Calafiore と改良型 Del Nido 心停止液使用時の心筋内アミノ酸の変化の比較

待機的一次冠動脈バイパス移植術を受けている連続20人の患者がこの研究に登録された。 以前に心筋梗塞を患っていた患者、駆出率が低下していた患者、または複合手術または繰り返し手術を受けている患者は、この研究から除外された。 患者は、心筋保護のための 2 つの方法のいずれかを使用して手術を受けるようにランダムに割り当てられました。

• グループ 1: Calafiore 間欠的順行性温血心麻痺 (正常温ポンプ血液、塩化カリウム 2 mEq/ml および硫酸マグネシウム 50% からなる)。 この心停止溶液は、大動脈クロスクランプの適用後に 37 ℃で投与され、前述のように各遠位冠状動脈吻合の完了後に繰り返されました。
• グループ 2: 修正デルニド間欠順行性冷血心停止液 (750 ml の乳酸リンゲル液、200 ml のポンプ血液、13 ml の重炭酸ナトリウム 8.4%、16 ml のマンニトール 20%、4 ml の硫酸マグネシウム 50% からなる) 、１３ｍｌのリドカイン２％および１３ｍｌの塩化カリウム２ｍＥｑ／ｍｌ）。 この溶液は、大動脈クロスクランプの適用後に 3 ～ 4 ℃で 1 リットルのボーラスとして投与され、クロスクランプ時間が 60 分を超えた場合には 500 ml のボーラスとして繰り返し投与されました（この研究の患者はいません）。 。

研究に登録された各患者は、研究データの公表について書面によるインフォームドコンセントを提出し、研究プロトコールは、13日付の地元のヒト研究委員会番号171による事前承認に反映されている1975年のヘルシンキ宣言の倫理ガイドラインに準拠していた。 2022年4月

血液サンプルの収集と心筋生検 末梢血サンプルは手術の直前と術後 4、12、24、および 48 時間後に収集され、心臓酵素 (CK-MB およびトロポニン I) の血中濃度の測定に使用されました。

心筋生検（湿重量 4 ～ 14 mg）は、以下のようにすべての患者の左心室の心尖部から Tru-cut 針を使用して採取されました。

• 生検 1: 体外循環開始直後の「静止標本」。
• 生検 2:「虚血標本」、大動脈クロスクランプの適用後 30 分。
• 生検 3: 「再灌流標本」、大動脈クロスクランプの除去後 20 分。

各標本は、アミノ酸と乳酸の分析のために処理するまで、液体窒素 (-185 ℃) 中で即座に急速冷凍されました。

心臓酵素 (CK-MB およびトロポニン I) の測定 免疫蛍光スキャナー (iChroma II、Boditech Med Incorporated、韓国、および Obelis s.a、ベルギー) を使用して分析を実行しました。 CK-MBの血中レベルはmg/dlとして表され、トロポニンIのレベルはng/mlとして表された。

心筋アミノ酸および乳酸濃度の測定 各凍結生検標本の重量を量り（Laboratory Analytical Balance、Sartorius、Germany）、液体窒素中で粉砕し、1000 μmol の 0.9% 生理食塩水中で均質化しました。 ホモジネートの４００マイクロモルのサンプルをエッペンドルフチューブに移し、１００マイクロモルのＨＰＬＣ水を加えた。 次に、各サンプルを 4 ℃で 1 時間保存し、その後 10000 回転/分で 5 分間遠心分離しました。 上清の４００マイクロモルサンプルを、０．２μｍのＶｉｖａｓｐｉｎ（登録商標）５００膜フィルター（Ｓａｔｏｒｉｕｓ、ドイツ）を通して濾過し、エッペンドルフチューブに移し、１００００回転／分で５分間遠心分離した。 濾液の３００マイクロモルのサンプルをエッペンドルフチューブに移し、等量のサンプル希釈緩衝液（ｍｅｍｂｒａＰｕｒｅ、ドイツ）を加えた。 この溶液は、A300 アミノ酸分析装置 (ARACUS、membraPure、ドイツ) を使用して 7 つのアミノ酸 (アラニン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、リジン、オルニチン、タウリン) の濃度を測定するために使用されました。 専用の血漿乳酸測定キットおよび分析装置 (LACT2、cobas、Roche Diagnostics GmbH、ドイツ) を使用して乳酸濃度も測定しました。 アミノ酸と乳酸の濃度は、μmol/g 湿重量として表されました。