免疫親和性および質量分析による唾液の検出 (SIMS)
免疫親和性および質量分析による特定の唾液タンパク質の検出
調査の概要
詳細な説明
各参加者は訪問の前日に電話で連絡され、研究のプレゼンテーションに参加します。訪問当日には、2 種類のサンプルが収集されます。
- 唾液サンプル: 法医学部門の健康なボランティアについて (各ボランティアにつき 1.5 ～ 2 mL のサンプルを 2 つ収集します)。
- 膣サンプル：生殖医療科を受診している女性のもの（各患者に乾いた綿棒2本）。 2 つのグループ。1 つのグループは膣分泌液サンプルのみ、もう 1 つのグループは膣分泌液 + 精子サンプルです。
研究の種類
入学 (推定)
段階
- 適用できない
連絡先と場所
研究連絡先
- 名前：Pierre-Antoine PEYRON, PI
- 電話番号：+33 04 67 33 85 86
- メール：pa-peyron@chu-montpellier.fr
研究連絡先のバックアップ
- 名前：Laëtitia LEVEQUE
- 電話番号：+33 04 67 33 85 86
- メール：l-leveque@chu-montpellier.fr
研究場所
-
-
-
Montpellier、フランス、34295
- PEYRON
-
-
参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
- 高齢者
健康ボランティアの受け入れ
説明
包含基準:
唾液サンプル
- 18歳以上の男女
膣サンプル:
- 18歳以上の女性
- 訪問前の 10 日間に無防備な膣性交がない (グループ 1)
- 訪問の24時間前に射精を伴う無防備な膣性交（グループ2）
除外基準:
唾液サンプル:
- 唾液腺の活動性病理（感染症、腫瘍）
- 来院前24時間以内の無防備な口腔性器性交
- 熟考期間後に書面によるインフォームドコンセントを取得できなかった場合
- 妊娠中または授乳中の女性
- 法律によって保護されている、または後見人や保佐人のもとで保護されている成人
- フランスの社会保障制度に加入していない、またはそのような制度の恩恵を受けていない
膣サンプル :
- 訪問前24時間以内の口腔性器性交（クンニリングス）
- 熟考期間後に書面によるインフォームドコンセントを取得できなかった場合
- 妊娠中または授乳中の女性
- 法律によって保護されている、または後見人や保佐人のもとで保護されている成人
- フランスの社会保障制度に加入していない、またはそのような制度の恩恵を受けていない
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：他の
- 割り当て：非ランダム化
- 介入モデル：並列代入
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
|---|---|
|
他の：唾液
2 つの唾液サンプルの収集（約 各 1.5 ～ 2 mL) 健康なボランティアの受動的なよだれによる これらのサンプルは遠心分離され、上清が収集されます。 |
健康なボランティアの受動的唾液分泌による 1.5 ～ 2 mL の唾液サンプル 2 個の収集
サンプルの準備と分析:
希釈は 10 から 10 (1/10、1/100、1/1000...) に行われ、検出可能閾値に達した後、2 回目のより正確な分析で指定されます (例: 1/1000 でシグナルがない場合は、分析1/500、1/250など）。 分析感度は、結果の再現性を確認するために、各タイプ (唾液、膣、膣 + 精液) の 3 つのサンプルでテストされます。 オペレーターはサンプル中の唾液の存在に気付かず、IP-LC-MS/MS メソッドを使用して唾液特異的タンパク質検出分析を実行します。 |
|
他の：膣分泌物
現実の生活にできるだけ近づけるため、婦人科検査中（膣内超音波検査またはその他の検査の前に）、滅菌乾燥綿棒を使用して 2 つの膣綿棒（膣口から長さ 2 ～ 3 cm にわたって挿入）が採取されます。生殖医療サービスに含まれる患者の膣内処置）。
|
サンプルの準備と分析:
希釈は 10 から 10 (1/10、1/100、1/1000...) に行われ、検出可能閾値に達した後、2 回目のより正確な分析で指定されます (例: 1/1000 でシグナルがない場合は、分析1/500、1/250など）。 分析感度は、結果の再現性を確認するために、各タイプ (唾液、膣、膣 + 精液) の 3 つのサンプルでテストされます。 オペレーターはサンプル中の唾液の存在に気付かず、IP-LC-MS/MS メソッドを使用して唾液特異的タンパク質検出分析を実行します。
女性の2本の乾いた綿棒による膣分泌物の採取
|
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
唾液サンプル間の再現性
時間枠：3ヶ月
|
唾液サンプルに関する評価者内合意。これには、最初のサンプルの検査と 2 番目のサンプルの再検査が含まれます。 この研究の主要エンドポイントは、IP-LC-MS/MS 法を使用した特定の唾液タンパク質 (ヒスタチン 1 型、PRP、シスタチン D) の検出に関する、再現性または評価者内の合意からなるプロトコルの信頼性を測定することです。成人の唾液サンプルについて。 評価者間の合意 (テスト/再テスト) は、平均値 +/- 標準偏差によって測定されます。 同じサンプルに対して複数の分析 (3 つまたは 4 つ) が実行され、結果が同一かどうかが判断されます。 |
3ヶ月
|
|
唾液サンプルに対する技術者間の中間の忠実度
時間枠：3ヶ月
|
唾液サンプルに関する評価者間の合意（コーエンのカッパ係数）。これには、少なくとも 2 人の異なる技術者による複数のサンプルの検査が含まれます。 この研究の主要評価項目は、IP-LC を使用した特定の唾液タンパク質 (ヒスタチン 1 型、PRP、シスタチン D) の検出に関する中間忠実度または評価者間合意 (コーエンのカッパ係数) で構成されるプロトコルの信頼性を測定することです。 - 成人の唾液サンプルに対する MS/MS メソッド。 カッパ係数は 0 から 1 の範囲のスコアを与えます。 コーダが完全に同意した場合、κ = 1 となります。 彼らが完全に同意しない場合 (または偶然にのみ同意する場合)、κ ≤ 0 となります。 |
3ヶ月
|
二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
唾液が染み込んだ膣サンプル間の再現性
時間枠：3ヶ月
|
唾液が染み込んだ膣サンプルに関する評価者内合意 二次エンドポイントは、一次エンドポイントの繰り返しで構成されます (つまり、 再現性と中間忠実度）、精子が含浸されているかどうかの膣サンプルに関する。 繰り返しますが、同じサンプルが数回 (3 回または 4 回) テストされ、同様の結果が返されるかどうかが確認されます。 |
3ヶ月
|
|
唾液が染み込んだ膣サンプルに対する技師間の中間的な忠実度
時間枠：3ヶ月
|
: 唾液が染み込んだ膣サンプルに関する評価者間の合意 (コーエンのカッパ係数) 二次エンドポイントは、一次エンドポイントの繰り返しで構成されます (つまり、 再現性と中間忠実度）、精子が含浸されているかどうかの膣サンプルに関する。 カッパ係数は 0 から 1 の範囲のスコアを与えます。 コーダが完全に同意した場合、κ = 1 となります。 彼らが完全に同意しない場合 (または偶然にのみ同意する場合)、κ ≤ 0 となります。 |
3ヶ月
|
|
分析的感性
時間枠：3ヶ月
|
管理された状態で唾液サンプルおよび唾液に浸した膣サンプルについてこの方法で検出された最低唾液濃度 (μL)
|
3ヶ月
|
|
診断感度
時間枠：3ヶ月
|
唾液サンプルと唾液に浸した膣サンプルを管理された状態で分析し、真陽性と偽陰性の検出率を決定します。
|
3ヶ月
|
|
診断特異性
時間枠：3ヶ月
|
管理された状態での膣サンプルと乾燥サンプルを分析して、偽陽性と真陰性の割合を決定します。
|
3ヶ月
|
協力者と研究者
捜査官
- スタディディレクター：Pierre-Antoine PEYRON, PI、University Hospital, Montpellier
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- LOI n°2021-478 du 21 avril 2021 visant à protéger les mineurs des crimes et délits sexuels et de l'inceste. JORF n°0095 du 22 avril 2021. Texte n°4
- Wornes DJ, Speers SJ, Murakami JA. The evaluation and validation of Phadebas(R) paper as a presumptive screening tool for saliva on forensic exhibits. Forensic Sci Int. 2018 Jul;288:81-88. doi: 10.1016/j.forsciint.2018.03.049. Epub 2018 Apr 20.
- Vandenberg N, van Oorschot RA. The use of Polilight in the detection of seminal fluid, saliva, and bloodstains and comparison with conventional chemical-based screening tests. J Forensic Sci. 2006 Mar;51(2):361-70. doi: 10.1111/j.1556-4029.2006.00065.x.
- Blanchard Muller M., Baccino E., Peyron P.A. Détection de traces salivaires dans le cadre d'agressions sexuelles : intérêt de l'utilisation d'une méthode immuno-chromatographique rapide (RSID-SalivaTest®) selon un protocole simplifié. Rev Médecine Légale 2023.
- Davidovics R, Saw YL, Brown CO, Prinz M, McKiernan HE, Danielson PB, Legg KM. High-throughput seminal fluid identification by automated immunoaffinity mass spectrometry. J Forensic Sci. 2022 May;67(3):1184-1190. doi: 10.1111/1556-4029.14975. Epub 2022 Jan 13.
- Sato H, Nakajima D, Ishikawa M, Konno R, Nakamura R, Ohara O, Kawashima Y. Evaluation of the Suitability of Dried Saliva Spots for In-Depth Proteome Analyses for Clinical Applications. J Proteome Res. 2022 May 6;21(5):1340-1348. doi: 10.1021/acs.jproteome.2c00099. Epub 2022 Apr 21.
- Yang H, Zhou B, Deng H, Prinz M, Siegel D. Body fluid identification by mass spectrometry. Int J Legal Med. 2013 Nov;127(6):1065-77. doi: 10.1007/s00414-013-0848-1. Epub 2013 Mar 24.
- Brown CO, Robbins BL, McKiernan HE, Danielson PB, Legg KM. Direct seminal fluid identification by protease-free high-resolution mass spectrometry. J Forensic Sci. 2021 May;66(3):1017-1023. doi: 10.1111/1556-4029.14646. Epub 2020 Dec 8.
- Legg KM, Powell R, Reisdorph N, Reisdorph R, Danielson PB. Discovery of highly specific protein markers for the identification of biological stains. Electrophoresis. 2014 Nov;35(21-22):3069-78. doi: 10.1002/elps.201400125. Epub 2014 Oct 1.
- Van Steendam K, De Ceuleneer M, Dhaenens M, Van Hoofstat D, Deforce D. Mass spectrometry-based proteomics as a tool to identify biological matrices in forensic science. Int J Legal Med. 2013 Mar;127(2):287-98. doi: 10.1007/s00414-012-0747-x. Epub 2012 Jul 29.
- Illiano A, Arpino V, Pinto G, Berti A, Verdoliva V, Peluso G, Pucci P, Amoresano A. Multiple Reaction Monitoring Tandem Mass Spectrometry Approach for the Identification of Biological Fluids at Crime Scene Investigations. Anal Chem. 2018 May 1;90(9):5627-5636. doi: 10.1021/acs.analchem.7b04742. Epub 2018 Apr 13.
- Legg KM, Powell R, Reisdorph N, Reisdorph R, Danielson PB. Verification of protein biomarker specificity for the identification of biological stains by quadrupole time-of-flight mass spectrometry. Electrophoresis. 2017 Mar;38(6):833-845. doi: 10.1002/elps.201600352. Epub 2017 Jan 30.
- de Beijer RP, de Graaf C, van Weert A, van Leeuwen TG, Aalders MCG, van Dam A. Identification and detection of protein markers to differentiate between forensically relevant body fluids. Forensic Sci Int. 2018 Sep;290:196-206. doi: 10.1016/j.forsciint.2018.07.013. Epub 2018 Jul 24.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (推定)
一次修了 (推定)
研究の完了 (推定)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (推定)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (推定)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。