リキッドバイオプシーにおける多用途な増幅単一分子検出 (VerSiLiB)

複雑な体液中の単一分子を確実に検出することは、疾患バイオマーカー分析の分野における最終目標です。

従来、巨視的な体積での個々の分子の定量分析を可能にするために、分析物の事前濃縮とサンプルの fL-nL コンパートメントへの分配が、特定の認識イベントの増幅と組み合わされてきました。 これらのセットアップでは、蛍光シグナルの陽性または陰性の検出は、各コンパートメントで発生する酵素反応によって引き起こされます。

ポアソン統計に基づくバイナリ読み取りにより、超低濃度の分析物分子が定量化されます。 このアプローチは、現在のデジタル PCR における核酸分析に採用されており、デジタル ELISA という造語でタンパク質にも利用できます。

VerSiLiB の目的は、現在の技術では達成できない標的分析物に関する追加情報にアクセスする手段を提供する単一のデジタル プラットフォームを使用して、タンパク質分析物と核酸分析物の両方を分析するための酵素フリー増幅戦略を開発することです。 この方法は、磁性ナノ粒子輸送体に結合した特定のリガンドと標的分析物の親和性相互作用が、レポーターとして機能する蛍光トレーサーの高速往復を伴う、新しい親和性媒介輸送増幅に基づいています。 外部磁場を印加することにより、標的分析物が小さな反応コンパートメント内に存在する場合にのみ、トレーサーはトレーサー保管側（暗い場所）からトレーサー活性側（明るくなる場所）に輸送されます。 トレーサーを暗くしたり明るくしたりするために、コンパートメントの保管側と活性側にカスタマイズされたプラズモンナノ構造が準備されます。 目的は、バイオバンク化されたリキッドバイオプシーサンプルを使用して、がん管理における新しい VerSiLiB プロテオゲノミクス増幅プラットフォームの技術検証を行うことです。