Biomarkører for respons på Mepolizumab-behandling hos patienter med næsepolypper med eller uden bronkial astma (CALIOPI)

Hypotese Identifikation af patologiske og kliniske karakteristika for respondere og non-responders på mepolizumab-behandling hos patienter med kronisk rhinosinusitis med nasale polypper med eller uden bronkial astma vedrørende luftvejsremodellering, inflammatoriske celler og andre biomarkører på lang sigt.

Mål/endepunkter

De primære mål for denne undersøgelse er:

1. Evaluering af ombygningen af ​​luftvejene i forskellige anatomiske placeringer af luftvejene (næse, bronchus) ved baseline-før behandlingsstart og efter 156 ugers mepolizumab-behandling.
2. Identifikation af eventuelle karakteristika i mikrobiom på forskellige steder (næse, svælg, bronkier) hos respondere og ikke-responderere på mepolizumab-behandling.

De vigtigste sekundære mål for denne undersøgelse er:

1. Kombination af udvalgte inflammatoriske biomarkører af forskellige anatomiske placeringer i luftvejene i vævs- og sekretprøver for at identificere non-respondere og respondere på mepolizumab efter 152 ugers mepolizumab-behandling.

2. At demonstrere effekten af ​​mepolizumab-behandling hos patienter med næsepolypper med eller uden bronkial astma gennem reduktion af patienter, der skal opereres efter 52 ugers behandling under hensyntagen til luftvejsremodellering, inflammatoriske celler og biomarkører for inflammation og kliniske karakteristika.

   Andre mål/endepunkter Enhver forbedring af respiratoriske parametre i astmakontrol og i patienters livskvalitet, herunder søvnkvalitet under mepolizumabbehandling hos patienter med næsepolypper med eller uden bronkial astma.

   Enhver mulig biomarkør for respons, der betragter næsepolypper og bronkial astma som en samlet luftvejssygdom efter 52 ugers behandling og efter 156 ugers behandling.

   Karakterisering af patienters overholdelse af mepolizumab-doser i 156 uger.

   Studiedesign og metoder Et fase IV-studie, hvor patienter vil blive indsamlet fra ambulatorier for bronkial astma og øre-næse-hals fra hvert sted, som dækker befolkningen i Grækenland. På grund af den ukendte situation vedrørende Covid-19-pandemien, antager vi, at denne kliniske undersøgelse ikke forstyrrer arbejdsbyrden i vores klinikker.

   Samlet set er dette en prospektiv multicenterundersøgelse, der inkluderer 7 klinikker. Undersøgelsen vil omfatte en screeningsperiode på op til 2 uger for at vurdere egnethed og indhente skriftligt informeret samtykke og en mepolizumab-behandlingsperiode på 156 uger.

   Prøveudtagningsmetode, antal forsøgspersoner og tidslinjer Undersøgelsespopulation Undersøgelsespopulationen vil bestå af ca. 57 patienter med nasal polypose med eller uden bronkial astma, der får mepolizumab i tre år på 18 år og derover (ingen børn). Klinisk evaluering af patienter med nasal polypose med eller uden astma vil blive foretaget i henhold til European Position Paper om rhinosinusitis og nasale polypper. Desuden kan standardbehandling for vores patienter bortset fra mepolizumab omfatte ICS, antihistamin eller LTRA'er.

   Målindskrivning Vores målprøvestørrelse blev beregnet på grundlag af, at 57 patienter var den mindste prøvestørrelse, beregnet for retikulær basalmembrantykkelse fra g-power-analyse (som beskrevet i afsnittet om beregning af prøvestørrelse). Vi tilføjer yderligere 5 % for at sikre validiteten af ​​resultaterne i tilfælde af potentielle patientabstinenser under vores perspektivundersøgelse.

   Studiedeltagelse, vurdering og opfølgning:

   Vitale tegn, vil blive udført ved besøg på stedet ved screeningsbesøg, ved baseline og hver 3. måned. Målinger vil omfatte systolisk og diastolisk blodtryk, puls og kropstemperatur.

   Højde i centimeter (cm) og kropsvægt i kilogram (kg) vil blive målt ved screeningsbesøg. Body Mass Index (BMI) vil blive beregnet som vægten i kg divideret med højden i meter i kvadrat

   Laboratorieevaluering (hæmatologi, blodkemi, urinanalyse) omfatter venøst ​​blod, og urin vil blive opsamlet ved baseline. Indsamling af urin til kvindelige forsøgspersoner vil også evaluere graviditet. IgE-niveauer vil blive evalueret ved screeningsbesøg ved hjælp af immunoCAP-tests og vil blive rapporteret som IE/ml.

   Spørgeskemaer Følgende vil blive administreret: 1) Astmakontrolspørgeskemaet (ACQ-5) og astmakontroltesten (ACT) for at vurdere den aktuelle astmakontrol; 2) Astma Quality of Life Questionnaire (AQLQ+12) til vurdering af livskvalitet og psykologisk sygelighed. For yderligere at vurdere søvnkvalitet 1) Athens Insomnia Scale (AIS), 2) Epworth Sleepiness Scale (ESS), 3) St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ) og 4) WHO (Fem) Well-Being Index (WHO-5), 5) Fatigue Severity Scale (FSS), 6) Visual Analogue Scale (VAS) score, 7) SinoNasal Outcome Test (SNOT-22) score, 8) University of Pennsylvania Smell Identification Test (UPSIT) score.

   FeNO Udåndet nitrogenoxid (NO) vil blive målt ved baseline og hver 6. måned i henhold til American Thoracic Society Guidelines og som specificeret af producenten. FeNO-niveauer vil blive rapporteret som dele pr. milliard. Der vil blive foretaget målinger før spirometri udføres.

   Eosinofilniveauer i blodet Venøse blodprøver vil blive udtaget mellem kl. 8 til 10, ved baseline og hver 3. måned i løbet af 156-ugers perioden med mepolizumab-behandling. Absolut eosinofiltal i blodet vil blive rapporteret som celler/μl.

   Spirometri Spirometri vil blive udført ved brug af stedets eget udstyr ved besøgene (baseline og hver 3. måned) som angivet i tabel 1. Alle klinikbesøg skal ske om morgenen. I behandlingsperioden vil spirometrien opfylde de gældende ATS/ERS retningslinjer, og spirometeret skal producere en udskrift af alle genererede data, som skal gemmes i forsøgspersonens noter. Spirometeret vil blive kalibreret i overensstemmelse med producentens instruktioner. Spirometri skal udføres på samme tidspunkt (±1 time) med Visit 0-spirometrien. Forsøgspersoner bør forsøge at tilbageholde korttidsvirkende beta-2-agonister (SABA'er) i ≥4 timer og LABA'er i ≥15 timer før klinikbesøg, hvis det er muligt (GINA 2019). De vurderinger, der skal registreres, vil omfatte FEV1, FVC, FEV1/FVC%, PEF og FEF25-75. Post-bronkodilatatormålinger vil blive taget ved hvert besøg med 200-400mcg albuterol eller tilsvarende.

   Impulsoscillometri Impulsoscillometri (IOS) vil blive udført ved baseline, efter 52 ugers behandling og efter 156 ugers behandling.

   Lund Mackay Score Lund-Mackay computertomografi (CT) score vil blive evalueret ved CT sinus ved baseline efter 52 og 156 ugers behandling som specificeret i tabel 1. Præoperativ og opfølgende CT sinus bruges i klinisk praksis hos CRS-patienter som standard pleje i sponsorens land (stråledosis ca. 50mGy). Lund-Mackay CT-stadieinddeling vil blive evalueret blindt af 2 forskellige klinikere.

   Peak nasal inspiratory flow (PNIF) PNIF vil blive påført ved baseline og hver 6. måned indtil 156 ugers behandling. PNIF vil blive evalueret ved hjælp af Olympus ENF type P4 fibroskop og en Clement Clark International Limited model IN-CHECK ORAL ATM enhed.

   Anterior rhinomometri Anterior rhinomometri vil blive udført ved baseline og hver 6. måned indtil 156-ugers behandling med rhinomometrisystem PDD-301/sr.

   Behandling med biologiske lægemidler Efter afslutning af screeningsbesøgene kan deltageren påbegynde behandling med biologisk terapi (mepolizumab) inden for en måned. Under terapien vil forsøgspersoner være under behandling af lungelægen, som havde henvist dem til forskergruppen for at deltage i undersøgelsen. Disse lungelæger vil blive betegnet som 'associerede lungelæger. Behandling vil blive givet i henhold til produktproducentens instruktioner.

   Associerede lungelæger og otorhinologer, der yder biologisk behandling under undersøgelsen, skal underskrive en aftale om at udføre undersøgelsen i overensstemmelse med protokollen, for at anerkende, at han/hun er ansvarlig for medicinsk adfærd og for undersøgelsesudførelse, og for at sikre, at associerede (og deres kolleger og medarbejdere), der hjælper med gennemførelsen af ​​undersøgelsen, informeres om deres forpligtelser.

   Mekanismer vil være på plads for at sikre, at associeret personale modtager den relevante information og støtte fra forskergruppen under hele undersøgelsen.

   Opfølgning under biologisk terapi: Ved påbegyndelse og ved hvert besøg til biologisk terapi vil indsamling af information (se tabel 1) blive foretaget af den associerede lungelæge og med støtte fra forskergruppen, hvis den associerede lungelæge anmoder om det, f.eks. forskere via telefon eller ansigt-til-ansigt kontakt vil interviewe patienten. Ydermere vil overholdelse blive registreret fra lægen baseret på patientens mundtlige bekræftelse. Datoform for lægemiddeladministration vil blive registreret ved hvert besøg, såvel som øjeblikkelige og forsinkede bivirkninger.

   Sikkerhedsmonitorering Registrerede uønskede hændelser (AE'er) vil blive overvåget og sammenstillet efter behov i undersøgelsesrapporter.

   Uønskede hændelser En uønsket hændelse er forekomsten eller forværringen af ​​ethvert uønsket tegn, symptom eller medicinsk tilstand, der opstår efter påbegyndelse af undersøgelsen. Medicinske tilstande/sygdomme, der er til stede før påbegyndelse af forsøgslægemidlet, betragtes kun som bivirkninger, hvis de forværres efter påbegyndelse af forsøgslægemidlet. Unormale laboratorieværdier eller testresultater udgør kun bivirkninger, hvis de inducerer kliniske tegn eller symptomer, anses for at være klinisk signifikante eller kræver behandling. Også bivirkninger relateret til Covid-19 er inkluderet. Hvis en partner lungelæge eller forskningspersonale bliver opmærksom på en AE forbundet med et produkt, kan det rapporteres til producenten i henhold til deres lokale standardpraksis for spontan AE-rapportering. En kopi af rapporten skal også sendes til studiekoordinatoren. Alvorlige uønskede hændelser (SAE) vil blive rapporteret på eCRF-siderne, og inden for 24 timer vil alle efterforskere have ansvaret for at informere centralkomiteen i Thessaloniki. Derefter vil centralkomiteen informere den videnskabelige bestyrelse og det græske lægeagentur. Ligeledes vil den medicinske og videnskabelige vurdering blive udøvet af hvert centers hovedefterforsker sammen med centralkomiteen for at beslutte, om forsøgspersonen skal stoppe behandlingen eller ej.

   Det uafhængige dataovervågningsudvalg/data- og sikkerhedsovervågningsudvalget (IDMC/DSMB) er det centrale forskningspersonale i Thessaloniki (Centraludvalget). For en vellykket overvågning af protokolvurderinger vil IDMC/DSMB planlægge et telefonopkald hver måned til alle de inkluderede steder.

   Konstantinos Porpodis - Principal investigator (lektor, lungeafdelingen, Aristoteles University of Thessaloniki, George Papanikolaou Hospital, Thessaloniki), Kalliopi Domvri - Clinical Research Associate-Study Manager-Sub Investigator, Laboratory of Histology-Embryology, Medical School, Aristoteles University of Thes .

   Graviditetsrapport I første omgang skal kvindelige patienter ved screening lave en graviditetstest. Under behandlingen, hvis en kvindelig forsøgsperson rapporterer en graviditet til os, vil hun blive bedt om at trække sig fra undersøgelsen (for at forhindre skævhed). Derefter vil hun blive spurgt, om hun gerne vil fortsætte med at få behandlingen uden for denne protokol og blive overvåget kl. hvert centers ambulatorium.

   Pre-screening og screeningsfejl Forsøgspersoner vil blive tildelt et undersøgelsesnummer på tidspunktet for underskrivelsen af ​​samtykket. Forsøgspersoner, der har underskrevet, men ikke går videre til vurderingen af ​​screeningsbesøg, vil blive betragtet som en fejl på forhånd. Ingen data vil blive fanget i databasen for disse emner.

   Forsøgspersoner, der gennemfører mindst et af de to screeningsbesøg, men ikke påbegynder biologisk behandling, vil blive udpeget som screeningsfejl.

   Oplysninger, der skal indsamles til forudgående screening og screeningsfejl, vil blive beskrevet i databaseudfyldelsen.

   Tilbagetrækningsbesøg Hvis en deltager beslutter at trække sig fra undersøgelsen under opfølgningen (af enhver anden grund end tab for at følge op), kan de blive bedt om at deltage i et tilbagetrækningsbesøg (hvis det skønnes nødvendigt af investigator og med forbehold for samtykke). Under besøget kan deltageren blive stillet spørgsmål om deres aktuelle tilstande som en del af klinisk informationsindsamling, såsom: astma og nasale symptomer, eksacerbationer og forløbet af behandlingen, der modtages.

   Blodprøvetagning og behandling Blodprøver vil blive indsamlet ved baseline besøg, 6 måneder og efter afslutning af behandlingen.

   Induceret sputum Induceret sputum vil blive udført ved baseline før behandlingsstart og efter 52 og 156 ugers behandling i henhold til ERS Task Force-rapporten, hvor en detaljeret ekspertkonsensusbaseret anbefaling for induceret sputumbehandling er foreslået. Efter opsamling af det inducerede sputum vil supernatanten af ​​prøven blive opbevaret ved -20°C i eppendorf-rør, indtil analysen er udført.

   Bronkoskopi, bronchial/nasal biopsi og vaskeprøvers indsamling og behandling Endoskopi med bronchial biopsier, bronchial vaskeprøve vil blive udført efter patientens skriftlige samtykke. Specifikt vil der blive inkluderet et separat informere samtykke, som skal underskrives fra hver patient. Bronkoskopi vil blive udført på tre tidspunkter (baseline før behandlingsstart, efter 52 ugers behandling og efter 156 ugers behandling). Fleksibel bronkoskopi og diagnostiske teknikker blev udført under overvåget anæstesibehandling som anbefalet af American Thoracic Society og British Thoracic Society.

   Næsebiopsier vil blive udført ved baseline besøg efter 52 og 156 ugers behandling efter patientens skriftlige samtykke. Endoskopisk kirurgisk procedure vil blive udført med nasal saks ved at skære vævet over og derefter fjerne prøven. Metoden vil blive udført som en funktionel endoskopisk sinuskirurgi (FESS), en minimalt invasiv teknik under direkte visualisering. Den endoskopiske procedure kræver lokalbedøvelse. De specifikke træk, der vil blive identificeret og vurderet under undersøgelsen, er den midterste turbinat og den mellemste meatus (osteomeatal kompleks), anatomisk obstruktion, slimhinde og næsepolypper.

   Efter de endoskopiske procedurer fikseres vævsprøver i oppustning eller nedsænkning ved hjælp af formaldehyd eller glutaraldehyd og indlejret i paraffin. Luftvejene vil blive systematisk udtaget eller opnået under diagnostisk dissektion efter patologens skøn. Luftvejsremodellering vil blive evalueret ikke kun ved optisk mikroskopi, men også ved elektronmikroskopi.

   Til sidst vil bronkialvaskeprøver straks blive transporteret til laboratoriet, for at blive opbevaret ved -80 grader. Undersøgelse af bronchiale vaskevæsker vil blive udført på et senere tidspunkt for at bestemme flere biomarkører ved RT-PCR, ELISA og flowcytometri som beskrevet i næste afsnit.

   Til evaluering af biomarkører for inflammation i væv, blod og andre biologiske væsker vil der blive udført flowcytometrianalyse (FACS) med perler eller ELIZA-metoden. Immunfænotype vil blive analyseret af FACS. Ekspression af biomarkører vil blive evalueret ved RT-PCR. Biomarkør vil blive evalueret før påbegyndelse, efter 1 år og efter 156 ugers mepolizumab-behandling.

   Mikrobiomanalyse Mikrobiomprøver vil blive taget ved baseline og efter 52 ugers behandling. Kvantificering af samlede bakterier, specifik taxa- og butyratproduktionskapacitet vil blive udført ved qPCR ved hjælp af et BioRad iCycler iQ termisk cycler-system (BioRad, Hercules, CA).

   Allergitest (hvis relevant) Patienternes atopiske status vil blive evalueret (hvis ikke tilgængelig) ved screeningsbesøg af hudpriktesten (SPT) til et standardpanel af aeroallergener til påvisning af totale IgE-antistoffer mod forskellige almindelige inhalerende allergener.

   Prøvestørrelsesberegning G-effektanalyse Prøvestørrelsen beregnes ved hjælp af G*Power-softwaren (Die Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Tyskland). Forskellen i retikulær basalmembrantykkelse før og efter mepolizumab-behandling til undersøgelse af luftvejsremodellering hos patienter med kronisk rhinosinusitis med næsepolypper med eller uden bronkial astma er et af vores primære endepunkter. I undersøgelsen af ​​Diver et al er det blevet rapporteret, at retikulær basalmembrantykkelse før og efter behandling med tezepelumab blev fundet henholdsvis 3,86 ± 1,54 vs. 3,35 ± 1,34. Ved at bruge disse data og en tosidet test med en styrke på 0,95 og et niveau af statistisk signifikans på 0,05, beregnede vi en effektstørrelse på 0,49, hvilket indikerede en samlet stikprøvestørrelse på 57 deltagere.

   Sarah Diver, Latifa Khalfaoui, Claire Emson, Sally E Wenzel, Andrew Menzies-Gow, Michael E Wechsler, James Johnston, Nestor Molfino, Jane R Parnes, Ayman Megally, Gene Colice, Christopher E Brightling, CASCADE-undersøgelsens efterforskere. Effekt af tezepelumab på inflammatoriske celler i luftvejene, remodellering og hyperresponsivitet hos patienter med moderat til svær ukontrolleret astma (CASCADE): et dobbeltblindt, randomiseret, placebokontrolleret fase 2-forsøg. Lancet Respir Med. 2021 Nov;9(11):1299-1312.

   Statistisk plananalyse Statistisk analyse vil blive udført ved hjælp af SPSS (version 21.0 IBM SPSS statistisk software, Armonk, NY, USA). Kategoriske variable vil blive angivet som tal (n) og procenter (%), kontinuerte variabler som middelværdi ± SD hvis normalfordelt, eller median og interkvartilintervaller hvis andet. Hvor det er nødvendigt, vil variable uden normalfordeling blive transformeret. P < 0,05 blev accepteret som statistisk signifikant. Shapiro-Wilk test vil blive udført for at adskille parametriske fra ikke-parametriske variabler. Paired-Samples T-test for parametrisk eller Wilcoxon Signed Ranks-test for ikke-parametriske variabler vil blive brugt til at påvise forskelle i variablerne målt før og efter Mepolizumab-behandling hos CRS-patienter med nasale polypper med eller uden astma i både histopatologiske, blod- eller kliniske parametre .

   Der er ingen komparatorarm, da hver patient har kontrol over sig selv. Der er baseline-karakteristika (kliniske og laboratorie-biomarkører), som vil blive målt ved baseline, hver 6. måned, efter 52 og 156 ugers afslutning af behandlingen. Primært endepunkt er ændringer i luftvejsremodeling både i næse og bronchus.

   Undersøgelsens endepunkter inkluderer også analysen af ​​alle disse biomarkører som identifikation af karakteristika for ikke-respondere og super-respondere. Sekundære endepunkter inkluderer også evalueringen af ​​de biomarkører, der er nævnt i metoderne som vurderinger. Statistisk analyse vil indledningsvis blive udført med antallet af patienter, der har afsluttet den 52-ugers behandlingsperiode og de 156-ugers. For det andet vil patienter, der ikke har afsluttet behandlingen, blive analyseret separat, og til sidst vil disse to grupper blive sammenlignet med hinanden.

   Luftvejsremodellering og overordnet respons på behandling og i løbet af et og tre år (fra baseline til 1 år efter behandlingsstart) for hvert resultat vil blive målt med parret test af afhængige prøver (parametriske og ikke-parametriske parrede test) i hver patient. Derefter vil respons på behandlingen blive defineret som ændringen (absolut og % ændring) af resultatet på et og tre år. Vi vil vurdere prædiktorer, der påvirker respons på behandling (ændring), såsom biomarkører ved at bruge flere regressionsmodeller for hvert klinisk-patologisk resultat. For resultater med mere end 2 observationer pr. forsøgsperson i løbet af undersøgelsesperioden vil vi bruge blandede modeller ved hjælp af de gentagne målinger af resultatet. Alle tests vil være 2-sidede med et statistisk signifikansniveau på 5%.

   Database

   Dataindsamlingsmetode:

   En elektronisk dataindsamlingsplatform vil være den metode, der anvendes ved baseline hver 3. måned indtil 1 års opfølgning på denne database. Under behandlingsbesøg vil papirskemaer/spørgeskemaer blive udfyldt af den associerede lungelæge/otorhinolaryngolog. Hvert websted vil indtaste specifikke data i en elektronisk database. Hver patient identificeres entydigt af et emnenummer, som er sammensat af det stednummer, der er tildelt af det ansvarlige overvågningssted, og et sekventielt nummer tildelt af investigator. Ved underskrivelse af formularen til informeret samtykke tildeles patienten det næste løbenummer af investigator. Stedet skal kontakte det centrale forskningspersonale og give de ønskede identifikationsoplysninger for patienten som registreret i den elektroniske database. Behandlingsbesøgsskemaerne vil også blive sendt til det centrale forskningspersonale. Det autoriserede undersøgelsespersonale vil være ansvarlig for dataindsamling, redigering og også at beskytte de data, der indsamles på deres eget websted, og databasen sikkerhedskopieres på daglig basis. Kvalitetsgennemgang/kontrol vil være det fælles ansvar for alle involverede personer og det centrale forskningspersonale [datadepoter].