タンパク質翻訳と細胞ストレスに対するアミノアシル tRNA 合成酵素の変異の影響 (FIBROMARS)
細胞質アミノアシル tRNA シンテターゼをコードする遺伝子の機能喪失変異がタンパク質翻訳および細胞ストレスへの応答に及ぼす影響
サイトゾル アミノアシル tRNA シンテターゼをコードする遺伝子の変異は、さまざまな程度の間質性肺疾患、肝障害、神経障害、消化器障害、全身性炎症など、早期発症の多臓器性疾患の原因となります。 これらは、病態生理学がよくわかっていない、まれで重篤な疾患です。
調査チームは、これらの遺伝子内の突然変異がタンパク質翻訳の減少の原因であり、アミノ酸欠乏によって誘発されるものと同様の細胞ストレス反応を引き起こすという仮説を立てています. 調査チームはまた、これらの変化は、対応するアミノ酸の培地への高用量補充によって修正できるという仮説を立てています.
この研究の主な目的は、細胞質アミノアシル tRNA 合成酵素変異がタンパク質翻訳に及ぼす影響を細胞レベルで正確に判断することです。
調査の概要
状態
介入・治療
詳細な説明
サイトゾル アミノアシル tRNA 合成酵素をコードする遺伝子の変異は、間質性肺疾患、肝障害、神経障害、消化器障害、全身性炎症など、早期発症の多臓器性疾患の原因となります。 これらは、病態生理学がよくわかっていない、まれで重篤な疾患です。
調査チームは、これらの遺伝子内の突然変異がタンパク質翻訳の減少の原因であり、アミノ酸欠乏によって誘発されるものと同様の細胞ストレス反応を引き起こすという仮説を立てています. 調査チームはまた、これらの変化は、対応するアミノ酸の培地への高用量補充によって修正できるという仮説を立てています.
この研究の主な目的は、細胞質アミノアシル tRNA 合成酵素変異がタンパク質翻訳に及ぼす影響を細胞レベルで正確に判断することです。
以下のパラメーターは、患者の皮膚生検および新生児および成人からの市販のヒト皮膚線維芽細胞からの細胞培養で in vitro で研究されます。
- 総タンパク質含有量の決定
- d-メチオニン、ロイシン、チロシンまたはフェニルアラニンのタンパク質への取り込み
- ポリソームプロファイリングの研究
- リボソーム 43S 開始前複合体の集合に関する研究
- eIF2αと4EBPのリン酸化とATF4の発現
- リボソームプロファイリング
- トランスファー RNA (tRNA) シーケンス
- 活性酸素種（ROS）の生成
これらの研究の結果を比較します。
- 患者細胞と対照細胞の間
- 遺伝的に修正された患者細胞間で、当該遺伝子の野生型cDNAと未修正細胞の安定したトランスフェクションによる
- メチオニン、フェニルアラニン、チロシンまたはロイシンで強化された培地で培養された患者細胞と、標準培地で培養された細胞との間。
研究の種類
入学 (推定)
段階
- 適用できない
連絡先と場所
研究連絡先
- 名前：Alice HADCHOUEL, MD, PhD
- 電話番号：+33 1 44 49 48 47
- メール：alice.hadchouel-duverge@aphp.fr
研究連絡先のバックアップ
- 名前：Hélène Morel
- 電話番号：+33 1 71 19 63 46
- メール：helene.morel@aphp.fr
研究場所
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Paris、フランス、75015
- Hôpital Necker-Enfants malades
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コンタクト：
- Alice HADCHOUEL, MD, PhD
- 電話番号：+33 1 44 49 48 47
- メール：alice.hadchouel-duverge@aphp.fr
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 子
- 大人
- 高齢者
健康ボランティアの受け入れ
説明
包含基準:
- -多全身性表現型の原因となる MARS1、LARS1、YARS1、または FARSA 遺伝子に変異を有する患者
- 成人の場合は患者本人、未成年の患者の場合は親権者、未成年の患者の情報と同意
除外基準:
- 親権者または未成年の患者または成人患者の同意のない患者
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：基礎科学
- 割り当て：なし
- 介入モデル：単一グループの割り当て
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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実験的：患者
サイトゾルのアミノアシルtRNA合成酵素をコードする遺伝子に変異があり、ネッカー病院で治療を受けた患者。
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患者の年齢と希望に応じて、前腕または太ももに皮膚生検を行い、子供の年齢に応じて直径 3 ～ 4 mm の生検パンチを使用します (3 歳未満の子供は 3 回、それ以上の子供は 4 回)。 線維芽細胞の培養と不死化。 |
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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総タンパク質含有量の決定
時間枠：0日目
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ビシンコニン酸アッセイによる総タンパク質含有量の決定。
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0日目
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タンパク質へのd-メチオニンとd-フェニルアラニンの取り込み
時間枠：0日目
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すぐに使えるキットを使用した標識アミノ酸蛍光アッセイによるメチオニンとフェニルアラニンの取り込み。
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0日目
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ポリソームプロファイリングの研究
時間枠：0日目
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ショ糖勾配での示差沈降によるポリソームプロファイルの研究。
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0日目
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リボソーム 43S 開始前複合体の集合に関する研究
時間枠：0日目
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共免疫沈降実験によるリボソーム 43S 開始前複合体の構築の研究。
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0日目
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EIF2αと4EBPのリン酸化とATF4の発現
時間枠：0日目
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ウエスタンブロットによるeIF2αおよび4EBPのリン酸化とATF4の発現。
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0日目
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リボソームプロファイリング
時間枠：0日目
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ハイスループットシーケンシングによるリボソームプロファイリング。
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0日目
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トランスファー RNA (tRNA) シーケンス
時間枠：0日目
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ハイスループット シーケンスによる転送 RNA (tRNA) シーケンス。
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0日目
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活性酸素種（ROS）の生成
時間枠：0日目
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細胞を 2',7'-ジクロロジヒドロフルオレセイン ジアセテート (H2DCFDA) とインキュベートした後の蛍光測定による活性酸素種 (ROS) の生成。
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0日目
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協力者と研究者
捜査官
- 主任研究者：Alice HADCHOUEL, MD, PhD、Assistance Publique - Hôpitaux de Paris
- スタディディレクター：Isabelle SERMET-GAUDELUS, MD, PhD、Assistance Publique - Hôpitaux de Paris
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (推定)
一次修了 (推定)
研究の完了 (推定)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
その他の研究ID番号
- APHP220276
- 2022-A00061-42 (その他の識別子：ID-RCB number)
個々の参加者データ (IPD) の計画
個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。
皮膚生検の臨床試験
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Aquyre Bioscience, IncBoston University; Fox Chase Cancer Center; Johnson & Johnson募集
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ArjohuntleighMagellan Medical Technology Consultants, Inc.わからない
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University of Rome Tor Vergata完了
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University of BirminghamUniversity College, London; National Institute for Health Research, United Kingdom募集