気管支喘息の有無にかかわらず鼻ポリープを有する患者におけるメポリズマブ治療に対する反応のバイオマーカー (CALIOPI)

仮説 気道リモデリング、炎症細胞、およびその他のバイオマーカーに関する気管支喘息の有無にかかわらず、鼻ポリープを伴う慢性副鼻腔炎患者におけるメポリズマブ治療に対する応答者および非応答者の病理学的および臨床的特徴の同定。

目標/エンドポイント

この調査の主な目的は次のとおりです。

1. 治療開始前のベースライン時およびメポリズマブ治療の 156 週間後の気道のさまざまな解剖学的位置 (鼻、気管支) における気道リモデリングの評価。
2. メポリズマブ治療への応答者および非応答者におけるさまざまな場所 (鼻、咽頭、気管支) のマイクロバイオームにおける任意の特徴の同定。

この研究の主な副次的な目的は次のとおりです。

1. メポリズマブ治療の 152 週間後に、メポリズマブに対する非応答者と応答者を識別するための、組織および分泌物サンプル中の気道のさまざまな解剖学的位置の選択された炎症性バイオマーカーの組み合わせ。

2. 気道リモデリング、炎症細胞、炎症のバイオマーカーおよび臨床的特徴を考慮して、52週間の治療後に手術を必要とする患者を減らすことにより、気管支喘息の有無にかかわらず鼻ポリープを有する患者におけるメポリズマブ治療の効果を実証すること。

   その他の目的/エンドポイント 気管支喘息の有無にかかわらず、鼻ポリープを有する患者におけるメポリズマブ治療中の、喘息コントロールおよび睡眠の質を含む患者の生活の質における呼吸パラメータの改善。

   52週間の治療後および156週間の治療後の統合された気道疾患としての鼻ポリープおよび気管支喘息を考慮した応答の可能なバイオマーカー。

   156 週間のメポリズマブ投与に対する患者のコンプライアンスの特徴付け。

   研究デザインと方法 ギリシアの人口をカバーする各サイトの気管支喘息および耳鼻咽喉科の外来診療所から患者を収集するフェーズ IV 研究。 Covid-19 のパンデミックに関する未知の状況のた​​め、この臨床研究が私たちの診療所の作業負荷を妨げないことを前提としています。

   全体として、これは 7 つの診療所を含む前向き多施設研究です。 この研究には、適格性を評価し、書面によるインフォームドコンセントを取得するための最大2週間のスクリーニング期間と、156週間のメポリズマブ治療期間が含まれます。

   サンプリング方法、被験者数およびタイムライン 研究集団 研究集団は、18 歳以上の 3 年間メポリズマブを投与されている気管支喘息の有無にかかわらず、鼻ポリポーシスの約 57 人の患者で構成されます (子供はいません)。 鼻副鼻腔炎および鼻ポリープに関するヨーロッパのポジションペーパーに従って、喘息を伴うまたは伴わない鼻ポリープ患者の臨床評価が行われます。 さらに、メポリズマブ以外の患者の標準治療には、ICS、抗ヒスタミン薬、または LTRA が含まれる場合があります。

   目標登録 目標サンプル サイズは、57 人の患者が最小サンプル サイズであり、g パワー分析から網状基底膜の厚さを計算したことに基づいて計算されました (サンプル サイズの計算の段落で説明されているように)。 展望研究中に患者が離脱する可能性がある場合に、結果の妥当性を確保するために、さらに 5% を追加します。

   研究への参加、評価、フォローアップ:

   バイタルサインは、スクリーニング訪問時、ベースライン時、および3か月ごとのサイト訪問時に実行されます。 測定には、収縮期および拡張期血圧、脈拍数、体温が含まれます。

   センチメートル（cm）単位の身長とキログラム（kg）単位の体重は、スクリーニング訪問時に測定されます。 体格指数 (BMI) は、体重 (kg) を身長 (m) の 2 乗で割って計算されます。

   検査室評価（血液学、血液化学、尿検査）には静脈血が含まれ、尿はベースラインで収集されます。 女性被験者の尿の収集も妊娠を評価します。 IgEレベルは、immunoCAPテストを使用してスクリーニング訪問時に評価され、IU / mLとして報告されます。

   アンケート 以下が実施される：１）現在の喘息コントロールを評価するための喘息コントロールアンケート（ＡＣＱ－５）および喘息コントロールテスト（ＡＣＴ）。 2) 喘息の生活の質に関する質問票 (AQLQ+12) を使用して、生活の質と心理的罹患率を評価します。 睡眠の質をさらに評価するには、1) Athens Insomnia Scale (AIS)、2) Epworth Sleepiness Scale (ESS)、3) St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ)、4) WHO (Five) Well-Being Index (WHO-5)、 5) Fatigue Severity Scale (FSS)、6) Visual Analogue Scale (VAS) スコア、7) SinoNasal Outcome Test (SNOT-22) スコア、8) University of Pennsylvania Smell Identification Test (UPSIT) スコア。

   FeNO 吐き出された一酸化窒素 (NO) は、ベースライン時および 6 か月ごとに、米国胸部学会のガイドラインに従って、製造元の指定に従って測定されます。 FeNO レベルは、10 億分の 1 単位で報告されます。 スパイロメトリーを行う前に測定を行います。

   血中好酸球レベル 静脈血サンプルは、メポリズマブ治療による 156 週間の期間中、ベースライン時および 3 か月ごとに午前 8 時から 10 時の間に取得されます。 絶対血中好酸球数は、細胞/μlとして報告されます。

   スパイロメトリ スパイロメトリは、表 1 に指定されている訪問時 (ベースラインおよび 3 か月ごと) にサイト独自の機器を使用して実施されます。 すべての診療所への訪問は午前中に行う必要があります。 治療期間中、スパイロメトリーは現在の ATS/ERS ガイドラインを満たし、スパイロメーターは生成されたすべてのデータのプリントアウトを作成する必要があり、被験者のメモに保存する必要があります。 スパイロメーターは、メーカーの指示に従って校正されます。 スパイロメトリーは、Visit 0 のスパイロメトリーと同時に (±1 時間) 実行する必要があります。 可能であれば、被験者は短時間作用型ベータ 2 アゴニスト (SABA) を 4 時間以上、LABA を 15 時間以上控えるようにしてください (GINA 2019)。 記録される評価には、FEV1、FVC、FEV1/FVC%、PEF、および FEF25-75 が含まれます。 200～400mcgのアルブテロールまたは同等のものを使用して、気管支拡張薬後の測定値を来院ごとに取得します。

   インパルスオシロメトリー インパルスオシロメトリー（IOS）は、ベースライン、52週間の治療後、および156週間の治療後に実施されます。

   Lund Mackay スコア Lund-Mackay コンピューター断層撮影 (CT) スコアは、表 1 に指定されている 52 および 156 週間の治療後に、ベースラインで CT 洞によって評価されます。術前およびフォローアップ CT 洞は、CRS 患者の臨床診療で標準として使用されます。治験依頼者の国での治療費（放射線量約 50mGy）。 Lund-Mackay CT 病期分類は、2 人の異なる臨床医によって盲目的に評価されます。

   ピーク鼻吸気流 (PNIF) PNIF は、ベースライン時および 156 週間の治療まで 6 か月ごとに適用されます。 PNIF は、Olympus ENF タイプ P4 ファイバースコープと Clement Clark International Limited モデルの IN-CHECK ORAL ATM デバイスを使用して評価されます。

   前鼻圧測定 前鼻圧測定は、鼻圧測定システム PDD-301/sr によるベースライン時および 156 週間の治療まで 6 か月ごとに実施されます。

   生物製剤による治療 スクリーニング訪問が完了すると、参加者は 1 か月以内に生物製剤（メポリズマブ）による治療を開始できます。 治療中、被験者は、研究に参加するために研究グループに紹介した呼吸器専門医の管理下に置かれます。 これらの呼吸器専門医は、「準呼吸器専門医」と呼ばれます。 治療は製品メーカーの指示に従って提供されます。

   研究中に生物学的治療を提供する呼吸器専門医と耳鼻科医は、プロトコルに従って研究を実施するための同意書に署名し、彼/彼女が医療行為と研究の実施に責任があることを認め、アソシエイト (および研究の実施を支援する同僚および従業員）は、彼らの義務について通知されます。

   準スタッフが研究全体を通して研究グループから適切な情報とサポートを受けられるようにするためのメカニズムが整備されます。

   生物学的療法中のフォローアップ: 開始時および生物学的療法の投与のためのすべての来院時に、情報収集 (表 1 を参照) は、准呼吸器専門医によって行われます。または対面での接触により、患者にインタビューします。 さらに、コンプライアンスは、患者の口頭確認に基づいて医師から記録されます。 薬物投与の日付形式は、訪問ごとに記録され、即時および遅延の副作用も記録されます。

   安全性モニタリング 記録された有害事象（AE）は、調査報告書で必要に応じて監視および照合されます。

   有害事象 有害事象とは、試験への登録開始後に発生する望ましくない徴候、症状、または病状の出現または悪化です。 治験薬の開始前に存在した病状/疾患は、治験薬の開始後に悪化した場合にのみ有害事象と見なされます。 異常な臨床検査値または検査結果は、それらが臨床徴候または症状を誘発する場合、臨床的に重要であると見なされる場合、または治療を必要とする場合にのみ、有害事象と見なされます。 また、Covid-19 に関連する有害事象も含まれています。 パートナーの呼吸器専門医または研究スタッフが製品に関連する AE に気付いた場合、自発 AE 報告に関する現地の標準的な慣行に従って製造業者に報告することができます。 報告書のコピーも研究コーディネーターに送付する必要があります。 重篤な有害事象 (SAE) は eCRF ページで報告され、24 時間以内にすべての研究者がテッサロニキの中央委員会に通知する責任があります。 その後、中央委員会は科学委員会とギリシャの医療機関に通知します。 また、被験者が治療を中止すべきかどうかを決定する際には、中央委員会とともに各センターの研究責任者が医学的および科学的判断を下します。

   独立データ監視委員会/データおよび安全監視委員会 (IDMC/ DSMB) は、テッサロニキ (中央委員会) の中央研究員です。 プロトコル評価の監視を成功させるために、IDMC/DSMB は含まれるすべてのサイトに毎月電話をかける予定です。

   Konstantinos Porpodis - 主任研究員 (テッサロニキのアリストテレス大学、ジョージ パパニコロウ病院、テッサロニキの呼吸器部門の准教授)、Kalliopi Domvri - テッサロニキのアリストテレス大学医学部、組織学 - 発生学研究室、臨床研究アソシエイト - 研究マネージャー - サブ研究員.

   妊娠報告 最初に、スクリーニングの女性患者は妊娠検査を行う必要があります。 治療中に女性被験者が妊娠を報告した場合、研究を中止するよう求められます (バイアスを防ぐため)。各センターの外来診療所。

   事前スクリーニングおよびスクリーニングの失敗 被験者には、同意書に署名した時点で研究番号が割り当てられます。 署名したが、スクリーニング訪問評価に進まない被験者は、事前スクリーニング不合格と見なされます。 これらのサブジェクトのデータはデータベースにキャプチャされません。

   2回のスクリーニング訪問のうち少なくとも1回は完了するが、生物学的療法を開始しない被験者は、スクリーニング失敗として指定されます。

   事前スクリーニングおよびスクリーニング失敗のために収集される情報は、データベースの完成で詳述されます。

   離脱訪問 参加者がフォローアップ中に研究から撤退することを決定した場合 (フォローアップの喪失以外の理由で)、参加者は離脱訪問に出席するよう求められる場合があります (研究者が必要とみなし、同意が必要な場合)。 訪問中、参加者は、喘息や鼻の症状、増悪、受けている治療の進行など、臨床情報収集の一環として現在の状態について質問される場合があります。

   血液サンプルの収集と処理 血液サンプルは、ベースライン訪問時、6 か月時、および治療完了後に収集されます。

   誘発喀痰誘発喀痰は、誘発喀痰処理に関する詳細な専門家コンセンサスに基づく推奨事項が提案されているERSタスクフォースレポートに従って、治療開始前のベースラインで、および52週間および156週間の治療後に実施されます。 誘発された喀痰を採取した後、分析が完了するまでサンプルの上清をエッペンドルフチューブ内で-20℃で保存します。

   気管支鏡検査、気管支/鼻生検および洗浄サンプルの収集と処理 気管支生検を伴う内視鏡検査、気管支洗浄サンプルは、患者の書面による同意に基づいて実施されます。 具体的には、各患者から署名される個別のインフォームド コンセントが含まれます。 気管支鏡検査は 3 つの時点で実施されます (治療開始前のベースライン、治療の 52 週間後、および治療の 156 週間後)。 柔軟な気管支鏡検査と診断技術は、American Thoracic Society と British Thoracic Society が推奨する監視下の麻酔管理下で実施されました。

   鼻生検は、患者の書面による同意に基づいて、治療の52および156週間後のベースライン来院時に行われます。 内視鏡手術は鼻用ハサミで組織を切り取り、サンプルを取り出します。 この方法は、機能的内視鏡下副鼻腔手術 (FESS) として実行されます。これは、直接視覚化による低侵襲技術です。 内視鏡手術には局所麻酔が必要です。 検査中に識別および評価される特定の機能は、中鼻甲介および中鼻道（骨口骨複合体）、解剖学的閉塞、粘液および鼻ポリープです。

   内視鏡処置後、ホルムアルデヒドまたはグルタルアルデヒドを使用して組織サンプルを膨張または浸漬で固定し、パラフィンに包埋します。 気道は、病理学者の裁量で診断解剖中に体系的にサンプリングまたは取得されます。 気道リモデリングは、光学顕微鏡だけでなく、電子顕微鏡でも評価されます。

   最後に、気管支洗浄サンプルはすぐに実験室に運ばれ、-80 度で保管されます。 気管支洗浄液の検査は、次の段落で説明するように、RT-PCR、ELISA、およびフローサイトメトリーによっていくつかのバイオマーカーを決定するために、後の段階で実行されます。

   組織、血液、その他の体液中の炎症のバイオマーカーの評価のために、ビーズまたはELIZA法によるフローサイトメトリー分析（FACS）が行われます。 免疫表現型は、FACSによって分析されます。 バイオマーカーの発現は、RT-PCR によって評価されます。 バイオマーカーは、メポリズマブ治療の開始前、1年後、および156週間後に評価されます。

   マイクロバイオーム分析 マイクロバイオームのサンプルは、ベースライン時および 52 週間の治療後に採取されます。 ＢｉｏＲａｄ ｉＣｙｃｌｅｒ ｉＱサーマルサイクラーシステム（ＢｉｏＲａｄ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ）を用いたｑＰＣＲによって、全細菌、特定の分類群および酪酸生産能力の定量化を行う。

   アレルギー検査（該当する場合）患者のアトピー状態は、さまざまな一般的な吸入アレルゲンに対する総IgE抗体を検出するためのエアロアレルゲンの標準パネルへの皮膚プリックテスト（SPT）によるスクリーニング訪問時に評価されます（利用できない場合）。

   サンプル サイズの計算 G パワー分析 サンプル サイズは、G*Power ソフトウェア (Die Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Germany) を使用して計算されます。 気管支喘息の有無にかかわらず、鼻ポリープを伴う慢性副鼻腔炎患者の気道リモデリングを調査するためのメポリズマブ治療前後の網状基底膜の厚さの違いは、主要なエンドポイントの1つです。 Diver らの研究では、tezepelumab 治療前後の網状基底膜の厚さが、それぞれ 3.86 ± 1.54 対 3.35 ± 1.34 であることが報告されています。 このデータと、検出力が 0.95、統計的有意水準が 0.05 の両側検定を使用して、効果サイズを 0.49 と計算しました。これは、合計サンプル サイズが 57 名であることを示しています。

   Sarah Diver、Latifa Khalfaoui、Claire Emson、Sally E Wenchel、Andrew Menzies-Gow、Michael E Wechsler、James Johnston、Nestor Molfino、Jane R Parnes、Ayman Megally、Gene Colice、Christopher E Brightling、CASCADE 研究調査員。 中等度から重度の制御不能な喘息患者 (CASCADE) における気道炎症細胞、リモデリング、過敏性に対するテゼペルマブの効果: 二重盲検、無作為化、プラセボ対照、第 2 相試験。 ランセット呼吸薬。 2021 年 11 月;9(11):1299-1312.

   統計計画分析 統計分析は、SPSS (バージョン 21.0 IBM SPSS 統計ソフトウェア、米国ニューヨーク州アーモンク) を使用して実行されます。 カテゴリ変数は、数値 (n) とパーセンテージ (%)、連続変数は正規分布の場合は平均 ± SD、そうでない場合は中央値と四分位範囲として表されます。 正規分布のない必要な変数は変換されます。 P < 0.05 は、統計的に有意であると認められました。 パラメトリック変数とノンパラメトリック変数を分離するために、Shapiro-Wilk 検定が実行されます。 パラメトリック変数のペアサンプル T 検定または非パラメトリック変数のウィルコクソン符号順位検定を使用して、メポリズマブ治療の前後に測定された変数の違いを検出します。 .

   すべての患者が自分でコントロールできるため、比較アームはありません。 治療完了の 52 週間および 156 週間後に、ベースラインで 6 か月ごとに測定されるベースライン特性 (臨床および実験バイオマーカー) があります。 主要エンドポイントは、鼻と気管支の両方における気道リモデリングの変化です。

   研究のエンドポイントには、ノンレスポンダーとスーパーレスポンダーの特徴の識別として、これらすべてのバイオマーカーの分析も含まれます。 また、副次評価項目には、方法で評価として言及されているバイオマーカーの評価が含まれます。 統計分析は、52週間の治療期間と156週間の治療期間を完了した患者の数で最初に実行されます。 次に、治療を完了していない患者を個別に分析し、最後にこれら 2 つのグループを比較します。

   気道リモデリングと治療に対する全体的な反応、および各結果の1年および3年（ベースラインから治療開始後1年まで）は、各患者の従属サンプルのペアテスト（パラメトリックおよびノンパラメトリックペアテスト）で測定されます。 その後、治療に対する反応は、1 年および 3 年の転帰の変化 (絶対変化および % 変化) として定義されます。 臨床病理学的アウトカムごとに重回帰モデルを用いて、バイオマーカーなど治療への反応（変化）に影響を与える予測因子を評価します。 研究期間中に被験者ごとに 2 つ以上の観察結果が得られた結果については、結果の繰り返し測定を使用した混合モデルを使用します。 すべての検定は、統計的有意水準が 5% の両側検定になります。

   データベース

   データ収集方法:

   電子データ収集プラットフォームは、このデータベースの 1 年間のフォローアップまで、ベースラインで 3 か月ごとに使用される方法です。 治療訪問中に、紙のフォーム/アンケートは、準呼吸器科医/耳鼻咽喉科医によって記入されます。 各サイトは、特定のデータを電子データベースに入力します。 各患者は、担当の監視サイトによって割り当てられたサイト番号と調査員によって割り当てられた連続番号で構成される被験者番号によって一意に識別されます。 インフォームド コンセント フォームに署名すると、治験責任医師は患者に次の連番を割り当てます。 サイトは、中央の研究担当者に連絡し、電子データベースに登録されている患者について要求された識別情報を提供する必要があります。 治療訪問フォームは、中央研究担当者にも送信されます。 認定された研究担当者は、データの収集、編集、および自分のサイトで収集されたデータの保護にも責任を負い、データベースは毎日バックアップされます。 品質のレビュー/管理は、関係するすべての個人と中央研究担当者 [データ管理者] の共同責任となります。