Deze pagina is automatisch vertaald en de nauwkeurigheid van de vertaling kan niet worden gegarandeerd. Raadpleeg de Engelse versie voor een brontekst.

Detectie van speeksel door immunoaffiniteit en massaspectrometrie (SIMS)

13 december 2023 bijgewerkt door: University Hospital, Montpellier

Detectie van specifieke speekseleiwitten door immunoaffiniteit en massaspectrometrie

De identificatie van speeksel in het genitale gebied tijdens een strafrechtelijk onderzoek kan een cruciaal onderdeel zijn bij de vervolging van een aanranding in Frankrijk, aangezien orale geslachtsgemeenschap zonder wederzijds goedvinden sinds 2021 als misdaden wordt beschouwd. De ontwikkeling van zeer specifieke methoden voor speeksel detectie is daarom van cruciaal belang omdat de algemeen gebruikte screeningsmethoden niet specifiek zijn. Eiwitmassaspectrometrie is een gevoelige en specifieke methode gebleken, maar is bijzonder tijdrovend. Een snellere en gevoeliger hybride aanpak met behulp van geautomatiseerde immunoaffiniteitsmassaspectrometrie (IP-LC-MS/MS) is onlangs ontwikkeld en blijkt bijzonder performant te zijn voor de detectie van een zaadvloeistofeiwit (semenogeline), waardoor een hoge doorvoer mogelijk is. identificatie van zaadvloeistoffen in spermamonsters. Net als semenogeline konden specifieke speekseleiwitten zoals histatine type 1, cystatine D of prolinerijke eiwitten (PRP's) worden gedetecteerd met behulp van deze veelbelovende aanpak, die nog nooit op speekselmonsters is getest. In samenwerking met het Clinical Proteomics Platform en de afdeling Reproductieve Geneeskunde van het Universitair Ziekenhuis van Montpellier willen we een protocol ontwikkelen voor de detectie van specifieke speekseleiwitten door IP-LC-MS/MS in monsters van het type seksueel geweld.

Studie Overzicht

Toestand

Nog niet aan het werven

Conditie

Interventie / Behandeling

Gedetailleerde beschrijving

Elke deelnemer wordt de dag vóór het bezoek telefonisch gecontacteerd om een ​​presentatie over het onderzoek te geven. Op de dag van het bezoek worden twee soorten monsters verzameld:

  • Speekselmonsters: bij gezonde vrijwilligers op de afdeling Juridische Geneeskunde (voor elke vrijwilliger worden 2 monsters van 1,5 - 2 ml afgenomen).
  • Vaginale monsters: bij vrouwen die consulteren op de afdeling Reproductieve Geneeskunde (2 droge uitstrijkjes per patiënt). 2 groepen, één groep met alleen vaginale secretievloeistofmonsters en één groep met vaginale secretievloeistof + spermamonsters.

Studietype

Ingrijpend

Inschrijving (Geschat)

35

Fase

  • Niet toepasbaar

Contacten en locaties

In dit gedeelte vindt u de contactgegevens van degenen die het onderzoek uitvoeren en informatie over waar dit onderzoek wordt uitgevoerd.

Studiecontact

Studie Contact Back-up

Studie Locaties

  • Frankrijk
      • Montpellier, Frankrijk, 34295
        • PEYRON

Deelname Criteria

Onderzoekers zoeken naar mensen die aan een bepaalde beschrijving voldoen, de zogenaamde geschiktheidscriteria. Enkele voorbeelden van deze criteria zijn iemands algemene gezondheidstoestand of eerdere behandelingen.

Geschiktheidscriteria

Leeftijden die in aanmerking komen voor studie

  • Volwassen
  • Oudere volwassene

Accepteert gezonde vrijwilligers

Ja

Beschrijving

Inclusiecriteria:

Speekselmonsters

  • Mannen en vrouwen van 18 jaar of ouder

Vaginale monsters:

  • Vrouwen van 18 jaar of ouder
  • Geen onbeschermde vaginale geslachtsgemeenschap gedurende de 10 dagen voorafgaand aan het bezoek (groep 1)
  • Onbeschermde vaginale geslachtsgemeenschap met ejaculatie in de 24 uur voorafgaand aan het bezoek (groep 2)

Uitsluitingscriteria:

Speekselmonsters:

  • Actieve pathologie van de speekselklieren (infectie, tumor)
  • Onbeschermde orale-genitale geslachtsgemeenschap in de 24 uur voorafgaand aan het bezoek
  • Het niet verkrijgen van schriftelijke geïnformeerde toestemming na bedenktijd
  • Zwangere vrouwen of vrouwen die borstvoeding geven
  • Volwassene beschermd door de wet of onder voogdij of curatele
  • Geen aansluiting bij het Franse socialezekerheidsstelsel of geen voordeel uit een dergelijk systeem

Vaginale monsters:

  • Oraal-genitale geslachtsgemeenschap (cunnilingus) in de 24 uur voorafgaand aan het bezoek
  • Het niet verkrijgen van schriftelijke geïnformeerde toestemming na bedenktijd
  • Zwangere vrouwen of vrouwen die borstvoeding geven
  • Volwassene beschermd door de wet of onder voogdij of curatele
  • Geen aansluiting bij het Franse socialezekerheidsstelsel of geen voordeel uit een dergelijk systeem

Studie plan

Dit gedeelte bevat details van het studieplan, inclusief hoe de studie is opgezet en wat de studie meet.

Hoe is de studie opgezet?

Ontwerpdetails

  • Primair doel: Ander
  • Toewijzing: Niet-gerandomiseerd
  • Interventioneel model: Parallelle opdracht
  • Masker: Geen (open label)

Wapens en interventies

Deelnemersgroep / Arm
Interventie / Behandeling
Ander: Speeksel

Verzameling van twee speekselmonsters (ca. 1,5 tot 2 ml elk) door passief kwijlen bij gezonde vrijwilligers

Deze monsters worden gecentrifugeerd en het supernatant wordt verzameld.
Ander: Speekselverzameling
Verzameling van 2 monsters van 1,5 tot 2 ml speeksel door passieve speekselvloed bij gezonde vrijwilligers
Ander: IP-LC-MS/MS: verrijking van immunoprecipitatie met vloeistofchromatografie gekoppeld aan tandemmassaspectrometrie

monstervoorbereiding en analyse:

  • Impregnatie van de tips (absorberend katoen) van steriele droge wattenstaafjes en vaginale wattenstaafjes met gecontroleerde hoeveelheden speeksel.
  • Immunocapture van speekseleiwitten van belang (histatine type 1, cystatine D, PRP's) door proteïne A-affiniteitszuivering
  • LC-MS/MS-analyse van geëlueerde gezuiverde peptiden (Multiple Reaction Monitoring-modus)

Er zullen verdunningen worden gemaakt van 10 tot 10 (1/10, 1/100, 1/1000...), en vervolgens na het bereiken van een detecteerbaarheidsdrempel, gespecificeerd door een tweede nauwkeurigere analyse (bijvoorbeeld als er geen signaal is op 1/1000, analyse bij 1/500, daarna 1/250 enz.). De analytische gevoeligheid zal worden getest op drie monsters van elk type (speeksel, vaginaal, vaginaal + sperma) om de reproduceerbaarheid van de resultaten te garanderen.

Operators, die zich niet bewust zijn van de aanwezigheid van speeksel in de monsters, zullen vervolgens speekselspecifieke eiwitdetectieanalyses uitvoeren met behulp van de IP-LC-MS/MS-methode.
Ander: Vaginale afscheidingen
Om zo dicht mogelijk bij het echte leven te komen, worden tijdens het gynaecologisch onderzoek (voorafgaand aan een endovaginale echografie of een ander endovaginale procedure) van patiënten die zijn opgenomen in de Dienst Reproductieve Geneeskunde.
Ander: IP-LC-MS/MS: verrijking van immunoprecipitatie met vloeistofchromatografie gekoppeld aan tandemmassaspectrometrie

monstervoorbereiding en analyse:

  • Impregnatie van de tips (absorberend katoen) van steriele droge wattenstaafjes en vaginale wattenstaafjes met gecontroleerde hoeveelheden speeksel.
  • Immunocapture van speekseleiwitten van belang (histatine type 1, cystatine D, PRP's) door proteïne A-affiniteitszuivering
  • LC-MS/MS-analyse van geëlueerde gezuiverde peptiden (Multiple Reaction Monitoring-modus)

Er zullen verdunningen worden gemaakt van 10 tot 10 (1/10, 1/100, 1/1000...), en vervolgens na het bereiken van een detecteerbaarheidsdrempel, gespecificeerd door een tweede nauwkeurigere analyse (bijvoorbeeld als er geen signaal is op 1/1000, analyse bij 1/500, daarna 1/250 enz.). De analytische gevoeligheid zal worden getest op drie monsters van elk type (speeksel, vaginaal, vaginaal + sperma) om de reproduceerbaarheid van de resultaten te garanderen.

Operators, die zich niet bewust zijn van de aanwezigheid van speeksel in de monsters, zullen vervolgens speekselspecifieke eiwitdetectieanalyses uitvoeren met behulp van de IP-LC-MS/MS-methode.

Ander: Vaginale secretiecollectie
Verzameling van vaginale afscheiding met 2 droge wattenstaafjes bij vrouwen

Wat meet het onderzoek?

Primaire uitkomstmaten

Uitkomstmaat
Maatregel Beschrijving
Tijdsspanne
Reproduceerbaarheid tussen speekselmonsters
Tijdsspanne: 3 maanden

Overeenstemming tussen de beoordelaars over speekselmonsters, waarbij het eerste monster wordt getest en het tweede monster opnieuw wordt getest

Het primaire eindpunt van de studie zal zijn het meten van de betrouwbaarheid van het protocol, bestaande uit reproduceerbaarheid of overeenstemming tussen de beoordelaars, voor de detectie van specifieke speekseleiwitten (histatine type 1, PRP's, cystatine D) met behulp van de IP-LC-MS/MS-methode. op volwassen speekselmonsters.

De overeenstemming tussen de beoordelaars (test/hertest) wordt gemeten aan de hand van hun gemiddelden +/- standaarddeviatie.

Er zullen meerdere analyses (tussen 3 of 4) op hetzelfde monster worden uitgevoerd om te bepalen of de resultaten identiek zijn
3 maanden
Gemiddelde betrouwbaarheid tussen technici op het gebied van speekselmonsters
Tijdsspanne: 3 maanden

Overeenkomst tussen beoordelaars (Cohen's kappa-coëfficiënt) over speekselmonsters, waarbij meerdere monsters worden getest door ten minste twee verschillende technici

Het primaire eindpunt van de studie zal het meten van de betrouwbaarheid van het protocol zijn, bestaande uit intermediaire betrouwbaarheid of overeenstemming tussen beoordelaars (Cohen's kappa-coëfficiënt) voor de detectie van specifieke speekseleiwitten (histatine type 1, PRP's, cystatine D) met behulp van de IP-LC -MS/MS-methode op speekselmonsters van volwassenen.

De kappa-coëfficiënt geeft een score variërend van 0 tot 1. Als de codeerders het er helemaal mee eens zijn, is κ = 1. Als ze het er totaal niet mee eens zijn (of het er puur door toeval mee eens zijn), κ ≤ 0.
3 maanden

Secundaire uitkomstmaten

Uitkomstmaat
Maatregel Beschrijving
Tijdsspanne
Reproduceerbaarheid tussen vaginale monsters gedrenkt in speeksel
Tijdsspanne: 3 maanden

Overeenstemming tussen de beoordelaars over met speeksel gedrenkte vaginale monsters

De secundaire eindpunten zullen bestaan ​​uit het herhalen van de primaire eindpunten (d.w.z. reproduceerbaarheid en gemiddelde betrouwbaarheid) op de vaginale monsters, al dan niet geïmpregneerd met sperma.

Ook hier zal hetzelfde monster verschillende keren worden getest (tussen 3 of 4) om te zien of de resultaten vergelijkbaar zijn.
3 maanden
Gemiddelde betrouwbaarheid tussen technici op vaginale monsters gedrenkt in speeksel
Tijdsspanne: 3 maanden

: Interbeoordelaarsovereenkomst (Cohen's kappa-coëfficiënt) over vaginale monsters gedrenkt in speeksel

De secundaire eindpunten zullen bestaan ​​uit het herhalen van de primaire eindpunten (d.w.z. reproduceerbaarheid en gemiddelde betrouwbaarheid) op de vaginale monsters, al dan niet geïmpregneerd met sperma.

De kappa-coëfficiënt geeft een score variërend van 0 tot 1. Als de codeerders het er helemaal mee eens zijn, is κ = 1. Als ze het er totaal niet mee eens zijn (of het er puur door toeval mee eens zijn), κ ≤ 0.
3 maanden
Analytische gevoeligheid
Tijdsspanne: 3 maanden
Laagste speekselconcentratie (μL) gedetecteerd door de methode op speekselmonsters en op vaginale monsters gedrenkt in speeksel in gecontroleerde toestand
3 maanden
Diagnostische gevoeligheid
Tijdsspanne: 3 maanden
Analyse van speekselmonsters en met speeksel gedrenkte vaginale monsters in gecontroleerde toestand, om de detectiesnelheid van echte positieven en fout-negatieven te bepalen
3 maanden
Diagnostische specificiteit
Tijdsspanne: 3 maanden
Analyse van vaginale monsters en droge monsters in gecontroleerde toestand, om het aantal valse positieven en echte negatieven te bepalen.
3 maanden

Medewerkers en onderzoekers

Hier vindt u mensen en organisaties die betrokken zijn bij dit onderzoek.

Sponsor

University Hospital, Montpellier

Onderzoekers

  • Studie directeur: Pierre-Antoine PEYRON, PI, University Hospital, Montpellier

Publicaties en nuttige links

De persoon die verantwoordelijk is voor het invoeren van informatie over het onderzoek stelt deze publicaties vrijwillig ter beschikking. Dit kan gaan over alles wat met het onderzoek te maken heeft.

Algemene publicaties

Nuttige links

Studie record data

Deze datums volgen de voortgang van het onderzoeksdossier en de samenvatting van de ingediende resultaten bij ClinicalTrials.gov. Studieverslagen en gerapporteerde resultaten worden beoordeeld door de National Library of Medicine (NLM) om er zeker van te zijn dat ze voldoen aan specifieke kwaliteitscontrolenormen voordat ze op de openbare website worden geplaatst.

Bestudeer belangrijke data

Studie start (Geschat)

15 januari 2024

Primaire voltooiing (Geschat)

15 juli 2024

Studie voltooiing (Geschat)

31 december 2024

Studieregistratiedata

Eerst ingediend

18 augustus 2023

Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria

13 december 2023

Eerst geplaatst (Geschat)

27 december 2023

Updates van studierecords

Laatste update geplaatst (Geschat)

27 december 2023

Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria

13 december 2023

Laatst geverifieerd

1 december 2023

Meer informatie

Termen gerelateerd aan deze studie

Trefwoorden

Andere studie-ID-nummers

  • RECHMPL23_0098

Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten

Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel

Nee

Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct

Nee

Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .

Klinische onderzoeken op Speekselverzameling

Zoek naar vergelijkbare onderzoeken

Sponsors en medewerkers

Medische omstandigheden

Geneesmiddelinterventies

CROs by country

CROs in Saudi Arabia

Voorwaarden

Zeldzame ziekten

Geneesmiddelinterventies

Voedingssupplementen

Sponsor / medewerkers

Locaties

3
Abonneren