Biomarqueurs de la réponse au traitement par mépolizumab chez les patients atteints de polypes nasaux avec ou sans asthme bronchique (CALIOPI)

Hypothèse Identification des caractéristiques pathologiques et cliniques des répondeurs et non-répondeurs au traitement par mépolizumab chez les patients atteints de rhinosinusite chronique avec polypes nasaux avec ou sans asthme bronchique concernant le remodelage des voies respiratoires, les cellules inflammatoires et d'autres biomarqueurs à long terme.

Objectifs/points finaux

Les principaux objectifs de cette étude sont :

1. Évaluation du remodelage des voies respiratoires dans différentes localisations anatomiques des voies respiratoires (nez, bronches) au départ, avant le début du traitement et après 156 semaines de traitement par le mépolizumab.
2. Identification de toutes les caractéristiques du microbiome à divers endroits (nez, pharynx, bronche) chez les répondeurs et les non-répondeurs au traitement par mépolizumab.

Les principaux objectifs secondaires de cette étude sont les suivants :

1. Combinaison de biomarqueurs inflammatoires sélectionnés de divers emplacements anatomiques dans les voies respiratoires dans des échantillons de tissus et de sécrétions pour identifier les non-répondeurs et les répondeurs au mépolizumab après 152 semaines de traitement par le mépolizumab.

2. Démontrer l'effet du traitement par le mépolizumab chez les patients atteints de polypes nasaux avec ou sans asthme bronchique grâce à la réduction du nombre de patients nécessitant une intervention chirurgicale après 52 semaines de traitement en tenant compte du remodelage des voies respiratoires, des cellules inflammatoires et des biomarqueurs de l'inflammation et des caractéristiques cliniques.

   Autres objectifs/critères Toute amélioration des paramètres respiratoires dans le contrôle de l'asthme et de la qualité de vie des patients y compris la qualité du sommeil pendant le traitement par mépolizumab chez les patients atteints de polypes nasaux avec ou sans asthme bronchique.

   Tous les biomarqueurs possibles de réponse considérant les polypes nasaux et l'asthme bronchique comme une maladie unifiée des voies respiratoires après 52 semaines de traitement et après 156 semaines de traitement.

   Caractérisation de l'observance des patients aux doses de mépolizumab pendant 156 semaines.

   Conception et méthodes de l'étude Une étude de phase IV, où les patients seront collectés dans des cliniques externes d'asthme bronchique et d'oto-rhino-laryngologie de chaque site couvrant la population de la Grèce. En raison de la situation inconnue concernant la pandémie de Covid-19, nous supposons que cette étude clinique n'interfère pas avec la charge de travail dans nos cliniques.

   Globalement, il s'agit d'une étude prospective multicentrique incluant 7 cliniques. L'étude comprendra une période de sélection pouvant aller jusqu'à 2 semaines pour évaluer l'éligibilité et obtenir un consentement éclairé écrit et une période de traitement au mépolizumab de 156 semaines.

   Méthode d'échantillonnage, nombre de sujets et délais Population d'étude La population d'étude sera composée d'environ 57 patients atteints de polypose nasale avec ou sans asthme bronchique recevant du mépolizumab depuis trois ans âgés de 18 ans et plus (pas d'enfant). L'évaluation clinique des patients atteints de polypose nasale avec ou sans asthme sera effectuée conformément à la prise de position européenne sur la rhinosinusite et les polypes nasaux. En outre, la norme de soins pour nos patients en dehors du mépolizumab peut inclure des CSI, des antihistaminiques ou des LTRA.

   Recrutement cible Notre taille d'échantillon cible a été calculée sur la base que 57 patients était la taille d'échantillon minimale, calculée pour l'épaisseur de la membrane basale réticulaire à partir de l'analyse de puissance g (comme décrit dans le paragraphe de calcul de la taille de l'échantillon). Nous rajoutons 5% supplémentaires pour assurer la validité des résultats en cas d'éventuels abandons de patients lors de notre étude prospective.

   Participation à l'étude, évaluation et suivi :

   Les signes vitaux seront effectués lors des visites sur site lors de la visite de dépistage, au départ et tous les 3 mois. Les mesures comprendront la pression artérielle systolique et diastolique, le pouls et la température corporelle.

   La taille en centimètres (cm) et le poids corporel en kilogrammes (kg) seront mesurés lors des visites de dépistage. L'indice de masse corporelle (IMC) sera calculé comme le poids en kg divisé par la taille en mètres au carré

   L'évaluation en laboratoire (hématologie, chimie du sang, analyse d'urine) comprend le sang veineux et l'urine sera prélevée au départ. La collecte d'urine pour les sujets féminins permettra également d'évaluer la grossesse. Les niveaux d'IgE seront évalués lors de la visite de dépistage à l'aide de tests immunoCAP et seront rapportés en UI/mL.

   Questionnaires Les éléments suivants seront administrés : 1) le questionnaire de contrôle de l'asthme (ACQ-5) et le test de contrôle de l'asthme (ACT) pour évaluer le contrôle actuel de l'asthme ; 2) le Asthma Quality of Life Questionnaire (AQLQ+12) pour évaluer la qualité de vie et la morbidité psychologique. Pour évaluer davantage la qualité du sommeil 1) Échelle d'insomnie d'Athènes (AIS), 2) Échelle de somnolence d'Epworth (ESS), 3) Questionnaire respiratoire de St. George (SGRQ) et 4) Indice de bien-être de l'OMS (cinq) (OMS-5), 5) Échelle de gravité de la fatigue (FSS), 6) Score de l'échelle visuelle analogique (EVA), 7) Score du test de résultat sino-nasal (SNOT-22), 8) Score du test d'identification des odeurs de l'Université de Pennsylvanie (UPSIT).

   FeNO L'oxyde nitrique expiré (NO) sera mesuré au départ et tous les 6 mois conformément aux directives de l'American Thoracic Society et comme spécifié par le fabricant. Les niveaux de FeNO seront rapportés en parties par milliard. Les mesures seront effectuées avant la réalisation de la spirométrie.

   Niveaux d'éosinophiles sanguins Des échantillons de sang veineux seront prélevés entre 8 h et 10 h, au départ et tous les 3 mois pendant la période de 156 semaines de traitement par le mépolizumab. Le nombre absolu d'éosinophiles sanguins sera rapporté en cellules/μl.

   Spirométrie La spirométrie sera effectuée, en utilisant le propre équipement du site lors des visites (de base et tous les 3 mois) comme spécifié dans le tableau 1. Toutes les visites à la clinique doivent avoir lieu le matin. Pendant la période de traitement, la spirométrie respectera les directives actuelles de l'ATS/ERS et le spiromètre doit produire une impression de toutes les données générées, qui doivent être stockées dans les notes du sujet. Le spiromètre sera étalonné conformément aux instructions du fabricant. La spirométrie doit être effectuée en même temps (±1 heure) que la spirométrie de la visite 0. Les sujets doivent essayer de suspendre les bêta-2-agonistes à courte durée d'action (SABA) pendant ≥ 4 heures et les LABA pendant ≥ 15 heures avant la visite à la clinique, si possible (GINA 2019). Les évaluations à enregistrer comprendront FEV1, FVC, FEV1/FVC%, PEF et FEF25-75. Des mesures post-bronchodilatatrices seront prises à chaque visite, en utilisant 200-400mcg d'albutérol ou équivalent.

   Oscillométrie impulsionnelle L'oscillométrie impulsionnelle (IOS) sera effectuée au départ, après 52 semaines de traitement et après 156 semaines de traitement.

   Score de Lund Mackay Le score de tomodensitométrie (CT) de Lund-Mackay sera évalué par CT sinus au départ, après 52 et 156 semaines de traitement, comme indiqué dans le tableau 1. Le CT sinus préopératoire et de suivi est utilisé en pratique clinique chez les patients atteints de SRC en standard. de soins dans le pays du parrain (dose de rayonnement d'environ 50 mGy). La stadification CT de Lund-Mackay sera évaluée en aveugle par 2 cliniciens différents.

   Débit inspiratoire nasal maximal (PNIF) Le PNIF sera appliqué au départ et tous les 6 mois jusqu'à 156 semaines de traitement. Le PNIF sera évalué à l'aide d'un fibroscope Olympus ENF de type P4 et d'un appareil IN-CHECK ORAL ATM de Clement Clark International Limited.

   Rhinomanométrie antérieure La rhinomanométrie antérieure sera effectuée au départ et tous les 6 mois jusqu'à 156 semaines de traitement par le système de rhinomanométrie PDD-301/sr.

   Thérapie avec des produits biologiques À la fin des visites de dépistage, le participant peut commencer un traitement avec une thérapie biologique (mépolizumab) dans un délai d'un mois. Pendant la thérapie, les sujets seront sous la garde du pneumologue qui les a référés au groupe de recherche pour participer à l'étude. Ces pneumologues seront appelés « pneumologues associés ». Le traitement sera fourni conformément aux instructions du fabricant du produit.

   Les pneumologues et otorhinologues associés fournissant un traitement biologique au cours de l'étude devront signer un accord pour mener l'étude conformément au protocole, reconnaître qu'il est responsable de la conduite médicale et de la conduite de l'étude, et s'assurer que l'associé (et leurs collègues et employés) participant à la réalisation de l'étude sont informés de leurs obligations.

   Des mécanismes seront en place pour s'assurer que le personnel associé reçoit les informations et le soutien appropriés de la part du groupe de recherche tout au long de l'étude.

   Suivi pendant la thérapie biologique : Au début et à chaque visite pour l'administration de la thérapie biologique, la collecte d'informations (voir tableau 1) sera effectuée par le pneumologue associé, et avec le soutien du groupe de recherche si demandé par le pneumologue associé, par exemple, les chercheurs par téléphone ou un contact en face-à-face interrogera le patient. De plus, la conformité sera enregistrée par le médecin sur la base de la confirmation orale du patient. La date d'administration du médicament sera enregistrée à chaque visite, ainsi que les effets indésirables immédiats et différés.

   Surveillance de la sécurité Les événements indésirables (EI) enregistrés seront surveillés et rassemblés selon les besoins dans les rapports d'étude.

   Événements indésirables Un événement indésirable est l'apparition ou l'aggravation de tout signe, symptôme ou état pathologique indésirable survenant après le début de l'inscription à l'étude. Les conditions médicales / maladies présentes avant le début du médicament à l'étude ne sont considérées comme des événements indésirables que si elles s'aggravent après le début du médicament à l'étude. Des valeurs de laboratoire ou des résultats de test anormaux ne constituent des événements indésirables que s'ils induisent des signes ou des symptômes cliniques, sont considérés comme cliniquement significatifs ou nécessitent un traitement. De plus, les événements indésirables liés au Covid-19 sont inclus. Si un pneumologue partenaire ou un membre du personnel de recherche prend connaissance d'un EI associé à un produit, celui-ci peut être signalé au fabricant conformément à sa pratique standard locale en matière de signalement spontané d'EI. Une copie du rapport doit également être envoyée au coordinateur de l'étude. Les événements indésirables graves (SAE) seront signalés dans les pages eCRF et dans les 24 heures, tous les enquêteurs auront la responsabilité d'informer le Comité central à Thessalonique. Ensuite, le Comité central informera le conseil scientifique et l'Agence médicale grecque. En outre, un jugement médical et scientifique sera exercé par l'investigateur principal de chaque centre auprès du Comité central, pour décider si le sujet doit arrêter le traitement ou non.

   Le Comité indépendant de surveillance des données/Conseil de surveillance des données et de la sécurité (IDMC/DSMB) est le personnel de recherche central à Thessalonique (Comité central). Pour une surveillance réussie des évaluations de protocole, IDMC/DSMB planifiera un appel téléphonique tous les mois à tous les sites inclus.

   Konstantinos Porpodis -Chercheur principal (Professeur associé, Département de pneumologie, Université Aristote de Thessalonique, Hôpital George Papanikolaou, Thessalonique), Kalliopi Domvri - Associé de recherche clinique-Responsable d'étude-Sous-chercheur, Laboratoire d'histologie-embryologie, Faculté de médecine, Université Aristote de Thessalonique .

   Rapport de grossesse Initialement, les patientes lors du dépistage devront faire un test de grossesse. Pendant le traitement, si une femme nous signale une grossesse, il lui sera demandé de se retirer de l'étude (pour éviter les biais) Ensuite, il lui sera demandé si elle souhaite continuer à recevoir le traitement en dehors de ce protocole et être suivie à clinique externe de chaque centre.

   Présélection et échecs de sélection Les sujets se verront attribuer un numéro d'étude au moment de la signature du consentement. Les sujets qui ont signé mais ne progressent pas vers l'évaluation des visites de dépistage seront considérés comme un échec de présélection. Aucune donnée ne sera saisie dans la base de données pour ces sujets.

   Les sujets qui terminent au moins une des deux visites de dépistage, mais qui n'initient pas de traitement biologique seront désignés comme des échecs de dépistage.

   Les informations à collecter pour le pré-dépistage et les échecs de dépistage seront détaillées dans la complétion de la base de données.

   Visite de retrait Si un participant décide de se retirer de l'étude au cours du suivi (pour une raison autre que la perte de suivi), il peut être invité à assister à une visite de retrait (si cela est jugé nécessaire par l'investigateur et sous réserve du consentement). Au cours de la visite, le participant peut se voir poser des questions sur son état actuel dans le cadre de la collecte d'informations cliniques telles que : l'asthme et les symptômes nasaux, les exacerbations et la progression du traitement reçu.

   Collecte et traitement des échantillons de sang Les échantillons de sang seront prélevés lors de la visite de référence, à 6 mois et après la fin du traitement.

   L'expectoration induite sera effectuée au départ avant le début du traitement et après 52 et 156 semaines de traitement selon le rapport du groupe de travail de l'ERS où une recommandation détaillée basée sur un consensus d'experts pour le traitement de l'expectoration induite est suggérée. Après avoir collecté les expectorations induites, le surnageant de l'échantillon sera stocké à -20 °C dans des tubes Eppendorf jusqu'à ce que l'analyse soit effectuée.

   Bronchoscopie, biopsies bronchiques/nasales et collecte et traitement des échantillons de lavage Endoscopie avec biopsies bronchiques, échantillon de lavage bronchique sera effectué avec le consentement écrit du patient. En particulier, un consentement éclairé séparé sera inclus pour être signé par chaque patient. La bronchoscopie sera réalisée à trois moments (au départ avant le début du traitement, après 52 semaines de traitement et après 156 semaines de traitement). La bronchoscopie flexible et les techniques de diagnostic ont été réalisées sous anesthésie surveillée, comme recommandé par l'American Thoracic Society et la British Thoracic Society.

   Des biopsies nasales seront effectuées lors de la visite de référence, après 52 et 156 semaines de traitement, avec le consentement écrit du patient. La procédure chirurgicale endoscopique sera réalisée avec des ciseaux nasaux en coupant le tissu puis en retirant l'échantillon. La méthode sera réalisée comme une chirurgie endoscopique fonctionnelle des sinus (FESS), une technique peu invasive sous visualisation directe. La procédure endoscopique nécessite une anesthésie locale. Les caractéristiques spécifiques qui seront identifiées et évaluées lors de l'examen sont le cornet moyen et le méat moyen (complexe ostéoméatal), l'obstruction anatomique, la muqueuse et les polypes nasaux.

   Après les procédures endoscopiques, les échantillons de tissus seront fixés par gonflage ou immersion à l'aide de formaldéhyde ou de glutaraldéhyde et inclus dans de la paraffine. Les voies respiratoires seront systématiquement prélevées ou obtenues lors de la dissection diagnostique à la discrétion du pathologiste. Le remodelage des voies respiratoires sera évalué non seulement par microscopie optique mais également par microscopie électronique.

   Enfin, les échantillons de lavage bronchique seront immédiatement transportés au laboratoire, pour être stockés à -80 degrés. L'examen des liquides de lavage bronchique sera effectué ultérieurement pour déterminer plusieurs biomarqueurs par RT-PCR, ELISA et cytométrie en flux comme décrit dans le paragraphe suivant.

   Pour l'évaluation des biomarqueurs de l'inflammation dans les tissus, le sang et d'autres fluides biologiques, une analyse par cytométrie en flux (FACS) avec des billes ou la méthode ELIZA sera effectuée. L'immunophénotype sera analysé par FACS. L'expression des biomarqueurs sera évaluée par RT-PCR. Le biomarqueur sera évalué avant l'initiation, après 1 an et après 156 semaines de traitement par mépolizumab.

   Analyse du microbiome Des échantillons de microbiome seront prélevés au départ et après 52 semaines de traitement. La quantification des bactéries totales, des taxons spécifiques et de la capacité de production de butyrate sera effectuée par qPCR à l'aide d'un système de cycleur thermique BioRad iCycler iQ (BioRad, Hercules, CA).

   Test d'allergie (le cas échéant) Le statut atopique des patients sera évalué (s'il n'est pas disponible) lors de la visite de dépistage par le test cutané (SPT) à un panel standard d'aéroallergènes pour détecter les anticorps IgE totaux contre divers allergènes inhalés courants.

   Calcul de la taille de l'échantillon Analyse de puissance G La taille de l'échantillon est calculée à l'aide du logiciel G*Power (Die Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Allemagne). La différence d'épaisseur de la membrane basale réticulaire avant et après le traitement par mépolizumab pour l'étude du remodelage des voies respiratoires chez les patients atteints de rhinosinusite chronique avec polypes nasaux avec ou sans asthme bronchique est l'un de nos principaux critères d'évaluation. Dans l'étude de Diver et al, il a été rapporté que l'épaisseur de la membrane basale réticulaire avant et après le traitement par le tézépelumab était de 3,86 ± 1,54 contre 3,35 ± 1,34 respectivement. En utilisant ces données et un test bilatéral, avec une puissance à 0,95 et un niveau de signification statistique à 0,05, nous avons calculé une taille d'effet de 0,49, ce qui indiquait une taille d'échantillon totale de 57 participants.

   Sarah Diver, Latifa Khalfaoui, Claire Emson, Sally E Wenzel, Andrew Menzies-Gow, Michael E Wechsler, James Johnston, Nestor Molfino, Jane R Parnes, Ayman Megally, Gene Colice, Christopher E Brightling, investigateurs de l'étude CASCADE. Effet du tézépelumab sur les cellules inflammatoires des voies respiratoires, le remodelage et l'hyperréactivité chez les patients atteints d'asthme modéré à sévère non contrôlé (CASCADE) : un essai de phase 2 en double aveugle, randomisé, contrôlé par placebo. Lancette Respir Med. 2021 novembre;9(11):1299-1312.

   Analyse du plan statistique L'analyse statistique sera effectuée à l'aide du SPSS (logiciel statistique IBM SPSS version 21.0, Armonk, NY, États-Unis). Les variables catégorielles seront exprimées en nombres (n) et en pourcentages (%), les variables continues en moyenne ± SD si elles sont normalement distribuées, ou médianes et intervalles interquartiles dans le cas contraire. Si nécessaire, les variables sans distribution normale seront transformées. P < 0,05 a été accepté comme statistiquement significatif. Le test de Shapiro-Wilk sera effectué afin de séparer les variables paramétriques des variables non paramétriques. Le test T à échantillons appariés pour les paramètres paramétriques ou le test de rangs signés de Wilcoxon pour les variables non paramétriques seront utilisés pour détecter les différences dans les variables mesurées avant et après le traitement par mépolizumab chez les patients atteints de SRC atteints de polypes nasaux avec ou sans asthme dans les paramètres histopathologiques, sanguins ou cliniques .

   Il n'y a pas de bras de comparaison car chaque patient est témoin de lui-même. Il existe des caractéristiques de base (biomarqueurs cliniques et de laboratoire) qui seront mesurées au départ, tous les 6 mois, après 52 et 156 semaines de fin de traitement. Le critère d'évaluation principal est la modification du remodelage des voies respiratoires, à la fois dans le nez et les bronches.

   Les critères d'évaluation de l'étude comprennent également l'analyse de tous ces biomarqueurs ainsi que l'identification des caractéristiques des non-répondeurs et des super-répondeurs. De plus, les critères d'évaluation secondaires incluent l'évaluation des biomarqueurs mentionnés dans les méthodes en tant qu'évaluations. Une analyse statistique sera effectuée initialement avec le nombre de patients ayant terminé la période de traitement de 52 semaines et la période de 156 semaines. Dans un second temps, les patients n'ayant pas terminé le traitement seront analysés séparément et enfin ces deux groupes vont être comparés l'un à l'autre.

   Le remodelage des voies respiratoires et la réponse globale au traitement et dans un et trois ans (de la ligne de base à 1 an après le début du traitement) pour chaque résultat seront mesurés avec un test apparié d'échantillons dépendants (tests appariés paramétriques et non paramétriques) chez chaque patient. Ensuite, la réponse au traitement sera définie comme le changement (changement absolu et pourcentage) du résultat en un et trois ans. Nous évaluerons les prédicteurs influençant la réponse au traitement (changement) tels que les biomarqueurs en utilisant des modèles de régression multiple pour chaque résultat clinicopathologique. Pour les résultats avec plus de 2 observations par sujet pendant la période d'étude, nous utiliserons des modèles mixtes utilisant les mesures répétées du résultat. Tous les tests seront bilatéraux avec un niveau de signification statistique à 5 %.

   Base de données

   Méthode de collecte des données :

   Une plate-forme électronique de collecte de données sera la méthode utilisée au départ tous les 3 mois jusqu'à 1 an de suivi pour cette base de données. Lors des visites de traitement, des formulaires/questionnaires papier seront remplis par le pneumologue/oto-rhino-laryngologiste associé. Chaque site entrera des données spécifiques dans une base de données électronique. Chaque patient est identifié de manière unique par un numéro de sujet composé du numéro de site attribué par le site de surveillance responsable et d'un numéro séquentiel attribué par l'investigateur. Lors de la signature du formulaire de consentement éclairé, le patient se voit attribuer le numéro séquentiel suivant par l'investigateur. Le site doit contacter le personnel de recherche central et fournir les informations d'identification demandées pour le patient telles qu'elles sont enregistrées dans la base de données électronique. Les formulaires de visite de traitement seront également envoyés au personnel de recherche central. Le personnel autorisé de l'étude sera responsable de la collecte, de l'édition et de la protection des données collectées sur leur propre site et la base de données est sauvegardée quotidiennement. L'examen/le contrôle de la qualité relèvera de la responsabilité conjointe de toutes les personnes impliquées et du personnel de recherche central [dépositaire des données].