Comparaison des modifications des acides aminés intra-myocardiques lors de l'utilisation de solutions cardioplégiques Calafiore et Del Nido modifiées

Vingt patients consécutifs subissant un pontage coronarien primaire électif ont été inclus dans cette étude. Les patients ont été exclus de cette étude s'ils avaient déjà souffert d'un infarctus du myocarde, s'ils avaient une fraction d'éjection réduite ou s'ils subissaient une intervention chirurgicale combinée ou répétée. Les patients ont été répartis au hasard pour subir une intervention chirurgicale en utilisant l'une des deux méthodes de protection myocardique :

• Groupe 1 : Cardiplégie intermittente à sang chaud antérograde de Calafiore (constituée de sang de pompe normothermique, de chlorure de potassium 2 mEq/ml et de sulfate de magnésium 50 %). Cette solution cardioplégique a été administrée à 37 degrés C après l'application du clamp aortique et répétée après la réalisation de chaque anastomose coronarienne distale comme décrit précédemment.
• Groupe 2 : Solution cardioplégique de sang froid antérograde intermittent Del Nido modifiée (constituée de 750 ml de solution de Ringer lactée, 200 ml de sang de pompe, 13 ml de bicarbonate de sodium 8,4%, 16 ml de mannitol 20%, 4 ml de sulfate de magnésium 50% , 13 ml de lidocaïne 2% et 13 ml de chlorure de potassium 2 mEq/ml). Cette solution a été administrée sous forme de bolus de 1 litre à 3-4 °C après l'application du clampage aortique, et répétée sous forme de bolus de 500 ml si le temps de clampage s'étendait au-delà de 60 minutes (aucun des patients de cette étude). .

Chaque patient inscrit à l'étude a donné son consentement éclairé écrit pour la publication des données de l'étude, et le protocole de l'étude était conforme aux directives éthiques de la Déclaration d'Helsinki de 1975, comme en témoigne l'approbation a priori du comité local de recherche humaine numéro 171 en date du 13. avril 2022

Prélèvement d'échantillons de sang et biopsies myocardiques Des échantillons de sang périphérique ont été prélevés immédiatement avant la chirurgie et 4, 12, 24 et 48 heures après l'opération et ont été utilisés pour déterminer les concentrations sanguines d'enzymes cardiaques (CK-MB et troponine I).

Des biopsies myocardiques (4 à 14 mg de poids humide) ont été réalisées à l'aide d'une aiguille Tru-cut à partir de l'apex du ventricule gauche chez chaque patient, comme suit :

• Biopsie 1 : « Échantillon au repos », immédiatement après le début de la circulation extracorporelle.
• Biopsie 2 : « Échantillon ischémique », 30 minutes après application du clamp aortique.
• Biopsie 3 : "Échantillon de reperfusion", 20 minutes après le retrait du clamp aortique.

Chaque échantillon a été immédiatement congelé dans de l'azote liquide (-185 degrés C) jusqu'au traitement pour les analyses des acides aminés et de l'acide lactique.

Détermination des enzymes cardiaques (CK-MB et troponine I) Les analyses ont été réalisées à l'aide d'un scanner d'immunofluorescence (iChroma II, Boditech Med Incorporated, Corée et Obelis s.a, Belgique). Les taux sanguins de CK-MB ont été exprimés en mg/dl et les taux de troponine I ont été exprimés en ng/ml.

Détermination des concentrations d'acides aminés et d'acide lactique dans le myocarde Chaque échantillon de biopsie congelé a été pesé (Balance analytique de laboratoire, Sartorius, Allemagne), broyé dans de l'azote liquide et homogénéisé dans 1 000 micromoles de solution saline normale à 0,9 %. Un échantillon de 400 micromoles de l'homogénat a été transféré dans un tube Eppendorf et 100 micromoles d'eau HPLC ont été ajoutées. Chaque échantillon a ensuite été stocké à 4°C pendant une heure, après quoi il a été centrifugé à 10 000 tours/min pendant 5 minutes. Un échantillon de 400 micromoles du surnageant a été filtré à travers un filtre à membrane Vivaspin® 500 0,2 µm (Satorius, Allemagne), transféré dans un tube Eppendorf et a été centrifugé à 10 000 tours/min pendant 5 minutes. Un échantillon de 300 micromoles du filtrat a été transféré dans un tube Eppendorf et un volume égal de tampon de dilution d'échantillon (membraPure, Allemagne) a été ajouté. Cette solution a été utilisée pour déterminer les concentrations de 7 acides aminés (alanine, glutamine, acide glutamique, glycine, lysine, ornithine et taurine) à l'aide de l'analyseur d'acides aminés A300 (ARACUS, membraPure, Allemagne). Les concentrations d'acide lactique ont également été mesurées à l'aide d'un kit et d'un analyseur dédiés à la détermination du lactate plasmatique (LACT2, cobas, Roche Diagnostics GmbH, Allemagne). Les concentrations d'acides aminés et d'acide lactique ont été exprimées en micromoles/g de poids humide.