Detección de Saliva por Inmunoafinidad y Espectrometría de Masas (SIMS)
Detección de proteínas salivales específicas mediante inmunoafinidad y espectrometría de masas
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Descripción detallada
Cada participante será contactado mediante una llamada telefónica el día anterior a la visita, para presentarse a una presentación del estudio. El día de la visita se recogerán dos tipos de muestras:
- Muestras de saliva: en voluntarios sanos en el Departamento de Medicina Legal (se recolectan 2 muestras de 1,5 - 2 mL por cada voluntario).
- Muestras vaginales: en mujeres que consultan en el Departamento de Medicina Reproductiva (2 hisopos secos en cada paciente). 2 grupos, un grupo con muestras de líquido de secreción vaginal únicamente y un grupo con muestras de líquido de secreción vaginal + muestras de esperma.
Tipo de estudio
Inscripción (Estimado)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Pierre-Antoine PEYRON, PI
- Número de teléfono: +33 04 67 33 85 86
- Correo electrónico: pa-peyron@chu-montpellier.fr
Copia de seguridad de contactos de estudio
- Nombre: Laëtitia LEVEQUE
- Número de teléfono: +33 04 67 33 85 86
- Correo electrónico: l-leveque@chu-montpellier.fr
Ubicaciones de estudio
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Montpellier, Francia, 34295
- PEYRON
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
- Adulto
- Adulto Mayor
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios de inclusión:
Muestras de saliva
- Hombres y mujeres de 18 años o más
Muestras vaginales:
- Mujeres de 18 años o más
- No tener relaciones sexuales vaginales sin protección durante los 10 días previos a la visita (grupo 1)
- Relaciones sexuales vaginales sin protección con eyaculación en las 24 horas previas a la visita (grupo 2)
Criterio de exclusión:
Muestras de saliva:
- Patología activa de las glándulas salivales (infección, tumor).
- Relaciones sexuales bucogenitales sin protección en las 24 horas previas a la visita
- No obtención del consentimiento informado por escrito tras un periodo de reflexión
- Mujeres embarazadas o en periodo de lactancia
- Mayor de edad protegido por ley o bajo tutela o curaduría
- Ninguna afiliación al sistema de seguridad social francés o ningún beneficio de dicho sistema
Muestras vaginales:
- Relaciones sexuales bucogenitales (cunnilingus) en las 24 horas previas a la visita
- No obtención del consentimiento informado por escrito tras un periodo de reflexión
- Mujeres embarazadas o en período de lactancia
- Mayor de edad protegido por ley o bajo tutela o curaduría
- Ninguna afiliación al sistema de seguridad social francés o ningún beneficio de dicho sistema
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Otro
- Asignación: No aleatorizado
- Modelo Intervencionista: Asignación paralela
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Otro: Saliva
Recogida de dos muestras de saliva (aprox. 1,5 a 2 ml cada uno) mediante babeo pasivo en voluntarios sanos Estas muestras se centrifugarán y se recogerá el sobrenadante. |
Recogida de 2 muestras de 1,5 a 2mL de saliva mediante salivación pasiva en voluntarios sanos.
preparación y análisis de muestras:
Se realizarán diluciones de 10 a 10 (1/10, 1/100, 1/1000...), luego de alcanzar un umbral de detectabilidad, especificado por un segundo análisis más preciso (por ejemplo, si no hay señal en 1/1000, análisis a 1/500 luego 1/250, etc.). La sensibilidad analítica se probará en tres muestras de cada tipo (salival, vaginal, vaginal + semen) para garantizar la reproducibilidad de los resultados. Los operadores, que desconocen la presencia de saliva en las muestras, realizarán un análisis de detección de proteínas específicas de la saliva utilizando el método IP-LC-MS/MS. |
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Otro: Secreciones vaginales
Para acercarse lo más posible a la vida real, se tomarán dos hisopos vaginales (introducidos a través del orificio vaginal en una longitud de 2 a 3 cm) con un hisopo seco estéril durante el examen ginecológico (previo a la ecografía endovaginal o cualquier otro procedimiento endovaginal) de pacientes incluidas en el Servicio de Medicina Reproductiva.
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preparación y análisis de muestras:
Se realizarán diluciones de 10 a 10 (1/10, 1/100, 1/1000...), luego de alcanzar un umbral de detectabilidad, especificado por un segundo análisis más preciso (por ejemplo, si no hay señal en 1/1000, análisis a 1/500 luego 1/250, etc.). La sensibilidad analítica se probará en tres muestras de cada tipo (salival, vaginal, vaginal + semen) para garantizar la reproducibilidad de los resultados. Los operadores, que desconocen la presencia de saliva en las muestras, realizarán un análisis de detección de proteínas específicas de la saliva utilizando el método IP-LC-MS/MS.
Recolección de secreciones vaginales con 2 hisopos secos en mujeres
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Reproducibilidad entre muestras de saliva.
Periodo de tiempo: 3 meses
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Acuerdo entre evaluadores sobre muestras de saliva, que implica analizar la primera muestra y volver a analizar la segunda muestra. El criterio de valoración principal del estudio será medir la confiabilidad del protocolo, consistente en reproducibilidad o acuerdo intra-evaluador, para la detección de proteínas salivales específicas (histatina tipo 1, PRP, cistatina D) utilizando el método IP-LC-MS/MS en muestras de saliva de adultos. El acuerdo entre evaluadores (prueba/reprueba) se medirá por sus medias +/- desviación estándar. Se realizarán varios análisis (entre 3 o 4) sobre una misma muestra para determinar si los resultados son idénticos |
3 meses
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Fidelidad intermedia entre técnicos en muestras de saliva.
Periodo de tiempo: 3 meses
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Acuerdo entre evaluadores (coeficiente kappa de Cohen) sobre muestras de saliva, que implica analizar varias muestras por al menos 2 técnicos diferentes El criterio de valoración principal del estudio será medir la confiabilidad del protocolo, que consiste en fidelidad intermedia o acuerdo entre evaluadores (coeficiente kappa de Cohen) para la detección de proteínas salivales específicas (histatina tipo 1, PRP, cistatina D) utilizando el IP-LC -Método MS/MS en muestras de saliva de adultos. El coeficiente kappa da una puntuación que va de 0 a 1. Si los codificadores están totalmente de acuerdo, κ = 1. Si están totalmente en desacuerdo (o están de acuerdo únicamente por casualidad), κ ≤ 0. |
3 meses
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Reproducibilidad entre muestras vaginales empapadas de saliva.
Periodo de tiempo: 3 meses
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Acuerdo intraevaluador sobre muestras vaginales empapadas de saliva Los criterios de valoración secundarios consistirán en repetir los criterios de valoración primarios (es decir, reproducibilidad y fidelidad intermedia) sobre las muestras vaginales impregnadas o no de esperma. Nuevamente, la misma muestra se analizará varias veces (entre 3 o 4) para ver si los resultados son similares. |
3 meses
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Fidelidad intermedia entre técnicos sobre muestras vaginales empapadas de saliva.
Periodo de tiempo: 3 meses
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: Acuerdo entre evaluadores (coeficiente kappa de Cohen) en muestras vaginales empapadas de saliva Los criterios de valoración secundarios consistirán en repetir los criterios de valoración primarios (es decir, reproducibilidad y fidelidad intermedia) sobre las muestras vaginales impregnadas o no de esperma. El coeficiente kappa da una puntuación que va de 0 a 1. Si los codificadores están totalmente de acuerdo, κ = 1. Si están totalmente en desacuerdo (o están de acuerdo únicamente por casualidad), κ ≤ 0. |
3 meses
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Sensibilidad analítica
Periodo de tiempo: 3 meses
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Concentración de saliva más baja (μL) detectada por el método en muestras de saliva y en muestras vaginales empapadas con saliva en condiciones controladas
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3 meses
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Sensibilidad diagnóstica
Periodo de tiempo: 3 meses
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Análisis de muestras de saliva y muestras vaginales empapadas de saliva en condiciones controladas, para determinar la tasa de detección de verdaderos positivos y falsos negativos.
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3 meses
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Especificidad diagnóstica
Periodo de tiempo: 3 meses
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Análisis de muestras vaginales y muestras secas en condiciones controladas, para determinar la tasa de falsos positivos y verdaderos negativos.
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3 meses
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Director de estudio: Pierre-Antoine PEYRON, PI, University Hospital, Montpellier
Publicaciones y enlaces útiles
Publicaciones Generales
- LOI n°2021-478 du 21 avril 2021 visant à protéger les mineurs des crimes et délits sexuels et de l'inceste. JORF n°0095 du 22 avril 2021. Texte n°4
- Wornes DJ, Speers SJ, Murakami JA. The evaluation and validation of Phadebas(R) paper as a presumptive screening tool for saliva on forensic exhibits. Forensic Sci Int. 2018 Jul;288:81-88. doi: 10.1016/j.forsciint.2018.03.049. Epub 2018 Apr 20.
- Vandenberg N, van Oorschot RA. The use of Polilight in the detection of seminal fluid, saliva, and bloodstains and comparison with conventional chemical-based screening tests. J Forensic Sci. 2006 Mar;51(2):361-70. doi: 10.1111/j.1556-4029.2006.00065.x.
- Blanchard Muller M., Baccino E., Peyron P.A. Détection de traces salivaires dans le cadre d'agressions sexuelles : intérêt de l'utilisation d'une méthode immuno-chromatographique rapide (RSID-SalivaTest®) selon un protocole simplifié. Rev Médecine Légale 2023.
- Davidovics R, Saw YL, Brown CO, Prinz M, McKiernan HE, Danielson PB, Legg KM. High-throughput seminal fluid identification by automated immunoaffinity mass spectrometry. J Forensic Sci. 2022 May;67(3):1184-1190. doi: 10.1111/1556-4029.14975. Epub 2022 Jan 13.
- Sato H, Nakajima D, Ishikawa M, Konno R, Nakamura R, Ohara O, Kawashima Y. Evaluation of the Suitability of Dried Saliva Spots for In-Depth Proteome Analyses for Clinical Applications. J Proteome Res. 2022 May 6;21(5):1340-1348. doi: 10.1021/acs.jproteome.2c00099. Epub 2022 Apr 21.
- Yang H, Zhou B, Deng H, Prinz M, Siegel D. Body fluid identification by mass spectrometry. Int J Legal Med. 2013 Nov;127(6):1065-77. doi: 10.1007/s00414-013-0848-1. Epub 2013 Mar 24.
- Brown CO, Robbins BL, McKiernan HE, Danielson PB, Legg KM. Direct seminal fluid identification by protease-free high-resolution mass spectrometry. J Forensic Sci. 2021 May;66(3):1017-1023. doi: 10.1111/1556-4029.14646. Epub 2020 Dec 8.
- Legg KM, Powell R, Reisdorph N, Reisdorph R, Danielson PB. Discovery of highly specific protein markers for the identification of biological stains. Electrophoresis. 2014 Nov;35(21-22):3069-78. doi: 10.1002/elps.201400125. Epub 2014 Oct 1.
- Van Steendam K, De Ceuleneer M, Dhaenens M, Van Hoofstat D, Deforce D. Mass spectrometry-based proteomics as a tool to identify biological matrices in forensic science. Int J Legal Med. 2013 Mar;127(2):287-98. doi: 10.1007/s00414-012-0747-x. Epub 2012 Jul 29.
- Illiano A, Arpino V, Pinto G, Berti A, Verdoliva V, Peluso G, Pucci P, Amoresano A. Multiple Reaction Monitoring Tandem Mass Spectrometry Approach for the Identification of Biological Fluids at Crime Scene Investigations. Anal Chem. 2018 May 1;90(9):5627-5636. doi: 10.1021/acs.analchem.7b04742. Epub 2018 Apr 13.
- Legg KM, Powell R, Reisdorph N, Reisdorph R, Danielson PB. Verification of protein biomarker specificity for the identification of biological stains by quadrupole time-of-flight mass spectrometry. Electrophoresis. 2017 Mar;38(6):833-845. doi: 10.1002/elps.201600352. Epub 2017 Jan 30.
- de Beijer RP, de Graaf C, van Weert A, van Leeuwen TG, Aalders MCG, van Dam A. Identification and detection of protein markers to differentiate between forensically relevant body fluids. Forensic Sci Int. 2018 Sep;290:196-206. doi: 10.1016/j.forsciint.2018.07.013. Epub 2018 Jul 24.
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Estimado)
Finalización primaria (Estimado)
Finalización del estudio (Estimado)
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Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Otros números de identificación del estudio
- RECHMPL23_0098
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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