Vergelijking van veranderingen in intra-myocardiale aminozuren tijdens gebruik van Calafiore en gemodificeerde Del Nido cardioplegische oplossingen

Twintig opeenvolgende patiënten die een electieve primaire coronaire bypass-transplantatie ondergingen, namen deel aan dit onderzoek. Patiënten werden uitgesloten van dit onderzoek als ze eerder een hartinfarct hadden gehad, een verminderde ejectiefractie hadden of een gecombineerde of herhaalde operatie ondergingen. Patiënten werden willekeurig toegewezen om een ​​operatie te ondergaan met behulp van een van de twee methoden voor myocardiale bescherming:

• Groep 1: Calafiore intermitterende antegrade warmbloedcardioplegie (bestaande uit normothermisch pompbloed, kaliumchloride 2 mEq/ml en magnesiumsulfaat 50%). Deze cardioplegische oplossing werd toegediend bij 37°C na het aanbrengen van de aorta-kruisklem en herhaald na voltooiing van elke distale coronaire anastomose zoals eerder beschreven.
• Groep 2: Gemodificeerde del Nido intermitterende antegrade cardioplegische oplossing voor koud bloed (bestaande uit 750 ml Ringer-lactaatoplossing, 200 ml pompbloed, 13 ml natriumbicarbonaat 8,4%, 16 ml mannitol 20%, 4 ml magnesiumsulfaat 50% 13 ml lidocaïne 2% en 13 ml kaliumchloride 2 mEq/ml). Deze oplossing werd toegediend als een bolus van 1 liter bij 3-4 °C na het aanbrengen van de aorta-kruisklem, en herhaald als een bolus van 500 ml als de kruisklemtijd langer duurde dan 60 minuten (geen van de patiënten in dit onderzoek). .

Elke patiënt die aan het onderzoek deelnam, gaf schriftelijk geïnformeerde toestemming voor de publicatie van de onderzoeksgegevens, en het onderzoeksprotocol voldeed aan de ethische richtlijnen van de Verklaring van Helsinki uit 1975, zoals weerspiegeld in de a priori goedkeuring door de plaatselijke commissie voor menselijk onderzoek, nummer 171, gedateerd 13. april 2022

Afname van bloedmonsters en myocardbiopten Perifere bloedmonsters werden onmiddellijk vóór de operatie en 4, 12, 24 en 48 uur postoperatief afgenomen en gebruikt voor het bepalen van de bloedconcentraties van hartenzymen (CK-MB en troponine I).

Bij elke patiënt werden met behulp van een Tru-cut-naald myocardbiopten (4-14 mg nat gewicht) als volgt uit de top van de linker hartkamer genomen:

• Biopsie 1: "Rustend monster", onmiddellijk na het begin van de extracorporale circulatie.
• Biopsie 2: "Ischemische preparaat", 30 minuten na het aanbrengen van de aortakruisklem.
• Biopsie 3: "Reperfusiemonster", 20 minuten na verwijdering van de aortakruisklem.

Elk monster werd onmiddellijk ingevroren in vloeibare stikstof (-185 graden Celsius) totdat het werd verwerkt voor de analyses van aminozuren en melkzuur.

Bepaling van hartenzymen (CK-MB en troponine I) Analyses werden uitgevoerd met behulp van een immunofluorescentiescanner (iChroma II, Boditech Med Incorporated, Korea en Obelis s.a, België). Bloedspiegels van CK-MB werden uitgedrukt als mg/dl en troponine I-spiegels werden uitgedrukt als ng/ml.

Bepaling van myocardiale aminozuur- en melkzuurconcentraties. Elk bevroren biopsiemonster werd gewogen (Laboratory Analytical Balance, Sartorius, Duitsland), fijngemaakt in vloeibare stikstof en gehomogeniseerd in 1000 micromol 0,9% normale zoutoplossing. Een monster van 400 micromol van het homogenaat werd overgebracht naar een Eppendorf-buis en 100 micromol HPLC-water werd toegevoegd. Elk monster werd vervolgens gedurende één uur bij 4 °C bewaard, waarna het gedurende 5 minuten bij 10.000 toeren per minuut werd gecentrifugeerd. Een monster van 400 micromol van de supernatant werd gefiltreerd door een Vivaspin® 500 membraanfilter van 0,2 µm (Satorius, Duitsland), overgebracht naar een Eppendorf-buis en werd gedurende 5 minuten bij 10.000 rond/min gecentrifugeerd. Een monster van 300 micromol van het filtraat werd overgebracht naar een Eppendorf-buis en een gelijk volume monsterverdunningsbuffer (membraPure, Duitsland) werd toegevoegd. Deze oplossing werd gebruikt voor het bepalen van de concentraties van 7 aminozuren (alanine, glutamine, glutaminezuur, glycine, lysine, ornithine en taurine) met behulp van de A300 Amino Acid Analyzer (ARACUS, membraPure, Duitsland). Melkzuurconcentraties werden ook gemeten met behulp van een speciale plasmalactaatbepalingskit en -analysator (LACT2, cobas, Roche Diagnostics GmbH, Duitsland). Concentraties van aminozuren en melkzuur werden uitgedrukt als micromol/g nat gewicht.