Biomarkører for respons på Mepolizumab-behandling hos pasienter med nesepolypper med eller uten bronkial astma (CALIOPI)

Hypotese Identifikasjon av patologiske og kliniske karakteristika for respondere og ikke-responderere på mepolizumabbehandling hos pasienter med kronisk rhinosinusitt med nesepolypper med eller uten bronkial astma angående luftveisremodellering, inflammatoriske celler og andre biomarkører på langsiktig basis.

Mål/Endepunkter

Hovedmålene med denne studien er:

1. Evaluering av remodellering av luftveiene på ulike anatomiske steder i luftveiene (nese, bronkier) ved baseline-før behandlingsstart og etter 156 uker med mepolizumab-behandling.
2. Identifikasjon av alle egenskaper i mikrobiom på forskjellige steder (nese, svelg, bronkier) hos respondere og ikke-responderere på mepolizumab-behandling.

De viktigste sekundære målene for denne studien er:

1. Kombinasjon av utvalgte inflammatoriske biomarkører av ulike anatomiske steder i luftveiene i vevs- og sekresjonsprøver for å identifisere ikke-respondere og respondere på mepolizumab etter 152 uker med mepolizumab-behandling.

2. For å demonstrere effekten av mepolizumab-behandling hos pasienter med nesepolypper med eller uten bronkial astma gjennom reduksjon av pasienter som trenger kirurgi etter 52 ukers behandling, tatt i betraktning luftveisremodellering, inflammatoriske celler og biomarkører for betennelse og kliniske egenskaper.

   Andre mål/endepunkter Enhver forbedring av respiratoriske parametere i astmakontroll og i pasienters livskvalitet inkludert søvnkvalitet under mepolizumabbehandling hos pasienter med nesepolypper med eller uten bronkial astma.

   Eventuelle biomarkører for respons vurderer nesepolypper og bronkial astma som en enhetlig luftveissykdom etter 52 ukers behandling og etter 156 ukers behandling.

   Karakterisering av pasientens etterlevelse av mepolizumab-doser i 156 uker.

   Studiedesign og metoder En fase IV-studie, hvor pasienter vil bli samlet inn fra poliklinikker for bronkial astma og øre-nese-hals fra hvert sted som dekker befolkningen i Hellas. På grunn av den ukjente situasjonen rundt Covid-19-pandemien, antar vi at denne kliniske studien ikke forstyrrer arbeidsbelastningen i våre klinikker.

   Totalt sett er dette en prospektiv multisenterstudie inkludert 7clinics. Studien vil inkludere en screeningperiode på opptil 2 uker for å vurdere kvalifisering og innhente skriftlig informert samtykke og en mepolizumab-behandlingsperiode på 156 uker.

   Prøvetakingsmetode, antall forsøkspersoner og tidslinjer Studiepopulasjon Studiepopulasjonen vil bestå av ca. 57 pasienter med nasal polypose med eller uten bronkialastma som får mepolizumab i tre år fra 18 år og oppover (ingen barn). Klinisk evaluering av pasienter med nasal polypose med eller uten astma vil bli gjort i henhold til European Position Paper on Rhinosinusitis and Nasal Polyps. Dessuten kan standardbehandling for våre pasienter bortsett fra mepolizumab inkludere ICS, antihistamin eller LTRA.

   Målregistrering Vår målprøvestørrelse ble beregnet på grunnlag av at 57 pasienter var minimum prøvestørrelse, beregnet for retikulær basalmembrantykkelse fra g-power-analyse (som beskrevet i avsnittet om beregning av prøvestørrelse). Vi legger til ytterligere 5 % for å sikre validiteten til resultatene i tilfelle potensielle pasientabstinenser under vår perspektivstudie.

   Studiedeltakelse, vurdering og oppfølging:

   Vitale tegn, vil bli utført ved stedsbesøk ved screeningbesøk, ved baseline og hver 3. måned. Målinger vil inkludere systolisk og diastolisk blodtrykk, puls og kroppstemperatur.

   Høyde i centimeter (cm) og kroppsvekt i kilogram (kg) vil bli målt ved screeningbesøk. Kroppsmasseindeksen (BMI) vil bli beregnet som vekten i kg delt på høyden i meter i annen

   Laboratorieevaluering (hematologi, blodkjemi, urinanalyse) inkluderer venøst ​​blod og urin vil bli samlet ved baseline. Innsamling av urin for kvinnelige forsøkspersoner vil også evaluere graviditet. IgE-nivåer vil bli evaluert ved screeningbesøk ved hjelp av immunoCAP-tester og vil bli rapportert som IE/ml.

   Spørreskjemaer Følgende vil bli administrert: 1) Astmakontrollspørreskjemaet (ACQ-5) og astmakontrolltesten (ACT) for å vurdere gjeldende astmakontroll; 2) Astma Quality of Life Questionnaire (AQLQ+12) for å vurdere livskvalitet og psykologisk sykelighet. For ytterligere å vurdere søvnkvaliteten 1) Athens Insomnia Scale (AIS), 2) Epworth Sleepiness Scale (ESS), 3) St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ) og 4) WHO (Fem) Well-Being Index (WHO-5), 5) Fatigue Severity Scale (FSS), 6) Visual Analogue Scale (VAS) score, 7) SinoNasal Outcome Test (SNOT-22) score, 8) University of Pennsylvania Smell Identification Test (UPSIT).

   FeNO Utåndet nitrogenoksid (NO) vil bli målt ved baseline og hver 6. måned i henhold til American Thoracic Society Guidelines og spesifisert av produsenten. FeNO-nivåer vil bli rapportert som deler per milliard. Målinger vil bli gjort før spirometri utføres.

   Eosinofilnivåer i blodet Venøse blodprøver vil bli tatt mellom kl. 8.00 til 10.00, ved baseline og hver 3. måned i løpet av 156 ukers perioden med mepolizumabbehandling. Absolutt eosinofiltall i blod vil bli rapportert som celler/μl.

   Spirometri Spirometri vil bli utført ved bruk av stedets eget utstyr ved besøkene (baseline og hver 3. måned) som spesifisert i tabell 1. Alle klinikkbesøk skal skje om morgenen. I løpet av behandlingsperioden vil spirometrien oppfylle gjeldende ATS/ERS-retningslinjer og spirometeret må produsere en utskrift av alle genererte data, som skal lagres i pasientens notater. Spirometeret vil bli kalibrert i henhold til produsentens instruksjoner. Spirometri må utføres samtidig (±1 time) med Visit 0-spirometrien. Pasienter bør prøve å holde tilbake korttidsvirkende beta-2-agonister (SABA) i ≥4 timer og LABA i ≥15 timer før klinikkbesøk, hvis mulig (GINA 2019). Vurderinger som skal registreres vil inkludere FEV1, FVC, FEV1/FVC%, PEF og FEF25-75. Post-bronkodilatatormålinger vil bli tatt ved hvert besøk, med 200-400mcg albuterol eller tilsvarende.

   Impulsoscillometri Impulsoscillometri (IOS) vil bli utført ved baseline, etter 52 ukers behandling og etter 156 ukers behandling.

   Lund Mackay Score Lund-Mackay computed tomography (CT) score vil bli evaluert ved CT sinus ved baseline, etter 52 og 156 ukers behandling som spesifisert i tabell 1. Preoperativ og oppfølging CT sinus brukes i klinisk praksis hos CRS-pasienter som standard omsorg i sponsorens land (stråledose ca. 50mGy). Lund-Mackay CT staging vil bli evaluert blindt av 2 forskjellige klinikere.

   Peak nasal inspiratory flow (PNIF) PNIF vil bli påført ved baseline og hver 6. måned frem til 156 ukers behandling. PNIF vil bli evaluert ved hjelp av Olympus ENF type P4 fibroskop og en Clement Clark International Limited modell IN-CHECK ORAL ATM-enhet.

   Fremre rinonomometri Anterior rhinomometri vil bli utført ved baseline og hver 6. måned inntil 156 ukers behandling med rhinomometrisystem PDD-301/sr.

   Behandling med biologiske legemidler Etter fullført screeningbesøk kan deltakeren starte behandling med biologisk terapi (mepolizumab) innen en måned. Under terapien vil forsøkspersonene være under behandling av lungelegen som har henvist dem til forskningsgruppen for å delta i studien. Disse lungelegene vil bli betegnet som 'associate pulmonologists'. Behandling vil bli gitt i henhold til produktprodusentens instruksjoner.

   Tilknyttede lungeleger og otorhinologer som gir biologisk behandling under studien vil kreve å signere en avtale om å gjennomføre studien i samsvar med protokollen, for å erkjenne at han/hun er ansvarlig for medisinsk oppførsel og for studieoppførsel, og for å sikre at medarbeideren (og deres kolleger og ansatte) som bistår i gjennomføringen av studien, informeres om deres forpliktelser.

   Mekanismer vil være på plass for å sikre at tilknyttede ansatte får riktig informasjon og støtte fra forskningsgruppen gjennom hele studien.

   Oppfølging under biologisk terapi: Ved oppstart og ved hvert besøk for administrasjon av biologisk terapi vil innhenting av informasjon (se tabell 1) bli utført av assisterende lungelege, og med støtte fra forskningsgruppen dersom den assisterende lungelegen ber om det, f.eks. forskere via telefon eller ansikt-til-ansikt kontakt vil intervjue pasienten. Videre vil overholdelse bli registrert fra legen basert på pasientens muntlige bekreftelse. Datoform for legemiddeladministrasjon vil bli registrert ved hvert besøk, samt umiddelbare og forsinkede bivirkninger.

   Sikkerhetsovervåking Registrerte uønskede hendelser (AE) vil bli overvåket og sammenstilt etter behov i studierapporter.

   Uønskede hendelser En uønsket hendelse er utseendet eller forverringen av et uønsket tegn, symptom eller medisinsk tilstand som oppstår etter start av studiebidraget. Medisinske tilstander/sykdommer som er tilstede før oppstart av studielegemiddel anses bare som uønskede hendelser hvis de forverres etter oppstart av studielegemiddel. Unormale laboratorieverdier eller testresultater utgjør uønskede hendelser bare hvis de induserer kliniske tegn eller symptomer, anses som klinisk signifikante eller krever behandling. Også uønskede hendelser relatert til Covid-19 er inkludert. Hvis en partner lungelege eller forskningspersonell blir oppmerksom på en AE assosiert med et produkt, kan det rapporteres til produsenten i henhold til deres lokale standardpraksis for spontan AE-rapportering. Kopi av rapporten skal også sendes til studiekoordinator. Alvorlige uønskede hendelser (SAE) vil bli rapportert på eCRF-sidene og innen 24 timer vil alle etterforskerne ha ansvar for å informere sentralkomiteen i Thessaloniki. Deretter vil sentralkomiteen informere det vitenskapelige styret og det greske legekontoret. Medisinsk og vitenskapelig vurdering vil også bli utøvd av hovedetterforskeren ved hvert senter med sentralkomiteen, for å avgjøre om forsøkspersonen skal stoppe behandlingen eller ikke.

   Independent Data Monitoring Committee/Data and Safety Monitoring Board (IDMC/DSMB) er det sentrale forskningspersonellet i Thessaloniki (sentralkomiteen). For en vellykket overvåking av protokollvurderinger vil IDMC/DSMB planlegge en telefonsamtale hver måned til alle nettstedene som er inkludert.

   Konstantinos Porpodis - Hovedetterforsker (førsteamanuensis, lungeavdelingen, Aristoteles Universitetet i Thessaloniki, George Papanikolaou sykehus, Thessaloniki), Kalliopi Domvri - Klinisk forskningsassistent-studieleder-underforsker, Laboratory of Histology-Embryology, Medical School, Aristoteles University of Thessaloniki .

   Graviditetsrapport I første omgang vil kvinnelige pasienter ved screening måtte ta en graviditetstest. Under behandlingen, hvis en kvinnelig forsøksperson rapporterer en graviditet til oss, vil hun bli bedt om å trekke seg fra studien (for å forhindre skjevhet). Deretter vil hun bli spurt om hun vil fortsette å få behandlingen utenfor denne protokollen og bli overvåket kl. hvert senters poliklinikk.

   Forhåndsscreening og screeningssvikt Forsøkspersonene vil bli tildelt et studienummer på tidspunktet for signering av samtykket. Forsøkspersoner som har signert, men ikke går videre til vurderingen av screeningbesøk, vil bli ansett som en feil på forhånd. Ingen data vil bli fanget opp i databasen for disse fagene.

   Personer som gjennomfører minst ett av de to screeningbesøkene, men som ikke starter biologisk behandling, vil bli utpekt som screeningsfeil.

   Informasjon som skal samles inn for forhåndskontroll og screeningsfeil vil bli detaljert i databasefullføringen.

   Tilbaketrekkingsbesøk Hvis en deltaker bestemmer seg for å trekke seg fra studien under oppfølgingen (av andre grunner enn tap for å følge opp), kan de bli bedt om å delta på et tilbaketrekningsbesøk (hvis etterforskeren anser det som nødvendig og med forbehold om samtykke). Under besøket kan deltakeren bli stilt spørsmål om deres nåværende tilstander som en del av klinisk informasjonsinnsamling som: astma og nasale symptomer, eksaserbasjoner og progresjon av behandlingen som mottas.

   Blodprøvetaking og behandling Blodprøver vil bli tatt ved baseline besøk, 6 måneder og etter fullført behandling.

   Indusert sputum Indusert sputum vil bli utført ved baseline før behandlingsstart og etter 52 og 156 ukers behandling i henhold til ERS Task Force-rapporten hvor en detaljert ekspertkonsensusbasert anbefaling for indusert sputumbehandling er foreslått. Etter innsamling av det induserte sputumet, vil supernatanten av prøven bli lagret ved -20°C i eppendorf-rør til analysen er utført.

   Bronkoskopi, bronkial/nesebiopsi og vaskeprøvers innsamling og behandling Endoskopi med bronkialbiopsier, bronkial vaskeprøve vil bli utført etter pasientens skriftlige samtykke. Nærmere bestemt vil et eget informert samtykke inkluderes som skal signeres fra hver pasient. Bronkoskopi vil bli utført på tre tidspunkter (grunnlinje før behandlingsstart, etter 52 ukers behandling og etter 156 ukers behandling). Fleksibel bronkoskopi og diagnostiske teknikker ble utført under overvåket anestesibehandling som anbefalt av American Thoracic Society og British Thoracic Society.

   Nesebiopsier vil bli utført ved baseline-besøk, etter 52 og 156 ukers behandling etter pasientens skriftlige samtykke. Endoskopisk kirurgisk prosedyre vil bli utført med nesesaks ved å kutte vevet og deretter fjerne prøven. Metoden vil bli utført som en funksjonell endoskopisk sinuskirurgi (FESS), en minimalt invasiv teknikk under direkte visualisering. Den endoskopiske prosedyren krever lokalbedøvelse. De spesifikke egenskapene som vil bli identifisert og vurdert under undersøkelsen er den midtre turbinat og den midtre meatus (osteomeatal kompleks), anatomisk obstruksjon, mucopus og nesepolypper.

   Etter de endoskopiske prosedyrene vil vevsprøver bli fikset i oppblåsing eller nedsenking ved bruk av formaldehyd eller glutaraldehyd og innebygd i parafin. Luftveier vil systematisk tas eller innhentes under diagnostisk disseksjon etter patologens skjønn. Luftveisremodellering vil bli evaluert ikke bare ved optisk mikroskopi, men også ved elektronmikroskopi.

   Til slutt vil bronkialvaskeprøver umiddelbart fraktes til laboratoriet, for oppbevaring ved -80 grader. Undersøkelse av bronkial vaskevæsker vil bli utført på et senere tidspunkt for å bestemme flere biomarkører ved RT-PCR, ELISA og flowcytometri som beskrevet i neste avsnitt.

   For evaluering av biomarkører for betennelse i vev, blod og andre biologiske væsker vil det bli utført flowcytometrianalyse (FACS) med perler eller ELIZA-metoden. Immunfenotype vil bli analysert av FACS. Ekspresjon av biomarkører vil bli evaluert ved RT-PCR. Biomarkør vil bli evaluert før oppstart, etter 1 år og etter 156 ukers behandling med mepolizumab.

   Mikrobiomanalyse Mikrobiomprøver vil bli tatt ved baseline og etter 52 ukers behandling. Kvantifisering av totale bakterier, spesifikk taxa- og butyratproduksjonskapasitet vil bli utført ved qPCR ved bruk av et BioRad iCycler iQ termisk syklussystem (BioRad, Hercules, CA).

   Allergitesting (hvis aktuelt) Pasientenes atopiske status vil bli evaluert (hvis ikke tilgjengelig) ved screeningbesøk av hudpriktesten (SPT) til et standardpanel av aeroallergener for påvisning av totale IgE-antistoffer mot forskjellige vanlige inhalerende allergener.

   Prøvestørrelsesberegning G-effektanalyse Prøvestørrelsen beregnes ved hjelp av G*Power-programvaren (Die Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Tyskland). Forskjellen i retikulær basalmembrantykkelse før og etter mepolizumabbehandling for undersøkelse av luftveisremodellering hos pasienter med kronisk rhinosinusitt med nesepolypper med eller uten bronkial astma er et av våre primære endepunkter. I studien av Diver et al har det blitt rapportert at retikulær basalmembrantykkelse før og etter tezepelumab-behandling ble funnet henholdsvis 3,86 ± 1,54 vs 3,35 ± 1,34. Ved å bruke disse dataene og en tosidig test, med en potens på 0,95 og et nivå av statistisk signifikans på 0,05, beregnet vi en effektstørrelse på 0,49, som indikerte en total prøvestørrelse på 57 deltakere.

   Sarah Diver, Latifa Khalfaoui, Claire Emson, Sally E Wenzel, Andrew Menzies-Gow, Michael E Wechsler, James Johnston, Nestor Molfino, Jane R Parnes, Ayman Megally, Gene Colice, Christopher E Brightling, CASCADE-studieetterforskere. Effekt av tezepelumab på inflammatoriske celler i luftveiene, remodellering og hyperrespons hos pasienter med moderat til alvorlig ukontrollert astma (CASCADE): en dobbeltblind, randomisert, placebokontrollert fase 2-studie. Lancet Respir Med. 2021 Nov;9(11):1299-1312.

   Statistisk plananalyse Statistisk analyse vil bli utført ved hjelp av SPSS (versjon 21.0 IBM SPSS statistisk programvare, Armonk, NY, USA). Kategoriske variabler vil bli oppgitt som tall (n) og prosenter (%), kontinuerlige variabler som gjennomsnitt ± SD hvis normalfordelt, eller median og interkvartile områder hvis annet. Der det er nødvendig vil variabler uten normalfordeling transformeres. P < 0,05 ble akseptert som statistisk signifikant. Shapiro-Wilk test vil bli utført for å skille parametriske fra ikke-parametriske variabler. Paired-Samples T-test for parametrisk eller Wilcoxon Signed Ranks-test for ikke-parametriske variabler vil bli brukt for å oppdage forskjeller i variablene målt før og etter Mepolizumab-behandling hos CRS-pasienter med nesepolypper med eller uten astma i både histopatologiske, blod- eller kliniske parametere .

   Det er ingen komparatorarm da hver pasient har kontroll over seg selv. Det er baseline-karakteristikker (kliniske og laboratoriebiomarkører) som skal måles ved baseline, hver 6. måned, etter 52 og 156 uker med fullført behandling. Primært endepunkt er endringer i luftveisremodellering både i nese og bronkier.

   Studieendepunkter inkluderer også analysen av alle disse biomarkørene som identifisering av egenskapene til ikke-respondere og superrespondere. Sekundære endepunkter inkluderer også evaluering av biomarkørene nevnt i metodene som vurderinger. Statistisk analyse vil initialt bli utført med antall pasienter som har fullført 52-ukers behandlingsperiode og 156 uker. For det andre vil pasienter som ikke har fullført behandlingen bli analysert separat, og til slutt skal disse to gruppene sammenlignes med hverandre.

   Luftveisremodellering og generell respons på behandling og i løpet av ett og tre år (fra baseline til 1 år etter behandlingsstart) for hvert utfall vil bli målt med paret test av avhengige prøver (parametriske og ikke-parametriske parede tester) hos hver pasient. Da vil respons på behandling defineres som endringen (absolutt og % endring) av utfallet på ett og tre år. Vi vil vurdere prediktorer som påvirker respons på behandling (endring) slik som biomarkører ved å bruke flere regresjonsmodeller for hvert klinisk patologisk utfall. For utfall med mer enn 2 observasjoner per forsøksperson i løpet av studieperioden vil vi bruke blandede modeller som bruker de gjentatte målingene av utfallet. Alle tester vil være 2-sidige med et statistisk signifikansnivå på 5 %.

   Database

   Datainnsamlingsmetode:

   En elektronisk datainnsamlingsplattform vil være metoden som brukes ved baseline hver 3. måned inntil 1 års oppfølging av denne databasen. Under behandlingsbesøk vil papirskjemaer/spørreskjema fylles ut av assisterende lungelege/otorhinolaryngolog. Hvert nettsted vil legge inn spesifikke data i en elektronisk database. Hver pasient er unikt identifisert av et emnenummer som består av stedsnummeret tildelt av det ansvarlige overvåkingsstedet og et sekvensnummer tildelt av etterforskeren. Ved å signere skjemaet for informert samtykke, blir pasienten tildelt neste sekvensnummer av utrederen. Nettstedet skal kontakte det sentrale forskningspersonellet og oppgi etterspurt identifikasjonsinformasjon for pasienten slik den er registrert i den elektroniske databasen. Behandlingsbesøksskjemaene vil også bli sendt til det sentrale forskningspersonellet. Det autoriserte studiepersonellet vil være ansvarlig for datainnsamling, redigering og beskyttelse av dataene som samles inn på deres egen side, og databasen sikkerhetskopieres på daglig basis. Kvalitetsgjennomgang/kontroll vil være et felles ansvar for alle involverte personer og det sentrale forskningspersonellet [datadepoter].