Jämförelse av förändringar i intramyokardiella aminosyror under användning av Calafiore och modifierade del Nido kardioplegiska lösningar

Tjugo på varandra följande patienter som genomgick elektiv primär kranskärlsbypasstransplantation inkluderades i denna studie. Patienter uteslöts från denna studie om de hade lidit av tidigare hjärtinfarkt, hade reducerad ejektionsfraktion eller genomgick kombinerad eller upprepad operation. Patienterna tilldelades slumpmässigt att genomgå operation med en av två metoder för myokardskydd:

• Grupp 1: Calafiore intermittent antegrad varmblodskardioplegi (bestående av normotermiskt pumpblod, kaliumklorid 2 mEq/ml och magnesiumsulfat 50%). Denna kardioplegiska lösning administrerades vid 37 grader C efter applicering av aorta-korsklämman och upprepades efter fullbordande av varje distal koronar anastomos såsom beskrivits tidigare.
• Grupp 2: Modifierad del Nido intermittent antegrad kallblods kardioplegisk lösning (bestående av 750 ml lakterad Ringer-lösning, 200 ml pumpblod, 13 ml natriumbikarbonat 8,4 %, 16 ml mannitol 20 %, 4 ml magnesiumsulfat 50 % 13 ml lidokain 2% och 13 ml kaliumklorid 2 mekv/ml). Denna lösning administrerades som en 1-liters bolus vid 3-4 grader C efter applicering av aorta-korsklämman, och upprepades som en 500 ml bolus om korsklämningstiden sträckte sig över 60 minuter (ingen av patienterna i denna studie) .

Varje patient som ingick i studien gav ett skriftligt informerat samtycke för publicering av studiedata, och studieprotokollet överensstämde med de etiska riktlinjerna i Helsingforsdeklarationen 1975, vilket återspeglas i ett förhandsgodkännande av den lokala humanforskningskommittén nummer 171 daterad 13. april 2022

Insamling av blodprover och myokardbiopsier Perifera blodprover togs omedelbart före operationen och 4, 12, 24 och 48 timmar postoperativt och användes för bestämning av blodkoncentrationer av hjärtenzymer (CK-MB och troponin I).

Myokardbiopsier (4-14 mg våtvikt) togs med en Tru-cut nål från spetsen av den vänstra ventrikeln hos varje patient enligt följande:

• Biopsi 1: "Viloprov", omedelbart efter början av extrakorporeal cirkulation.
• Biopsi 2: "Ischemic specimen", 30 minuter efter applicering av aorta cross-clamp.
• Biopsi 3: "Reperfusionsprov", 20 minuter efter avlägsnandet av aorta-korsklämman.

Varje prov frystes omedelbart i flytande kväve (-185 grader C) fram till bearbetning för analyser av aminosyror och mjölksyra.

Bestämning av hjärtenzymer (CK-MB och troponin I) Analyser utfördes med användning av en immunfluorescensskanner (iChroma II, Boditech Med Incorporated, Korea och Obelis s.a., Belgien). Blodnivåer av CK-MB uttrycktes som mg/dl och nivåer av troponin I uttrycktes som ng/ml.

Bestämning av myokardaminosyra- och mjölksyrakoncentrationer Varje fryst biopsiprov vägdes (Laboratory Analytical Balance, Sartorius, Tyskland), krossades i flytande kväve och homogeniserades i 1000 mikromol 0,9 % normal koksaltlösning. Ett 400 mikromol prov av homogenatet överfördes till ett Eppendorf-rör och 100 mikromol HPLC-vatten tillsattes. Varje prov förvarades sedan vid 4 grader C under en timme, varefter det centrifugerades vid 10 000 varv/min under 5 minuter. Ett 400 mikromol prov av supernatanten filtrerades genom ett Vivaspin® 500 membranfilter 0,2 µm (Satorius, Tyskland), överfördes till ett Eppendorf-rör och centrifugerades vid 10 000 varv/min under 5 minuter. Ett 300 mikromol prov av filtratet överfördes till ett Eppendorf-rör och en lika stor volym provspädningsbuffert (membraPure, Tyskland) tillsattes. Denna lösning användes för att bestämma koncentrationerna av 7 aminosyror (alanin, glutamin, glutaminsyra, glycin, lysin, ornitin och taurin) med användning av A300 Amino Acid Analyzer (ARACUS, membraPure, Tyskland). Mjölksyrakoncentrationer mättes också med användning av en dedikerad plasmalaktatbestämningssats och analysator (LACT2, cobas, Roche Diagnostics GmbH, Tyskland). Koncentrationer av aminosyror och mjölksyra uttrycktes som mikromol/g våtvikt.