Denne siden ble automatisk oversatt og nøyaktigheten av oversettelsen er ikke garantert. Vennligst referer til engelsk versjon for en kildetekst.

Påvisning av spytt ved immunoaffinitet og massespektrometri (SIMS)

13. desember 2023 oppdatert av: University Hospital, Montpellier

Påvisning av spesifikke spyttproteiner ved immunaffinitet og massespektrometri

Identifisering av spytt i kjønnsområdet under en kriminell etterforskning kan være en kritisk komponent i rettsforfølgelsen av et seksuelt overgrep i Frankrike, ettersom ikke-samtykke oral-genital samleie har blitt ansett som forbrytelser siden 2021. Utviklingen av svært spesifikke metoder for spytt deteksjon er derfor avgjørende siden de ofte brukte screeningmetodene mangler spesifisitet. Proteinmassespektrometri har vist seg å være en sensitiv og spesifikk metode, men er spesielt tidkrevende. En raskere og mer sensitiv hybridtilnærming ved bruk av automatisert immunaffinitetsmassespektrometri (IP-LC-MS/MS) er nylig utviklet og har vist seg å være spesielt effektiv for påvisning av et sædvæskeprotein (semenogelin), som tillater en høy gjennomstrømming sædvæskeidentifikasjon i sædprøver. I likhet med semenogelin, kunne spesifikke spyttproteiner som hisstatin type 1, cystatin D eller prolinrike proteiner (PRP) oppdages ved å bruke denne lovende tilnærmingen, som aldri har blitt testet på spyttprøver. I samarbeid med Clinical Proteomics Platform og Institutt for reproduktiv medisin ved Universitetssykehuset i Montpellier, tar vi sikte på å utvikle en protokoll for påvisning av spesifikke spyttproteiner ved hjelp av IP-LC-MS/MS i prøver av seksuelle overgrep.

Studieoversikt

Status

Har ikke rekruttert ennå

Forhold

Intervensjon / Behandling

Detaljert beskrivelse

Hver deltaker vil bli kontaktet via telefon dagen før besøket, for å presentere for en presentasjon av studien. Dagen for besøket vil det bli samlet inn to typer prøver:

  • Spyttprøver: på friske frivillige i Institutt for rettsmedisin (2 prøver på 1,5 - 2 mL samles inn for hver frivillig).
  • Vaginale prøver: på kvinner som konsulterer i avdeling for reproduksjonsmedisin (2 tørre vattpinner på hver pasient). 2 grupper, en gruppe med kun vaginal sekresjonsvæskeprøver, og en gruppe med vaginal sekretvæske + sædprøver.

Studietype

Intervensjonell

Registrering (Antatt)

35

Fase

  • Ikke aktuelt

Kontakter og plasseringer

Denne delen inneholder kontaktinformasjon for de som utfører studien, og informasjon om hvor denne studien blir utført.

Studiekontakt

Studer Kontakt Backup

Studiesteder

  • Frankrike
      • Montpellier, Frankrike, 34295
        • PEYRON

Deltakelseskriterier

Forskere ser etter personer som passer til en bestemt beskrivelse, kalt kvalifikasjonskriterier. Noen eksempler på disse kriteriene er en persons generelle helsetilstand eller tidligere behandlinger.

Kvalifikasjonskriterier

Alder som er kvalifisert for studier

  • Voksen
  • Eldre voksen

Tar imot friske frivillige

Ja

Beskrivelse

Inklusjonskriterier:

Spyttprøver

  • Menn og kvinner i alderen 18 år eller mer

Vaginale prøver:

  • Kvinner over 18 år
  • Ingen ubeskyttet vaginalt samleie i løpet av de 10 dagene før besøket (gruppe 1)
  • Ubeskyttet vaginalt samleie med utløsning i 24 timer før besøket (gruppe 2)

Ekskluderingskriterier:

Spyttprøver:

  • Aktiv patologi av spyttkjertlene (infeksjon, svulst)
  • Ubeskyttet oral-genital seksuell omgang i 24 timer før besøket
  • Manglende innhenting av skriftlig informert samtykke etter en betenkningstid
  • Gravide eller ammende kvinner
  • Voksen beskyttet ved lov eller under vergemål eller kuratorskap
  • Ingen tilknytning til det franske trygdesystemet eller ingen fordel av et slikt system

Vaginale prøver:

  • Oral-genital seksuell omgang (cunnilingus) i 24 timer før besøket
  • Manglende innhenting av skriftlig informert samtykke etter en betenkningstid
  • Gravide eller ammende kvinner
  • Voksen beskyttet ved lov eller under vergemål eller kuratorskap
  • Ingen tilknytning til det franske trygdesystemet eller ingen fordel av et slikt system

Studieplan

Denne delen gir detaljer om studieplanen, inkludert hvordan studien er utformet og hva studien måler.

Hvordan er studiet utformet?

Designdetaljer

  • Primært formål: Annen
  • Tildeling: Ikke-randomisert
  • Intervensjonsmodell: Parallell tildeling
  • Masking: Ingen (Open Label)

Våpen og intervensjoner

Deltakergruppe / Arm
Intervensjon / Behandling
Annen: Spytt

Samling av to spyttprøver (ca. 1,5 til 2 ml hver) ved passiv sikling hos friske frivillige

Disse prøvene vil bli sentrifugert og supernatanten samlet.
Annen: Spyttsamling
Samling av 2 prøver på 1,5 til 2 ml spytt ved passiv spyttutskillelse hos friske frivillige
Annen: IP-LC-MS/MS: immunutfellingsberikelse med væskekromatografi koblet til tandem massespektrometri

prøveforberedelse og analyse:

  • Impregnering av spissene (absorberende bomull) av sterile tørre vattpinner og vaginale vattpinner med kontrollerte mengder spytt.
  • Immunfangst av spyttproteiner av interesse (histatin type 1, cystatin D, PRPs) ved protein A affinitetsrensing
  • LC-MS/MS-analyse av eluerte rensede peptider (Multiple Reaction Monitoring-modus)

Fortynninger vil bli gjort fra 10 til 10 (1/10, 1/100, 1/1000...), deretter etter å ha nådd en detekterbarhetsterskel, spesifisert ved en andre mer presis analyse (f.eks. hvis det ikke er noe signal ved 1/1000, analyse ved 1/500 deretter 1/250 osv.). Analytisk sensitivitet vil bli testet på tre prøver av hver type (spytt, vaginal, vaginal + sæd) for å sikre reproduserbarhet av resultatene.

Operatører, uvitende om tilstedeværelsen av spytt i prøvene, vil deretter utføre spyttspesifikk proteindeteksjonsanalyse ved bruk av IP-LC-MS/MS-metoden.
Annen: Vaginale sekreter
For å være så nær som mulig til det virkelige liv, vil to vaginale vattpinner (introdusert gjennom skjedeåpningen over en lengde på 2 til 3 cm) tas med en steril tørr vattpinne under den gynekologiske undersøkelsen (før endovaginal ultralyd eller annen endovaginal prosedyre) av pasienter som er inkludert i Reproductive Medicine Service.
Annen: IP-LC-MS/MS: immunutfellingsberikelse med væskekromatografi koblet til tandem massespektrometri

prøveforberedelse og analyse:

  • Impregnering av spissene (absorberende bomull) av sterile tørre vattpinner og vaginale vattpinner med kontrollerte mengder spytt.
  • Immunfangst av spyttproteiner av interesse (histatin type 1, cystatin D, PRPs) ved protein A affinitetsrensing
  • LC-MS/MS-analyse av eluerte rensede peptider (Multiple Reaction Monitoring-modus)

Fortynninger vil bli gjort fra 10 til 10 (1/10, 1/100, 1/1000...), deretter etter å ha nådd en detekterbarhetsterskel, spesifisert ved en andre mer presis analyse (f.eks. hvis det ikke er noe signal ved 1/1000, analyse ved 1/500 deretter 1/250 osv.). Analytisk sensitivitet vil bli testet på tre prøver av hver type (spytt, vaginal, vaginal + sæd) for å sikre reproduserbarhet av resultatene.

Operatører, uvitende om tilstedeværelsen av spytt i prøvene, vil deretter utføre spyttspesifikk proteindeteksjonsanalyse ved bruk av IP-LC-MS/MS-metoden.

Annen: Oppsamling av vaginal sekret
Innsamling av vaginalt sekret med 2 tørre vattpinner hos kvinner

Hva måler studien?

Primære resultatmål

Resultatmål
Tiltaksbeskrivelse
Tidsramme
Reproduserbarhet mellom spyttprøver
Tidsramme: 3 måneder

Intrabedømmeravtale om spyttprøver, som innebærer å teste den første prøven og å teste den andre prøven på nytt

Studiens primære endepunkt vil være å måle påliteligheten til protokollen, bestående av reproduserbarhet eller intra-assessor-avtale, for påvisning av spesifikke spyttproteiner (histatin type 1, PRPs, cystatin D) ved bruk av IP-LC-MS/MS-metoden på spyttprøver fra voksne.

Intra-assessor-avtale (test/retest) vil bli målt etter deres midler +/- standardavvik.

Flere analyser (mellom 3 eller 4) på ​​samme prøve vil bli utført for å avgjøre om resultatene er identiske
3 måneder
Middels troskap mellom teknikere på spyttprøver
Tidsramme: 3 måneder

Inter-assessor-avtale (Cohens kappa-koeffisient) på spyttprøver, som innebærer testing av flere prøver av minst 2 forskjellige teknikere

Studiens primære endepunkt vil være å måle påliteligheten til protokollen, bestående av middels troskap eller inter-assessor-avtale (Cohens kappa-koeffisient) for påvisning av spesifikke spyttproteiner (histatin type 1, PRPs, cystatin D) ved bruk av IP-LC -MS/MS metode på spyttprøver fra voksne.

Kappa-koeffisienten gir en poengsum fra 0 til 1. Hvis koderne er helt enige, er κ = 1. Hvis de er helt uenige (eller er enige på grunn av tilfeldigheter), κ ≤ 0.
3 måneder

Sekundære resultatmål

Resultatmål
Tiltaksbeskrivelse
Tidsramme
Reproduserbarhet mellom vaginale prøver dynket med spytt
Tidsramme: 3 måneder

Intra-bedømmer avtale om vaginale prøver dynket med spytt

De sekundære endepunktene vil bestå av å gjenta de primære endepunktene (dvs. reproduserbarhet og middels troskap) på vaginale prøvene impregnert med sæd eller ikke.

Igjen vil den samme prøven bli testet flere ganger (mellom 3 eller 4) for å se om resultatene kommer tilbake like.
3 måneder
Middels troskap mellom teknikere på vaginale prøver dynket med spytt
Tidsramme: 3 måneder

: Inter-assessor-avtale (Cohens kappa-koeffisient) på vaginale prøver dynket med spytt

De sekundære endepunktene vil bestå av å gjenta de primære endepunktene (dvs. reproduserbarhet og middels troskap) på vaginale prøvene impregnert med sæd eller ikke.

Kappa-koeffisienten gir en poengsum fra 0 til 1. Hvis koderne er helt enige, er κ = 1. Hvis de er helt uenige (eller er enige på grunn av tilfeldigheter), κ ≤ 0.
3 måneder
Analytisk sensibilitet
Tidsramme: 3 måneder
Laveste spyttkonsentrasjon (µL) påvist med metoden på spyttprøver og på vaginale prøver dynket med spytt i kontrollert tilstand
3 måneder
Diagnostisk følsomhet
Tidsramme: 3 måneder
Analyse av spyttprøver og vaginale prøver dynket med spytt i kontrollert tilstand, for å bestemme hastigheten for deteksjon av sanne positive og falske negative
3 måneder
Diagnostisk spesifisitet
Tidsramme: 3 måneder
Analyse av vaginale prøver og tørre prøver i kontrollert tilstand, for å bestemme frekvensen av falske positive og sanne negative.
3 måneder

Samarbeidspartnere og etterforskere

Det er her du vil finne personer og organisasjoner som er involvert i denne studien.

Sponsor

University Hospital, Montpellier

Etterforskere

  • Studieleder: Pierre-Antoine PEYRON, PI, University Hospital, Montpellier

Publikasjoner og nyttige lenker

Den som er ansvarlig for å legge inn informasjon om studien leverer frivillig disse publikasjonene. Disse kan handle om alt relatert til studiet.

Generelle publikasjoner

Hjelpsomme linker

Studierekorddatoer

Disse datoene sporer fremdriften for innsending av studieposter og sammendragsresultater til ClinicalTrials.gov. Studieposter og rapporterte resultater gjennomgås av National Library of Medicine (NLM) for å sikre at de oppfyller spesifikke kvalitetskontrollstandarder før de legges ut på det offentlige nettstedet.

Studer hoveddatoer

Studiestart (Antatt)

15. januar 2024

Primær fullføring (Antatt)

15. juli 2024

Studiet fullført (Antatt)

31. desember 2024

Datoer for studieregistrering

Først innsendt

18. august 2023

Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene

13. desember 2023

Først lagt ut (Antatt)

27. desember 2023

Oppdateringer av studieposter

Sist oppdatering lagt ut (Antatt)

27. desember 2023

Siste oppdatering sendt inn som oppfylte QC-kriteriene

13. desember 2023

Sist bekreftet

1. desember 2023

Mer informasjon

Begreper knyttet til denne studien

Nøkkelord

Andre studie-ID-numre

  • RECHMPL23_0098

Legemiddel- og utstyrsinformasjon, studiedokumenter

Studerer et amerikansk FDA-regulert medikamentprodukt

Nei

Studerer et amerikansk FDA-regulert enhetsprodukt

Nei

Denne informasjonen ble hentet direkte fra nettstedet clinicaltrials.gov uten noen endringer. Hvis du har noen forespørsler om å endre, fjerne eller oppdatere studiedetaljene dine, vennligst kontakt register@clinicaltrials.gov. Så snart en endring er implementert på clinicaltrials.gov, vil denne også bli oppdatert automatisk på nettstedet vårt. .

Abonnere