A szívizomon belüli aminosavak változásának összehasonlítása a Calafiore és a módosított Del Nido kardioplegiás oldatok használata során

Ebbe a vizsgálatba 20 egymást követő, elektív primer koszorúér bypass beültetésen átesett beteget vontak be. A vizsgálatból kizárták azokat a betegeket, akik korábban szívinfarktust szenvedtek, csökkent ejekciós frakciójuk volt, vagy kombinált vagy ismételt műtéten estek át. A betegeket véletlenszerűen besorolták a műtétre a szívizom védelmét szolgáló két módszer egyikével:

• 1. csoport: Calafiore intermittáló antegrád melegvérű cardioplegia (normoterm pumpás vérből, 2 mEq/ml kálium-kloridból és 50%-os magnézium-szulfátból áll). Ezt a kardioplegiás oldatot 37 °C-on adtuk be az aorta keresztbilincsének alkalmazása után, és minden egyes disztális koszorúér-anasztomózis befejezése után megismételtük a korábban leírtak szerint.
• 2. csoport: Módosított del Nido intermittáló antegrád hidegvérű kardioplégiás oldat (750 ml Ringer laktát oldatból, 200 ml pumpavérből, 13 ml 8,4%-os nátrium-hidrogén-karbonátból, 16 ml 20%-os mannitból, 4 ml 50%-os magnézium-szulfátból áll , 13 ml 2%-os lidokain és 13 ml 2 mEq/ml kálium-klorid). Ezt az oldatot 1 literes bólusként adtuk be 3-4 °C-on az aorta keresztbilincs alkalmazása után, és 500 ml-es bólusként ismételték meg, ha a keresztkötési idő 60 percnél hosszabb volt (ebben a vizsgálatban egyik beteg sem). .

Minden vizsgálatba bevont páciens írásos beleegyezését adta a vizsgálati adatok közzétételéhez, és a vizsgálati protokoll megfelelt az 1975-ös Helsinki Nyilatkozat etikai irányelveinek, amint azt a helyi Humánkutatási Bizottság 171. számú, 13-án keltezett előzetes jóváhagyása tükrözi. 2022. április

Vérminták és szívizom biopsziák vétele A perifériás vérmintákat közvetlenül a műtét előtt, valamint a műtét utáni 4, 12, 24 és 48 órában vettük, és a szívenzimek (CK-MB és troponin I) vérkoncentrációjának meghatározására használtuk.

Szívizombiopsziát (4-14 mg nedves tömeg) vettünk Tru-cut tűvel a bal kamra csúcsából minden betegnél az alábbiak szerint:

• 1. biopszia: „Pihenési minta”, közvetlenül az extracorporalis keringés megkezdése után.
• 2. biopszia: „Iszkémiás minta”, 30 perccel az aorta keresztbilincs alkalmazása után.
• 3. biopszia: "Reperfúziós minta", 20 perccel az aorta keresztbilincs eltávolítása után.

Minden mintát azonnal lefagyasztottunk folyékony nitrogénben (-185 °C) az aminosavak és a tejsav elemzéséhez szükséges feldolgozásig.

Szívenzimek (CK-MB és troponin I) meghatározása Az elemzéseket immunfluoreszcens szkennerrel (iChroma II, Boditech Med Incorporated, Korea és Obelis s.a, Belgium) végeztük. A CK-MB vérszintjét mg/dl-ben, a troponin I szintjét pedig ng/ml-ben fejeztük ki.

A szívizom aminosav- és tejsavkoncentrációjának meghatározása Minden fagyasztott biopsziás mintát lemértünk (Laboratory Analytical Balance, Sartorius, Németország), folyékony nitrogénben összetörtük és 1000 mikromol 0,9%-os normál sóoldatban homogenizáltuk. A homogenizátum 400 mikromol-os mintáját egy Eppendorf-csőbe vittük, és 100 mikromol HPLC vizet adtunk hozzá. Mindegyik mintát ezután 4 °C-on egy órán át tároltuk, majd 10 000 kör/perc sebességgel centrifugáltuk 5 percig. A felülúszó 400 mikromol-os mintáját 0,2 µm-es Vivaspin® 500 membránszűrőn (Satorius, Németország) átszűrtük, egy Eppendorf-csőbe vittük át, és 10000 kör/perc sebességgel centrifugáltuk 5 percig. A szűrlet 300 mikromol-os mintáját egy Eppendorf-csőbe vittük át, és azonos térfogatú mintahígító puffert (membraPure, Németország) adtunk hozzá. Ezt az oldatot használtuk 7 aminosav (alanin, glutamin, glutaminsav, glicin, lizin, ornitin és taurin) koncentrációjának meghatározására az A300 Amino Acid Analyzer (ARACUS, membraPure, Németország) segítségével. A tejsavkoncentrációt egy erre a célra szolgáló plazmalaktát-meghatározó készlettel és analizátorral (LACT2, cobas, Roche Diagnostics GmbH, Németország) is mértük. Az aminosavak és a tejsav koncentrációját mikromol/g nedves tömegben fejeztük ki.