Biomarkörer för svar på Mepolizumab-behandling hos patienter med näspolyper med eller utan bronkial astma (CALIOPI)

Hypotes Identifiering av patologiska och kliniska egenskaper hos patienter som svarar och inte svarar på mepolizumabbehandling hos patienter med kronisk rhinosinusit med näspolyper med eller utan bronkialastma avseende luftvägsremodellering, inflammatoriska celler och andra biomarkörer på lång sikt.

Mål/Slutpunkter

De primära målen för denna studie är:

1. Utvärdering av ombyggnaden av luftvägarna på olika anatomiska platser i luftvägarna (näsa, bronker) vid utgångsläget före behandlingsstart och efter 156 veckors mepolizumabbehandling.
2. Identifiering av eventuella egenskaper i mikrobiomet på olika platser (näsa, svalg, bronker) hos personer som svarar och som inte svarar på mepolizumabbehandling.

De viktigaste sekundära målen för denna studie är:

1. Kombination av utvalda inflammatoriska biomarkörer av olika anatomiska lägen i luftvägarna i vävnads- och sekretprover för att identifiera icke-reagerande och responders på mepolizumab efter 152 veckors mepolizumabbehandling.

2. Att påvisa effekten av mepolizumabbehandling hos patienter med näspolyper med eller utan bronkialastma genom att minska antalet patienter som behöver kirurgi efter 52 veckors behandling med hänsyn till luftvägsremodellering, inflammatoriska celler och biomarkörer för inflammation och kliniska egenskaper.

   Övriga mål/endpoints Eventuell förbättring av andningsparametrar i astmakontroll och i patienternas livskvalitet inklusive sömnkvalitet under mepolizumabbehandling hos patienter med näspolyper med eller utan bronkialastma.

   Eventuella biomarkörer för svar med tanke på näspolyper och bronkialastma som en enhetlig luftvägssjukdom efter 52 veckors behandling och efter 156 veckors behandling.

   Karakterisering av patienternas följsamhet till mepolizumabdoser under 156 veckor.

   Studiedesign och metoder En fas IV-studie, där patienter kommer att samlas in från polikliniker för bronkial astma och öron-näsa-hals från varje plats som täcker befolkningen i Grekland. På grund av den okända situationen kring Covid-19-pandemin, antar vi att denna kliniska studie inte stör arbetsbelastningen i våra kliniker.

   Sammantaget är detta en prospektiv multicenterstudie inklusive 7clinics. Studien kommer att inkludera en screeningperiod på upp till 2 veckor för att bedöma behörighet och erhålla skriftligt informerat samtycke och en mepolizumabbehandlingsperiod på 156 veckor.

   Provtagningsmetod, antal försökspersoner och tidslinjer Studiepopulation Studiepopulationen kommer att bestå av cirka 57 patienter med nasal polypos med eller utan bronkialastma som får mepolizumab i tre år från 18 år och uppåt (inga barn). Klinisk utvärdering av patienter med nasal polypos med eller utan astma kommer att göras enligt European Position Paper om rhinosinusit och nasala polyper. Dessutom kan standardvård för våra patienter förutom mepolizumab innefatta ICS, antihistamin eller LTRA.

   Målinskrivning Vår målprovstorlek beräknades på grundval av att 57 patienter var den minsta provstorleken, beräknad för retikulär basalmembrantjocklek från g-power-analys (som beskrivs i avsnittet om beräkning av provstorlek). Vi lägger till ytterligare 5 % för att säkerställa giltigheten av resultaten vid potentiella patientabstinenser under vår perspektivstudie.

   Studiedeltagande, bedömning och uppföljning:

   Vitala tecken, kommer att utföras vid platsbesök vid screeningbesök, vid baslinjen och var tredje månad. Mätningar kommer att inkludera systoliskt och diastoliskt blodtryck, puls och kroppstemperatur.

   Höjd i centimeter (cm) och kroppsvikt i kilogram (kg) kommer att mätas vid screeningbesök. Body Mass Index (BMI) kommer att beräknas som vikten i kg dividerat med höjden i meter i kvadrat

   Laboratorieutvärdering (hematologi, blodkemi, urinanalys) inkluderar venöst blod och urin kommer att samlas in vid baslinjen. Insamling av urin för kvinnliga försökspersoner kommer också att utvärdera graviditet. IgE-nivåer kommer att utvärderas vid screeningbesök med immunoCAP-tester och kommer att rapporteras som IE/ml.

   Frågeformulär Följande kommer att administreras: 1) Astmakontrollfrågeformuläret (ACQ-5) och Astmakontrolltestet (ACT) för att bedöma aktuell astmakontroll; 2) Astma Quality of Life Questionnaire (AQLQ+12) för att bedöma livskvalitet och psykologisk sjuklighet. För att ytterligare bedöma sömnkvaliteten 1) Athens Insomnia Scale (AIS), 2) Epworth Sleepiness Scale (ESS), 3) St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ) och 4) WHO (Fem) Well-Being Index (WHO-5), 5) Fatigue Severity Scale (FSS), 6) Visual Analogue Scale (VAS) poäng, 7) SinoNasal Outcome Test (SNOT-22), 8) University of Pennsylvania Smell Identification Test (UPSIT).

   FeNO Utandad kväveoxid (NO) kommer att mätas vid baslinjen och var sjätte månad enligt American Thoracic Societys riktlinjer och enligt tillverkaren. FeNO-nivåer kommer att rapporteras som delar per miljard. Mätningar kommer att göras innan spirometri utförs.

   Blodnivåer av eosinofila blodprover. Venösa blodprover kommer att tas mellan kl. 08.00 och 10.00, vid baslinjen och var tredje månad under 156-veckorsperioden med mepolizumabbehandling. Absolut antal eosinofiler i blodet kommer att rapporteras som celler/μl.

   Spirometri Spirometri kommer att utföras med användning av platsens egen utrustning vid besöken (baslinje och var tredje månad) enligt tabell 1. Alla klinikbesök ska ske på morgonen. Under behandlingsperioden kommer spirometrin att uppfylla gällande ATS/ERS-riktlinjer och spirometern måste producera en utskrift av all data som genereras, som ska lagras i patientens anteckningar. Spirometern kommer att kalibreras i enlighet med tillverkarens instruktioner. Spirometri måste utföras samtidigt (±1 timme) som Visit 0-spirometrin. Försökspersoner bör försöka hålla inne kortverkande beta-2-agonister (SABA) i ≥4 timmar och LABA i ≥15 timmar före klinikbesök, om möjligt (GINA 2019). Bedömningar som ska registreras kommer att inkludera FEV1, FVC, FEV1/FVC%, PEF och FEF25-75. Mätningar efter luftrörsvidgare kommer att tas vid varje besök, med 200-400 mcg albuterol eller motsvarande.

   Impulsoscillometri Impulsoscillometri (IOS) kommer att utföras vid baslinjen, efter 52 veckors behandling och efter 156 veckors behandling.

   Lund Mackay Score Lund-Mackay datortomografi (CT) poäng kommer att utvärderas med CT sinus vid baslinjen, efter 52 och 156 veckors behandling enligt tabell 1. Preoperativ och uppföljande CT sinus används i klinisk praxis hos CRS-patienter som standard av vård i sponsorns land (stråldos ca 50mGy). Lund-Mackay CT-stadieindelning kommer att utvärderas blint av 2 olika läkare.

   Peak nasal inspiratory flow (PNIF) PNIF kommer att appliceras vid baslinjen och var sjätte månad fram till 156 veckors behandling. PNIF kommer att utvärderas med Olympus ENF typ P4 fibroskop och en Clement Clark International Limited modell IN-CHECK ORAL ATM-enhet.

   Främre rinonomometri Anterior rinonomometri kommer att utföras vid baslinjen och var 6:e ​​månad fram till 156 veckors behandling med rhinomometrisystemet PDD-301/sr.

   Behandling med biologiska läkemedel Efter avslutade screeningbesök kan deltagaren påbörja behandling med biologisk terapi (mepolizumab) inom en månad. Under terapin kommer försökspersonerna att vara under vård av lungläkaren som remitterade dem till forskargruppen för att delta i studien. Dessa lungläkare kommer att betecknas som "associerade lungläkare". Behandling kommer att tillhandahållas enligt produkttillverkarens instruktioner.

   Associerade lungläkare och otorhinologer som tillhandahåller biologisk behandling under studien måste underteckna ett avtal för att genomföra studien i enlighet med protokollet, för att erkänna att han/hon är ansvarig för medicinskt beteende och för studiens genomförande, och för att säkerställa att associerad (och deras kollegor och anställda) som hjälper till med genomförandet av studien informeras om sina skyldigheter.

   Mekanismer kommer att finnas på plats för att säkerställa att associerad personal får lämplig information och stöd från forskargruppen under hela studien.

   Uppföljning under biologisk terapi: Vid initiering och vid varje besök för biologisk terapi administrering kommer insamling av information (se tabell 1) att utföras av biträdande lungläkare och med stöd av forskargruppen om så begärs av biträdande lungläkare t.ex. forskare via telefon eller ansikte mot ansikte kommer att intervjua patienten. Dessutom kommer överensstämmelse att registreras av läkaren baserat på patientens muntliga bekräftelse. Datum för administrering av läkemedel kommer att registreras vid varje besök, såväl som omedelbara och fördröjda biverkningar.

   Säkerhetsövervakning Registrerade biverkningar (AE) kommer att övervakas och sammanställas efter behov i studierapporterna.

   Biverkningar En biverkning är uppkomsten eller försämringen av alla oönskade tecken, symtom eller medicinskt tillstånd som inträffar efter att studien påbörjats. Medicinska tillstånd/sjukdomar som förekommer innan studieläkemedlet påbörjas betraktas endast som biverkningar om de förvärras efter att studieläkemedlet påbörjats. Onormala laboratorievärden eller testresultat utgör biverkningar endast om de inducerar kliniska tecken eller symtom, anses vara kliniskt signifikanta eller kräver terapi. Även biverkningar relaterade till Covid-19 ingår. Om en partner lungläkare eller forskarpersonal blir medveten om en biverkning associerad med en produkt, kan den rapporteras till tillverkaren enligt deras lokala standardpraxis för spontan biverkningsrapportering. En kopia av rapporten ska också skickas till studiesamordnaren. Allvarliga biverkningar (SAE) kommer att rapporteras på eCRF-sidorna och inom 24 timmar kommer alla utredare att ha ansvaret att informera centralkommittén i Thessaloniki. Sedan kommer centralkommittén att informera den vetenskapliga styrelsen och den grekiska läkarmyndigheten. Dessutom kommer den medicinska och vetenskapliga bedömningen att utövas av varje centers huvudutredare tillsammans med centralkommittén för att besluta om patienten ska avbryta behandlingen eller inte.

   Independent Data Monitoring Committee/Data and Safety Monitoring Board (IDMC/DSMB) är den centrala forskarpersonalen i Thessaloniki (Centralkommittén). För en framgångsrik övervakning av protokollbedömningar kommer IDMC/DSMB att schemalägga ett telefonsamtal varje månad till alla inkluderade platser.

   Konstantinos Porpodis - huvudutredare (docent, lungavdelningen, Aristoteles universitet i Thessaloniki, George Papanikolaou sjukhus, Thessaloniki), Kalliopi Domvri - biträdande klinisk forskningsassistent-studieledare-underutredare, laboratorium för histologi-embryologi, medicinhögskolan, Aristoteles universitet i Thessaloniki .

   Graviditetsrapport Inledningsvis måste kvinnliga patienter vid screening göra ett graviditetstest. Under behandlingen, om en kvinnlig försöksperson rapporterar en graviditet till oss, kommer hon att bli ombedd att dra sig ur studien (för att förhindra partiskhet). Sedan kommer hon att tillfrågas om hon vill fortsätta att få behandlingen utanför detta protokoll och övervakas kl. varje centers poliklinik.

   Förhandsscreening och misslyckade screening Försökspersoner kommer att tilldelas ett studienummer vid tidpunkten för undertecknandet av samtycket. Försökspersoner som undertecknat men inte går vidare till bedömningen av screeningbesök kommer att betraktas som ett misslyckande före screening. Ingen data kommer att samlas in i databasen för dessa ämnen.

   Försökspersoner som genomför minst ett av de två screeningbesöken men som inte påbörjar biologisk behandling kommer att betecknas som screeningmisslyckanden.

   Information som ska samlas in för förhandsgranskning och screeningmisslyckanden kommer att anges i databaskompletteringen.

   Uttagsbesök Om en deltagare beslutar sig för att dra sig ur studien under uppföljningen (av någon annan anledning än förlust för att följa upp), kan de bli ombedd att närvara vid ett utträdesbesök (om utredaren bedömer det nödvändigt och under förutsättning att samtycke). Under besöket kan deltagaren ställas frågor om sina aktuella tillstånd som en del av klinisk informationsinsamling såsom: astma och nasala symtom, exacerbationer och framskridandet av behandlingen som tas emot.

   Blodprovssamling och bearbetning Blodprover kommer att samlas in vid första besöket, 6 månader och efter avslutad behandling.

   Inducerat sputum Inducerat sputum kommer att utföras vid baslinjen före behandlingsstart och efter 52 och 156 veckors behandling enligt ERS Task Force-rapporten där en detaljerad expertkonsensusbaserad rekommendation för inducerad sputumbehandling föreslås. Efter uppsamling av det inducerade sputumet kommer supernatanten av provet att lagras vid -20°C i eppendorfrör tills analysen gjordes.

   Bronkoskopi, bronkial-/näsbiopsier och tvättprovers insamling och bearbetning Endoskopi med bronkialbiopsier, bronkialtvättprov kommer att utföras efter patientens skriftliga medgivande. Mer specifikt kommer ett separat informerat samtycke att inkluderas som ska undertecknas från varje patient. Bronkoskopi kommer att utföras vid tre tidpunkter (baslinje före behandlingsstart, efter 52 veckors behandling och efter 156 veckors behandling). Flexibel bronkoskopi och diagnostiska tekniker utfördes under övervakad anestesivård enligt rekommendationer från American Thoracic Society och British Thoracic Society.

   Nasala biopsier kommer att utföras vid baslinjebesöket, efter 52 och 156 veckors behandling efter patientens skriftliga medgivande. Endoskopisk kirurgisk ingrepp kommer att utföras med nässax genom att skära av vävnaden och sedan ta bort provet. Metoden kommer att utföras som en funktionell endoskopisk sinuskirurgi (FESS), en minimalinvasiv teknik under direkt visualisering. Det endoskopiska ingreppet kräver lokalbedövning. De specifika egenskaperna som kommer att identifieras och bedömas under undersökningen är mittturbinatet och mitten meatus (osteomeatal komplex), anatomisk obstruktion, mucopus och näspolyper.

   Efter de endoskopiska procedurerna fixeras vävnadsprover i uppblåsning eller nedsänkning med formaldehyd eller glutaraldehyd och bäddas in i paraffin. Luftvägarna kommer systematiskt att tas eller tas under diagnostisk dissektion efter patologens bedömning. Ombyggnad av luftvägarna kommer att utvärderas inte bara genom optisk mikroskopi utan också genom elektronmikroskopi.

   Slutligen kommer bronkialtvättprover omedelbart att transporteras till laboratoriet, för att förvaras vid -80 grader. Undersökning av bronkial tvättvätskor kommer att utföras i ett senare skede för att bestämma flera biomarkörer med RT-PCR, ELISA och flödescytometri som beskrivs i nästa stycke.

   För utvärdering av biomarkörer för inflammation i vävnad, blod och andra biologiska vätskor kommer Flow Cytometry Analysis (FACS) med pärlor eller ELIZA-metoden att utföras. Immunfenotyp kommer att analyseras av FACS. Uttryck av biomarkörer kommer att utvärderas med RT-PCR. Biomarkören kommer att utvärderas före initiering, efter 1 år och efter 156 veckors behandling med mepolizumab.

   Mikrobiomanalys Mikrobiomprover kommer att tas vid baslinjen och efter 52 veckors behandling. Kvantifiering av totala bakterier, specifik taxa- och butyratproduktionskapacitet kommer att utföras med qPCR med hjälp av ett BioRad iCycler iQ termiskt cyklersystem (BioRad, Hercules, CA).

   Allergitestning (om tillämpligt) Patienternas atopiska status kommer att utvärderas (om inte tillgänglig) vid screeningbesök av hudpricktestet (SPT) till en standardpanel av aeroallergener för att detektera totala IgE-antikroppar mot olika vanliga inhalationsallergener.

   Provstorleksberäkning G effektanalys Provstorleken beräknas med hjälp av programvaran G*Power (Die Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Tyskland). Skillnaden i retikulär basalmembrantjocklek före och efter mepolizumabbehandling för utredning av luftvägsremodellering hos patienter med kronisk rhinosinusit med näspolyper med eller utan bronkialastma är en av våra primära effektmått. I studien av Diver et al har det rapporterats att det retikulära basalmembranets tjocklek före och efter behandling med tezepelumab var 3,86 ± 1,54 respektive 3,35 ± 1,34. Med hjälp av dessa data och ett dubbelsidigt test, med en styrka på 0,95 och en nivå av statistisk signifikans på 0,05, beräknade vi en effektstorlek på 0,49, vilket indikerade en total urvalsstorlek på 57 deltagare.

   Sarah Diver, Latifa Khalfaoui, Claire Emson, Sally E Wenzel, Andrew Menzies-Gow, Michael E Wechsler, James Johnston, Nestor Molfino, Jane R Parnes, Ayman Megally, Gene Colice, Christopher E Brightling, CASCADE-studieutredare. Effekt av tezepelumab på luftvägsinflammatoriska celler, remodellering och överkänslighet hos patienter med måttlig till svår okontrollerad astma (CASCADE): en dubbelblind, randomiserad, placebokontrollerad fas 2-studie. Lancet Respir Med. 2021 Nov;9(11):1299-1312.

   Statistisk plananalys Statistisk analys kommer att utföras med SPSS (version 21.0 IBM SPSS statistisk programvara, Armonk, NY, USA). Kategoriska variabler kommer att anges som siffror (n) och procentsatser (%), kontinuerliga variabler som medelvärde ± SD om normalt fördelade, eller median- och interkvartilintervall om annat. Vid behov kommer variabler utan normalfördelning att transformeras. P < 0,05 accepterades som statistiskt signifikant. Shapiro-Wilk-test kommer att utföras för att separera parametriska från icke-parametriska variabler. Paired-Samples T-test för parametriskt eller Wilcoxon Signed Ranks-test för icke-parametriska variabler kommer att användas för att upptäcka skillnader i variablerna uppmätta före och efter Mepolizumab-behandling hos CRS-patienter med näspolyper med eller utan astma i både histopatologiska, blod- eller kliniska parametrar .

   Det finns ingen jämförelsearm eftersom varje patient har kontroll över sig själv. Det finns baslinjeegenskaper (kliniska och laboratoriebiomarkörer) som kommer att mätas vid baslinjen, var sjätte månad, efter 52 och 156 veckors avslutad behandling. Primär slutpunkt är förändringar i luftvägsrekonstruktionen både i näsa och bronk.

   Studiens slutpunkter inkluderar också analysen av alla dessa biomarkörer som identifiering av egenskaperna hos icke-svarare och supersvarare. Sekundära effektmått inkluderar också utvärderingen av de biomarkörer som nämns i metoderna som bedömningar. Statistisk analys kommer att utföras initialt med antalet patienter som har avslutat den 52-veckors behandlingsperioden och 156-veckorsperioden. För det andra kommer patienter som inte har avslutat behandlingen att analyseras separat och slutligen kommer dessa två grupper att jämföras med varandra.

   Luftvägsremodellering och övergripande svar på behandling och inom ett och tre år (från baslinje till 1 år efter behandlingsstart) för varje resultat kommer att mätas med ett parat test av beroende prover (parametriska och icke-parametriska parade test) hos varje patient. Då kommer svar på behandling att definieras som förändringen (absolut och % förändring) av resultatet på ett och tre år. Vi kommer att bedöma prediktorer som påverkar svar på behandling (förändring) såsom biomarkörer genom att använda flera regressionsmodeller för varje kliniskt patologiskt resultat. För resultat med fler än 2 observationer per försöksperson under studieperioden kommer vi att använda blandade modeller med de upprepade mätningarna av utfallet. Alla tester kommer att vara 2-sidiga med en statistisk signifikansnivå på 5%.

   Databas

   Datainsamlingsmetod:

   En elektronisk datainsamlingsplattform kommer att vara den metod som används vid baslinjen var tredje månad fram till 1 års uppföljning av denna databas. Under behandlingsbesök kommer pappersblanketter/enkäter att fyllas i av biträdande lungläkare/otorinolaryngolog. Varje sida kommer att lägga in specifika uppgifter i en elektronisk databas. Varje patient identifieras unikt av ett patientnummer som består av platsnumret som tilldelas av den ansvariga övervakningsplatsen och ett sekventiellt nummer tilldelat av utredaren. Efter att ha undertecknat formuläret för informerat samtycke tilldelas patienten nästa löpnummer av utredaren. Webbplatsen måste kontakta den centrala forskningspersonalen och tillhandahålla den efterfrågade identifieringsinformationen för patienten som registrerats i den elektroniska databasen. Behandlingsbesöksblanketterna kommer också att skickas till den centrala forskarpersonalen. Den auktoriserade studiepersonalen kommer att ansvara för datainsamling, redigering och även för att skydda data som samlas in på deras egen plats och databasen säkerhetskopieras dagligen. Kvalitetsgranskning/kontroll kommer att vara det gemensamma ansvaret för alla inblandade individer och den centrala forskarpersonalen [dataförvaringsinstitutet].