrem og bruk av orale antiseptiske munnskyll registrert; indikerer til hver deltaker å opprettholde disse vanene uten å måtte endre munnhygienefrekvensen.

Statistikk:

Studiegrupper for munnvann ble definert som en uavhengig variabel. PC og GI analysert i begynnelsen og 7 dager etter intervensjonen av studien ble definert som avhengig variabel. En analyse av beskrivende statistikk for følgende data ble utført: kjønn (mann/kvinnelig), alder (i år), hyppighet av børsting/dag, røyking (røyker over 10 sigaretter/dag), tilstedeværelse av kronisk sykdom (Ja/Nei) og medisinforbruk (Ja/Nei). I tillegg kommer verdiene til PC og GI. De kontinuerlige variablene ble presentert som gjennomsnittsverdier (Standard Deviation - SD).

I den analytiske statistikken ble normaliteten til dataene analysert ved Shapiro Wilk-testen (p> 0,05). For å sammenligne indeksene mellom de 3 gruppene før og etter intervensjonen, ble dataene analysert med gjentatte mål ANOVA (MR). De ikke-parametriske dataene ble presentert som spredningsplott av prøvene, sammenligning med T-test for å oppdage forskjeller.

Tatt i betraktning variabiliteten av de innledende dataene til pasientene som tilhører hver studiegruppe som kan generere en resultatskjevhet, ble det utført en analyse av kovarians (ANCOVA) av grunnlinjedataene. For å sjekke studiehypotesene ble gjennomsnittsverdiene sammenlignet, med et 95 % konfidensintervall av resultatene mellom studiegruppene, og etablerte et signifikansnivå på p <0,05