Biomarkers van respons op behandeling met mepolizumab bij patiënten met neuspoliepen met of zonder bronchiaal astma (CALIOPI)

Hypothese Identificatie van pathologische en klinische kenmerken van responders en non-responders op behandeling met mepolizumab bij patiënten met chronische rhinosinusitis met neuspoliepen met of zonder bronchiale astma met betrekking tot luchtwegremodellering, ontstekingscellen en andere biomarkers op lange termijn.

Doelstellingen/eindpunten

De primaire doelstellingen van deze studie zijn:

1. Evaluatie van de remodellering van de luchtwegen op verschillende anatomische locaties van de luchtwegen (neus, bronchiën) bij baseline - vóór aanvang van de behandeling en na 156 weken behandeling met mepolizumab.
2. Identificatie van kenmerken in het microbioom van verschillende locaties (neus, keelholte, bronchus) bij responders en non-responders op behandeling met mepolizumab.

De belangrijkste secundaire doelstellingen van deze studie zijn:

1. Combinatie van geselecteerde inflammatoire biomarkers van verschillende anatomische locaties in de luchtwegen in weefsel- en secretiemonsters om non-responders en responders op mepolizumab te identificeren na 152 weken behandeling met mepolizumab.

2. Aantonen van het effect van behandeling met mepolizumab bij patiënten met neuspoliepen met of zonder bronchiale astma door de vermindering van het aantal patiënten dat een operatie nodig heeft na 52 weken behandeling, rekening houdend met remodellering van de luchtwegen, ontstekingscellen en biomarkers van ontsteking en klinische kenmerken.

   Andere doelstellingen/eindpunten Elke verbetering van de ademhalingsparameters bij de controle van astma en van de kwaliteit van leven van de patiënt, met inbegrip van de slaapkwaliteit, tijdens de behandeling met mepolizumab bij patiënten met neuspoliepen met of zonder bronchiale astma.

   Alle mogelijke biomarkers van respons gezien neuspoliepen en bronchiale astma als een uniforme luchtwegaandoening na 52 weken behandeling en na 156 weken behandeling.

   Karakterisering van de therapietrouw van patiënten aan doses mepolizumab gedurende 156 weken.

   Onderzoeksopzet en methoden Een fase IV-onderzoek, waarbij patiënten worden verzameld van poliklinieken voor bronchiaal astma en oor-neus-keelholte van elke locatie die de bevolking van Griekenland bestrijkt. Vanwege de onbekende situatie met betrekking tot de Covid-19-pandemie, gaan we ervan uit dat deze klinische studie de werkdruk in onze klinieken niet verstoort.

   Al met al is dit een prospectieve multicenter studie inclusief 7clinics. De studie omvat een screeningperiode van maximaal 2 weken om te beoordelen of u in aanmerking komt en om schriftelijke geïnformeerde toestemming te verkrijgen, en een mepolizumab-behandelingsperiode van 156 weken.

   Bemonsteringsmethode, aantal proefpersonen en tijdlijnen Onderzoekspopulatie De onderzoekspopulatie zal bestaan ​​uit ongeveer 57 patiënten met neuspoliepen met of zonder bronchiale astma die gedurende drie jaar mepolizumab krijgen van 18 jaar en ouder (geen kinderen). Klinische evaluatie van patiënten met neuspoliepen met of zonder astma zal plaatsvinden in overeenstemming met de European Position Paper on Rhinosinusitis and Neuspoliepen. Bovendien kan de standaardzorg voor onze patiënten naast mepolizumab ICS, antihistaminica of LTRA's omvatten.

   Doelinschrijving Onze beoogde steekproefomvang werd berekend op basis van het feit dat 57 patiënten de minimale steekproefomvang was, berekend voor reticulaire basaalmembraandikte uit g-power-analyse (zoals beschreven in de paragraaf over de berekening van de steekproefomvang). We voegen een extra 5% toe om de validiteit van de resultaten te garanderen in het geval van mogelijke terugtrekkingen van patiënten tijdens onze perspectiefstudie.

   Studieparticipatie, beoordeling en opvolging:

   Vitale functies worden uitgevoerd tijdens locatiebezoeken tijdens het screeningbezoek, bij baseline en elke 3 maanden. Metingen omvatten systolische en diastolische bloeddruk, hartslag en lichaamstemperatuur.

   Bij de screeningsbezoeken worden lengte in centimeters (cm) en lichaamsgewicht in kilogrammen (kg) gemeten. De Body Mass Index (BMI) wordt berekend als het gewicht in kg gedeeld door de lengte in meters in het kwadraat

   Laboratoriumevaluatie (hematologie, bloedchemie, urineonderzoek) omvat veneus bloed en urine zal bij aanvang worden verzameld. Het verzamelen van urine voor vrouwelijke proefpersonen zal ook de zwangerschap evalueren. IgE-niveaus zullen tijdens het screeningsbezoek worden geëvalueerd met behulp van immunoCAP-tests en zullen worden gerapporteerd als IU/mL.

   Vragenlijsten Het volgende wordt afgenomen: 1) de Astma Controle Vragenlijst (ACQ-5) en de Astma Controle Test (ACT) om de huidige astmacontrole te beoordelen; 2) de Astma Quality of Life Questionnaire (AQLQ+12) om de kwaliteit van leven en psychologische morbiditeit te beoordelen. Om de slaapkwaliteit verder te beoordelen 1) Athens Insomnia Scale (AIS), 2) Epworth Sleepiness Scale (ESS), 3) St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ) en 4) WHO (Five) Well-Being Index (WHO-5), 5) Fatigue Severity Scale (FSS), 6) Visual Analogue Scale (VAS)-score, 7) SinoNasal Outcome Test (SNOT-22)-score, 8) University of Pennsylvania Smell Identification Test (UPSIT)-score.

   FeNO Uitgeademd stikstofmonoxide (NO) wordt bij aanvang en elke 6 maanden gemeten volgens de richtlijnen van de American Thoracic Society en zoals gespecificeerd door de fabrikant. FeNO-niveaus worden gerapporteerd als delen per miljard. Er worden metingen gedaan voordat spirometrie wordt uitgevoerd.

   Bloed-eosinofielenniveaus Veneuze bloedmonsters zullen worden afgenomen tussen 8 en 10 uur 's ochtends, bij baseline en elke 3 maanden gedurende de periode van 156 weken met behandeling met mepolizumab. Het absolute aantal eosinofielen in het bloed wordt gerapporteerd als cellen/μl.

   Spirometrie Spirometrie zal worden uitgevoerd met gebruikmaking van de eigen apparatuur van de locatie tijdens de bezoeken (baseline en elke 3 maanden) zoals aangegeven in tabel 1. Alle bezoeken aan de kliniek moeten in de ochtend plaatsvinden. Tijdens de behandelingsperiode zal de spirometrie voldoen aan de huidige ATS/ERS-richtlijnen en moet de spirometer een afdruk maken van alle gegenereerde gegevens, die moeten worden opgeslagen in de aantekeningen van de proefpersoon. De spirometer wordt gekalibreerd volgens de instructies van de fabrikant. Spirometrie moet tegelijkertijd (±1 uur) met de Visit 0 spirometrie worden uitgevoerd. Proefpersonen moeten proberen kortwerkende bèta-2-agonisten (SABA's) gedurende ≥4 uur en LABA's gedurende ≥15 uur voorafgaand aan het bezoek aan de kliniek achterwege te laten, indien mogelijk (GINA 2019). De vast te leggen beoordelingen omvatten FEV1, FVC, FEV1/FVC%, PEF en FEF25-75. Post-bronchusverwijdende metingen zullen bij elk bezoek worden uitgevoerd, met behulp van 200-400mcg albuterol of equivalent.

   Impulsoscillometrie Impulsoscillometrie (IOS) zal worden uitgevoerd bij baseline, na 52 weken behandeling en na 156 weken behandeling.

   Lund-Mackay-score De Lund-Mackay-computertomografie (CT)-score zal worden beoordeeld aan de hand van CT-sinus bij baseline, na 52 en 156 weken behandeling zoals gespecificeerd in tabel 1. Preoperatieve en follow-up CT-sinus worden standaard gebruikt in de klinische praktijk bij CRS-patiënten van zorg in het land van de sponsor (stralingsdosis ongeveer 50mGy). Lund-Mackay CT-stadiëring zal blind worden beoordeeld door 2 verschillende clinici.

   Peak nasal inspiratoire flow (PNIF) PNIF wordt toegepast bij baseline en elke 6 maanden tot 156 weken behandeling. PNIF zal worden geëvalueerd met behulp van Olympus ENF type P4 fibroscoop en een Clement Clark International Limited model IN-CHECK ORAL ATM-apparaat.

   Anterior Rhinomanometrie Anterior Rhinomanometrie zal worden uitgevoerd bij aanvang en elke 6 maanden tot 156 weken van behandeling door het rhinomanometriesysteem PDD-301/sr.

   Therapie met biologische middelen Na afronding van de screeningsbezoeken kan de deelnemer binnen een maand starten met een behandeling met biologische therapie (mepolizumab). Tijdens de therapie staan ​​proefpersonen onder toezicht van de longarts die hen voor deelname aan het onderzoek naar de onderzoeksgroep heeft verwezen. Deze longartsen worden 'geassocieerde longartsen' genoemd. De behandeling zal plaatsvinden volgens de instructies van de fabrikant van het product.

   Geassocieerde longartsen en KNO-artsen die tijdens het onderzoek biologische behandelingen geven, moeten een overeenkomst ondertekenen om het onderzoek uit te voeren in overeenstemming met het protocol, erkennen dat hij/zij verantwoordelijk is voor medisch handelen en voor het uitvoeren van het onderzoek, en om ervoor te zorgen dat de medewerker (en hun collega's en werknemers) die meewerken aan de uitvoering van het onderzoek worden geïnformeerd over hun verplichtingen.

   Er zullen mechanismen aanwezig zijn om ervoor te zorgen dat geassocieerd personeel gedurende het hele onderzoek de juiste informatie en ondersteuning van de onderzoeksgroep krijgt.

   Follow-up tijdens biologische therapie: Bij aanvang en bij elk bezoek voor biologische therapie zal het verzamelen van informatie (zie tabel 1) worden uitgevoerd door de geassocieerde longarts, en met ondersteuning door de onderzoeksgroep indien gevraagd door de geassocieerde longarts, bijvoorbeeld onderzoekers via de telefoon of face-to-face contact zal de patiënt interviewen. Bovendien zal de naleving door de arts worden vastgelegd op basis van de mondelinge bevestiging van de patiënt. Datum van toediening van het medicijn zal bij elk bezoek worden geregistreerd, evenals onmiddellijke en vertraagde bijwerkingen.

   Veiligheidsmonitoring Geregistreerde ongewenste voorvallen (AE's) zullen worden gecontroleerd en verzameld zoals vereist in onderzoeksrapporten.

   Bijwerkingen Een bijwerking is het verschijnen of verergeren van een ongewenst teken, symptoom of medische aandoening die optreedt na het starten van de deelname aan het onderzoek. Medische aandoeningen/ziekten aanwezig vóór het starten van het onderzoeksgeneesmiddel worden alleen als bijwerkingen beschouwd als ze verergeren na het starten van het onderzoeksgeneesmiddel. Abnormale laboratoriumwaarden of testresultaten vormen alleen bijwerkingen als ze klinische tekenen of symptomen veroorzaken, als klinisch significant worden beschouwd of therapie vereisen. Ook bijwerkingen gerelateerd aan Covid-19 zijn inbegrepen. Als een partner-longarts of onderzoekspersoneel zich bewust wordt van een AE die verband houdt met een product, kan dit aan de fabrikant worden gemeld volgens hun lokale standaardpraktijk voor spontane AE-rapportage. Ook dient een kopie van het verslag naar de studiecoördinator gestuurd te worden. Ernstige ongewenste voorvallen (SAE) zullen worden gerapporteerd op de eCRF-pagina's en binnen 24 uur hebben alle onderzoekers de verantwoordelijkheid om het Centraal Comité in Thessaloniki te informeren. Vervolgens zal het Centraal Comité de wetenschappelijke raad en het Griekse medische bureau informeren. Ook zal het medisch en wetenschappelijk oordeel worden uitgeoefend door de hoofdonderzoeker van elk centrum samen met de Centrale Commissie, om te beslissen of de proefpersoon de behandeling moet stoppen of niet.

   Independent Data Monitoring Committee/Data and Safety Monitoring Board (IDMC/DSMB) is het centrale onderzoekspersoneel in Thessaloniki (Centraal Comité). Voor een succesvolle monitoring van protocolbeoordelingen zal IDMC/DSMB elke maand een telefoontje plannen naar alle sites.

   Konstantinos Porpodis -Hoofdonderzoeker (universitair hoofddocent, longafdeling, Aristoteles Universiteit van Thessaloniki, George Papanikolaou-ziekenhuis, Thessaloniki), Kalliopi Domvri - Clinical Research Associate-Study Manager-Sub Investigator, Laboratory of Histology-Embryology, Medical School, Aristotle University of Thessaloniki .

   Zwangerschapsmelding Bij de screening zullen vrouwelijke patiënten in eerste instantie een zwangerschapstest moeten doen. Als een vrouwelijke proefpersoon tijdens de behandeling een zwangerschap bij ons meldt, wordt haar gevraagd zich terug te trekken uit het onderzoek (om bias te voorkomen). de polikliniek van elk centrum.

   Prescreening en mislukte screening Proefpersonen krijgen een studienummer toegewezen op het moment van ondertekening van de toestemming. Proefpersonen die hebben ondertekend maar niet doorgaan naar de beoordeling van de screeningbezoeken, worden beschouwd als een pre-screen mislukking. Voor deze onderwerpen worden geen gegevens vastgelegd in de database.

   Proefpersonen die ten minste één van de twee screeningbezoeken voltooien, maar geen biologische therapie starten, worden aangemerkt als mislukte screening.

   Informatie die moet worden verzameld voor pre-screening en screeningfouten zal worden beschreven in de database-aanvulling.

   Terugtrekkingsbezoek Als een deelnemer besluit zich terug te trekken uit het onderzoek tijdens de follow-up (om enige andere reden dan verlies voor follow-up), kan hem/haar worden gevraagd om een ​​terugtrekkingsbezoek bij te wonen (indien dit door de onderzoeker noodzakelijk wordt geacht en met toestemming). Tijdens het bezoek kunnen de deelnemer vragen worden gesteld over hun huidige toestand als onderdeel van het verzamelen van klinische informatie, zoals: astma en nasale symptomen, exacerbaties en de voortgang van de ontvangen behandeling.

   Verzameling en verwerking van bloedmonsters Bloedmonsters worden afgenomen bij het basisbezoek, na 6 maanden en na voltooiing van de behandeling.

   Geïnduceerd sputum Geïnduceerd sputum zal bij baseline worden uitgevoerd vóór aanvang van de behandeling en na 52 en 156 weken behandeling volgens het rapport van de ERS Task Force, waarin een gedetailleerde op consensus gebaseerde aanbeveling voor geïnduceerde sputumverwerking wordt voorgesteld. Na het verzamelen van het geïnduceerde sputum wordt het supernatant van het monster bewaard bij -20°C in eppendorf-buisjes totdat de analyse is voltooid.

   Bronchoscopie, bronchiale/neusbiopten en verzameling en verwerking van wasmonsters Endoscopie met bronchiale biopsieën, bronchiale wasmonsters zullen worden uitgevoerd na schriftelijke toestemming van de patiënt. Concreet zal er een afzonderlijke geïnformeerde toestemming worden bijgevoegd die door elke patiënt moet worden ondertekend. Bronchoscopie zal op drie tijdstippen worden uitgevoerd (baseline vóór aanvang van de behandeling, na 52 weken behandeling en na 156 weken behandeling). Flexibele bronchoscopie en diagnostische technieken werden uitgevoerd onder gecontroleerde anesthesie, zoals aanbevolen door de American Thoracic Society en de British Thoracic Society.

   Neusbiopten zullen worden uitgevoerd bij het basisbezoek, na 52 en 156 weken behandeling na schriftelijke toestemming van de patiënt. Een endoscopische chirurgische ingreep wordt uitgevoerd met een neusschaar door het weefsel door te snijden en vervolgens het monster te verwijderen. De methode zal worden uitgevoerd als een functionele endoscopische sinuschirurgie (FESS), een minimaal invasieve techniek onder directe visualisatie. De endoscopische procedure vereist plaatselijke verdoving. De specifieke kenmerken die tijdens het onderzoek worden geïdentificeerd en beoordeeld, zijn de middelste neusschelp en de middelste gehoorgang (osteomeataal complex), anatomische obstructie, slijmvliezen en neuspoliepen.

   Na de endoscopische procedures worden weefselmonsters gefixeerd door opblazen of onderdompelen met formaldehyde of glutaaraldehyde en ingebed in paraffine. Luchtwegen worden systematisch bemonsterd of verkregen tijdens diagnostische dissectie naar goeddunken van de patholoog. Luchtwegremodellering zal niet alleen met optische microscopie worden geëvalueerd, maar ook met behulp van elektronenmicroscopie.

   Tot slot zullen de bronchiale spoelmonsters direct naar het laboratorium worden getransporteerd, waar ze bij -80 graden worden bewaard. Onderzoek van bronchiale wasvloeistoffen zal in een later stadium worden uitgevoerd om verschillende biomarkers te bepalen door middel van RT-PCR, ELISA en flowcytometrie, zoals beschreven in de volgende paragraaf.

   Voor de evaluatie van biomarkers van ontsteking in weefsel, bloed en andere biologische vloeistoffen, zal Flow Cytometry Analysis (FACS) met kralen of de ELIZA-methode worden uitgevoerd. Immunophenotype zal worden geanalyseerd door FACS. Expressie van biomarkers zal worden geëvalueerd door middel van RT-PCR. Biomarker zal worden geëvalueerd vóór de start, na 1 jaar en na 156 weken behandeling met mepolizumab.

   Microbioomanalyse Microbioommonsters worden genomen bij aanvang en na 52 weken behandeling. Kwantificering van totale bacteriën, specifieke taxa en butyraatproductiecapaciteit zal worden uitgevoerd door qPCR met behulp van een BioRad iCycler iQ thermal cycler-systeem (BioRad, Hercules, CA).

   Allergietesten (indien van toepassing) De atopische status van de patiënt zal worden geëvalueerd (indien niet beschikbaar) tijdens het screeningsbezoek door de huidpriktest (SPT) aan een standaardpanel van aeroallergenen voor het detecteren van totale IgE-antilichamen tegen verschillende veel voorkomende inhalatieallergenen.

   Berekening van de steekproefomvang G-poweranalyse De steekproefomvang wordt berekend met behulp van de G*Power-software (Die Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Duitsland). Het verschil in dikte van de reticulaire basaalmembraan vóór en na behandeling met mepolizumab voor het onderzoek naar remodellering van de luchtwegen bij patiënten met chronische rhinosinusitis met neuspoliepen met of zonder bronchiale astma is een van onze primaire eindpunten. In de studie van Diver et al. is gemeld dat de reticulaire basaalmembraandikte voor en na behandeling met tezepelumab respectievelijk 3,86 ± 1,54 versus 3,35 ± 1,34 was. Met behulp van deze gegevens en een tweezijdige test, met een vermogen van 0,95 en een niveau van statistische significantie van 0,05, berekenden we een effectgrootte van 0,49, wat een totale steekproefomvang van 57 deelnemers aangaf.

   Sarah Diver, Latifa Khalfaoui, Claire Emson, Sally E Wenzel, Andrew Menzies-Gow, Michael E Wechsler, James Johnston, Nestor Molfino, Jane R Parnes, Ayman Megally, Gene Colice, Christopher E Brightling, CASCADE-onderzoekers. Effect van tezepelumab op ontstekingscellen van de luchtwegen, hermodellering en hyperreactiviteit bij patiënten met matig tot ernstig ongecontroleerd astma (CASCADE): een dubbelblinde, gerandomiseerde, placebogecontroleerde, fase 2-studie. Lancet Respir Med. 2021 nov;9(11):1299-1312.

   Statistische plananalyse Statistische analyse wordt uitgevoerd met behulp van SPSS (versie 21.0 IBM SPSS statistische software, Armonk, NY, VS). Categorische variabelen worden weergegeven als getallen (n) en percentages (%), continue variabelen als gemiddelde ± SD indien normaal verdeeld, of mediaan en interkwartielbereiken indien anders. Waar nodig worden variabelen zonder normale verdeling getransformeerd. P < 0,05 werd geaccepteerd als statistisch significant. Shapiro-Wilk-test zal worden uitgevoerd om parametrische variabelen van niet-parametrische variabelen te scheiden. Paired-Samples T-test voor parametrische of Wilcoxon Signed Ranks-test voor niet-parametrische variabelen zal worden gebruikt om verschillen te detecteren in de variabelen die voor en na behandeling met Mepolizumab zijn gemeten bij CRS-patiënten met neuspoliepen met of zonder astma in zowel histopathologische, bloed- als klinische parameters .

   Er is geen vergelijkingsarm omdat elke patiënt de controle over zichzelf heeft. Er zijn basiskenmerken (klinische en laboratoriumbiomarkers) die gemeten zullen worden bij aanvang, elke 6 maanden, na 52 en 156 weken na voltooiing van de behandeling. Primair eindpunt zijn veranderingen in de remodellering van de luchtwegen, zowel in de neus als in de bronchiën.

   Studie-eindpunten omvatten ook de analyse van al die biomarkers als de identificatie van de kenmerken van non-responders en super-responders. Secundaire eindpunten omvatten ook de evaluatie van de biomarkers die in de methoden worden genoemd als beoordelingen. Er zal in eerste instantie een statistische analyse worden uitgevoerd met het aantal patiënten dat de behandelingsperiode van 52 weken en de behandelingsperiode van 156 weken heeft voltooid. Ten tweede worden de patiënten die de behandeling nog niet hebben afgerond afzonderlijk geanalyseerd en ten slotte worden deze twee groepen met elkaar vergeleken.

   Remodellering van de luchtwegen en algehele respons op de behandeling en binnen één en drie jaar (van baseline tot 1 jaar na aanvang van de behandeling) voor elk resultaat zullen worden gemeten met een gepaarde test van afhankelijke steekproeven (parametrische en niet-parametrische gepaarde tests) bij elke patiënt. Vervolgens wordt de respons op de behandeling gedefinieerd als de verandering (absolute en % verandering) van de uitkomst in één en drie jaar. We zullen voorspellers beoordelen die de respons op behandeling (verandering) beïnvloeden, zoals biomarkers, door gebruik te maken van meerdere regressiemodellen voor elke klinisch-pathologische uitkomst. Voor uitkomsten met meer dan 2 waarnemingen per proefpersoon gedurende de onderzoeksperiode zullen we gemengde modellen gebruiken waarbij de herhaalde metingen van de uitkomst worden gebruikt. Alle tests zijn tweezijdig met een statistisch significantieniveau van 5%.

   Databank

   Methode voor gegevensverzameling:

   Een elektronisch gegevensverzamelingsplatform zal de methode zijn die wordt gebruikt bij baseline om de 3 maanden tot 1 jaar follow-up voor deze database. Tijdens behandelbezoeken worden papieren formulieren/vragenlijsten ingevuld door de associate longarts/ KNO-arts. Elke site voert specifieke gegevens in een elektronische database in. Elke patiënt wordt uniek geïdentificeerd door een subjectnummer dat is samengesteld uit het sitenummer dat is toegewezen door de verantwoordelijke monitoringsite en een volgnummer dat is toegewezen door de onderzoeker. Na ondertekening van het toestemmingsformulier krijgt de patiënt het volgende volgnummer toegewezen door de onderzoeker. De site moet contact opnemen met het centrale onderzoekspersoneel en de gevraagde identificerende informatie voor de patiënt verstrekken zoals geregistreerd in de elektronische database. De formulieren voor het behandelbezoek worden ook naar het centraal onderzoekspersoneel gestuurd. Het geautoriseerde onderzoekspersoneel is verantwoordelijk voor het verzamelen, bewerken en beschermen van de gegevens die op hun eigen locatie worden verzameld en er wordt dagelijks een back-up van de database gemaakt. Kwaliteitsbeoordeling/controle zal de gezamenlijke verantwoordelijkheid zijn van alle betrokken personen en het centrale onderzoekspersoneel [data custodian].