Ezt az oldalt automatikusan lefordították, és a fordítás pontossága nem garantált. Kérjük, olvassa el a angol verzió forrásszöveghez.

A nyál kimutatása immunaffinitással és tömegspektrometriával (SIMS)

2023. december 13. frissítette: University Hospital, Montpellier

Specifikus nyálfehérjék kimutatása immunaffinitással és tömegspektrometriával

A nemi szervek nyálának azonosítása a bűnügyi nyomozás során kritikus eleme lehet a szexuális zaklatás büntetőeljárásának Franciaországban, mivel a nem beleegyezésen alapuló orális-genitális közösülést 2021 óta bűncselekménynek tekintik. A kimutatás ezért döntő fontosságú, mivel az általánosan alkalmazott szűrési módszerek nem specifikusak. A fehérje tömegspektrometria érzékeny és specifikus módszernek bizonyult, de különösen időigényes. A közelmúltban fejlesztettek ki egy gyorsabb és érzékenyebb hibrid megközelítést, amely automatizált immunaffinitási tömegspektrometriát (IP-LC-MS/MS) használ, és azt találták, hogy különösen hatékony egy ondófolyadék fehérje (szemenogelin) kimutatására, lehetővé téve a nagy áteresztőképességet. ondófolyadék azonosítása ondómintákban. A szemenogelinhez hasonlóan specifikus nyálfehérjék, például hisztatin 1-es típusú, cisztatin D vagy prolinban gazdag fehérjék (PRP-k) kimutathatók ezzel az ígéretes megközelítéssel, amelyet nyálmintákon még soha nem teszteltek. A Clinical Proteomics Platformmal és a Montpellier-i Egyetemi Kórház Reprodukciós Orvostudományi Osztályával együttműködve célunk egy protokoll kidolgozása specifikus nyálfehérjék IP-LC-MS/MS segítségével történő kimutatására szexuális zaklatás típusú mintákban.

A tanulmány áttekintése

Állapot

Még nincs toborzás

Körülmények

Beavatkozás / kezelés

Részletes leírás

A látogatást megelőző napon minden résztvevővel felvesznek egy telefonhívást, hogy bemutassák a tanulmányt. A látogatás napján kétféle mintát vesznek:

  • Nyálminták: egészséges önkénteseken a Jogi Orvostudományi Osztályon (önként 2 db 1,5-2 ml-es mintát veszünk).
  • Hüvelyi minták: a Reproduktív Orvosi Osztályon konzultáló nőkön (2 száraz tampon minden betegről). 2 csoport, egy csoport csak hüvelyi szekréciós folyadék mintákkal, és egy csoport hüvelyi szekréciós folyadékkal + spermium mintákkal.

Tanulmány típusa

Beavatkozó

Beiratkozás (Becsült)

35

Fázis

  • Nem alkalmazható

Kapcsolatok és helyek

Ez a rész a vizsgálatot végzők elérhetőségeit, valamint a vizsgálat lefolytatásának helyére vonatkozó információkat tartalmazza.

Tanulmányi kapcsolat

Tanulmányozza a kapcsolattartók biztonsági mentését

Tanulmányi helyek

Részvételi kritériumok

A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.

Jogosultsági kritériumok

Tanulmányozható életkorok

  • Felnőtt
  • Idősebb felnőtt

Egészséges önkénteseket fogad

Igen

Leírás

Bevételi kritériumok:

Nyálminták

  • 18 éves vagy annál idősebb férfiak és nők

Hüvelyi minták:

  • 18 éves vagy annál idősebb nők
  • A látogatást megelőző 10 napban nem volt védekezés nélküli hüvelyi szex (1. csoport)
  • Védelem nélküli hüvelyi nemi közösülés magömléssel a látogatást megelőző 24 órában (2. csoport)

Kizárási kritériumok:

Nyálminták:

  • A nyálmirigyek aktív patológiája (fertőzés, daganat)
  • Védelem nélküli, orális-genitális szexuális kapcsolat a látogatást megelőző 24 órában
  • Az írásos beleegyezés megszerzésének elmulasztása gondolkodási időszak után
  • Terhes vagy szoptató nők
  • Törvény által védett vagy gondnokság vagy gondnokság alatt álló felnőtt
  • Nem tartozik a francia társadalombiztosítási rendszerhez, vagy nem részesül ebből a rendszerből

Hüvelyi minták:

  • Orális-genitális szexuális kapcsolat (cunnilingus) a látogatást megelőző 24 órában
  • Az írásos beleegyezés megszerzésének elmulasztása gondolkodási időszak után
  • Terhes vagy szoptató nők
  • Törvény által védett vagy gondnokság vagy gondnokság alatt álló felnőtt
  • Nem tartozik a francia társadalombiztosítási rendszerhez, vagy nem részesül ebből a rendszerből

Tanulási terv

Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.

Hogyan készül a tanulmány?

Tervezési részletek

  • Elsődleges cél: Egyéb
  • Kiosztás: Nem véletlenszerű
  • Beavatkozó modell: Párhuzamos hozzárendelés
  • Maszkolás: Nincs (Open Label)

Fegyverek és beavatkozások

Résztvevő csoport / kar
Beavatkozás / kezelés
Egyéb: Nyál

Két nyálminta gyűjtése (kb. 1,5-2 ml) egészséges önkéntesek passzív nyálazásával

Ezeket a mintákat centrifugáljuk, és a felülúszót összegyűjtjük.
Egyéb: Nyálgyűjtemény
2 db 1,5-2 ml nyálminta gyűjtése passzív nyálelválasztással egészséges önkénteseknél
Egyéb: IP-LC-MS/MS: immunprecipitációs dúsítás folyadékkromatográfiával tandem tömegspektrometriához kapcsolva

minta előkészítése és elemzése:

  • Steril száraz tamponok és hüvelytamponok hegyeinek impregnálása szabályozott mennyiségű nyállal.
  • Az érdeklődésre számot tartó nyálfehérjék (hisztatin 1-es típusú, cisztatin D, PRP-k) immunitása protein A affinitási tisztítással
  • Eluált tisztított peptidek LC-MS/MS analízise (Multiple Reaction Monitoring mód)

A hígítások 10-től 10-ig (1/10, 1/100, 1/1000...), majd a kimutathatósági küszöb elérése után, egy második pontosabb elemzéssel (pl. ha nincs jel 1/1000-nél, elemzés) 1/500-nál, majd 1/250-nél stb.). Az analitikai érzékenységet minden típusból három mintán (nyál, hüvely, hüvely + sperma) tesztelik az eredmények reprodukálhatóságának biztosítása érdekében.

A kezelők, akik nem tudnak a mintákban lévő nyál jelenlétéről, nyálspecifikus fehérje-detektálási analízist végeznek az IP-LC-MS/MS módszerrel.
Egyéb: Hüvelyváladék
Annak érdekében, hogy a lehető legközelebb álljunk a való élethez, a nőgyógyászati ​​vizsgálat során (endovaginális ultrahang vagy bármilyen más vizsgálat előtt) steril száraz tamponnal két hüvelyi pálcikát veszünk (amelyeket a hüvelynyíláson keresztül vezetnek be 2-3 cm hosszúságban). endovaginális eljárás) a Reproduktív Orvosi Szolgálatba bevont betegek.
Egyéb: IP-LC-MS/MS: immunprecipitációs dúsítás folyadékkromatográfiával tandem tömegspektrometriához kapcsolva

minta előkészítése és elemzése:

  • Steril száraz tamponok és hüvelytamponok hegyeinek impregnálása szabályozott mennyiségű nyállal.
  • Az érdeklődésre számot tartó nyálfehérjék (hisztatin 1-es típusú, cisztatin D, PRP-k) immunitása protein A affinitási tisztítással
  • Eluált tisztított peptidek LC-MS/MS analízise (Multiple Reaction Monitoring mód)

A hígítások 10-től 10-ig (1/10, 1/100, 1/1000...), majd a kimutathatósági küszöb elérése után, egy második pontosabb elemzéssel (pl. ha nincs jel 1/1000-nél, elemzés) 1/500-nál, majd 1/250-nél stb.). Az analitikai érzékenységet minden típusból három mintán (nyál, hüvely, hüvely + sperma) tesztelik az eredmények reprodukálhatóságának biztosítása érdekében.

A kezelők, akik nem tudnak a mintákban lévő nyál jelenlétéről, nyálspecifikus fehérje-detektálási analízist végeznek az IP-LC-MS/MS módszerrel.

Egyéb: Hüvelyi váladékgyűjtés
Hüvelyváladék gyűjtése 2 száraz tamponnal nőknél

Mit mér a tanulmány?

Elsődleges eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
Reprodukálhatóság a nyálminták között
Időkeret: 3 hónap

Értékelőn belüli megállapodás a nyálmintákról, amely magában foglalja az első minta vizsgálatát és a második minta ismételt vizsgálatát

A vizsgálat elsődleges végpontja a reprodukálhatóságból vagy az értékelőn belüli megegyezésből álló protokoll megbízhatóságának mérése lesz specifikus nyálfehérjék (1-es típusú hisztatin, PRP-k, cisztatin D) kimutatására az IP-LC-MS/MS módszerrel. felnőttkori nyálmintákon.

Az értékelőn belüli megegyezést (teszt/újrateszt) az átlaguk +/- szórása alapján kell mérni.

Ugyanazon mintán több elemzést (3 vagy 4 között) végeznek annak megállapítására, hogy az eredmények azonosak-e
3 hónap
Közepes hűség a technikusok között a nyálmintákon
Időkeret: 3 hónap

Értékelők közötti megállapodás (Cohen-féle kappa-koefficiens) a nyálmintákról, amely magában foglalja több minta tesztelését legalább 2 különböző technikussal

A vizsgálat elsődleges végpontja a protokoll megbízhatóságának mérése lesz, amely a köztes hűségből vagy az értékelők közötti megegyezésből (Cohen-féle kappa-koefficiens) áll a specifikus nyálfehérjék (1-es típusú hisztatin, PRP-k, cisztatin D) IP-LC segítségével történő kimutatására. -MS/MS módszer felnőttkori nyálmintákon.

A kappa együttható 0 és 1 közötti pontszámot ad. Ha a kódolók teljesen egyetértenek, κ = 1. Ha egyáltalán nem értenek egyet (vagy csak a véletlennek köszönhetően egyetértenek), κ ≤ 0.
3 hónap

Másodlagos eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
Reprodukálhatóság a nyállal átitatott hüvelyi minták között
Időkeret: 3 hónap

Értékelőn belüli megállapodás a nyállal átitatott hüvelyi mintákról

A másodlagos végpontok az elsődleges végpontok (pl. reprodukálhatóság és közepes hűség) a spermával impregnált hüvelymintákon vagy sem.

Ugyanazt a mintát ismételten megvizsgálják többször (3 vagy 4 között), hogy megnézzék, az eredmények hasonlóak-e.
3 hónap
Köztes hűség a technikusok között a nyállal átitatott hüvelyi mintákon
Időkeret: 3 hónap

: Értékelők közötti megállapodás (Cohen-kappa-együttható) a nyállal átitatott hüvelyi mintákon

A másodlagos végpontok az elsődleges végpontok (pl. reprodukálhatóság és közepes hűség) a spermával impregnált hüvelymintákon vagy sem.

A kappa együttható 0 és 1 közötti pontszámot ad. Ha a kódolók teljesen egyetértenek, κ = 1. Ha egyáltalán nem értenek egyet (vagy csak a véletlennek köszönhetően egyetértenek), κ ≤ 0.
3 hónap
Analitikai érzékenység
Időkeret: 3 hónap
A módszerrel kimutatott legalacsonyabb nyálkoncentráció (µL) nyálmintákon és nyállal átitatott hüvelymintákon ellenőrzött állapotban
3 hónap
Diagnosztikai érzékenység
Időkeret: 3 hónap
Nyálminták és nyállal átitatott hüvelyminták analízise ellenőrzött állapotban, a valódi pozitívok és hamis negatívok kimutatási arányának meghatározására
3 hónap
Diagnosztikai specifitás
Időkeret: 3 hónap
Hüvelyi minták és száraz minták analízise ellenőrzött állapotban, a hamis pozitív és a valódi negatívok arányának meghatározására.
3 hónap

Együttműködők és nyomozók

Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.

Szponzor

University Hospital, Montpellier

Nyomozók

  • Tanulmányi igazgató: Pierre-Antoine PEYRON, PI, University Hospital, Montpellier

Publikációk és hasznos linkek

A vizsgálattal kapcsolatos információk beviteléért felelős személy önkéntesen bocsátja rendelkezésre ezeket a kiadványokat. Ezek bármiről szólhatnak, ami a tanulmányhoz kapcsolódik.

Általános kiadványok

Hasznos linkek

Tanulmányi rekorddátumok

Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.

Tanulmány főbb dátumok

Tanulmány kezdete (Becsült)

2024. január 15.

Elsődleges befejezés (Becsült)

2024. július 15.

A tanulmány befejezése (Becsült)

2024. december 31.

Tanulmányi regisztráció dátumai

Először benyújtva

2023. augusztus 18.

Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2023. december 13.

Első közzététel (Becsült)

2023. december 27.

Tanulmányi rekordok frissítései

Utolsó frissítés közzétéve (Becsült)

2023. december 27.

Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2023. december 13.

Utolsó ellenőrzés

2023. december 1.

Több információ

A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések

Kulcsszavak

Egyéb vizsgálati azonosító számok

  • RECHMPL23_0098

Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok

Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz

Nem

Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz

Nem

Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .

Klinikai vizsgálatok a Nyálgyűjtemény

Keressen hasonló próbaverziókban

Szponzorok és közreműködők

Egészségi állapot

Kábítószer-beavatkozások

CROs by country

CROs in Mauritius

Körülmények

Ritka betegségek

Kábítószer-beavatkozások

Táplálék-kiegészítők

Szponzor / közreműködők

Helyek

3
Iratkozz fel