Sammenligning af ændringer i intramyokardieaminosyrer under brug af Calafiore og modificerede Del Nido kardioplegiske løsninger

Tyve på hinanden følgende patienter, der gennemgår elektiv primær koronararterie-bypasstransplantation, blev inkluderet i denne undersøgelse. Patienter blev udelukket fra denne undersøgelse, hvis de havde lidt af tidligere myokardieinfarkt, havde reduceret ejektionsfraktion eller var under kombineret eller gentagen operation. Patienterne blev tilfældigt tildelt til at gennemgå kirurgi ved hjælp af en af ​​to metoder til myokardiebeskyttelse:

• Gruppe 1: Calafiore intermitterende antegrad varmblod kardioplegi (bestående af normotermisk pumpeblod, kaliumchlorid 2 mEq/ml og magnesiumsulfat 50%). Denne kardioplegiske opløsning blev administreret ved 37 grader C efter påføring af aorta-krydsklemmen og gentaget efter afslutning af hver distal koronar anastomose som beskrevet tidligere.
• Gruppe 2: Modificeret del Nido intermitterende antegrad koldblods kardioplegisk opløsning (bestående af 750 ml lakteret Ringer-opløsning, 200 ml pumpeblod, 13 ml natriumbicarbonat 8,4 %, 16 ml mannitol 20 %, 4 ml magnesiumsulfat 50 % 13 ml lidocain 2% og 13 ml kaliumchlorid 2 mEq/ml). Denne opløsning blev indgivet som en 1-liters bolus ved 3-4 grader C efter påføring af aorta-krydsklemmen og gentaget som en 500 ml bolus, hvis krydsklemmetiden var længere end 60 minutter (ingen af ​​patienterne i denne undersøgelse) .

Hver patient, der var tilmeldt undersøgelsen, gav et skriftligt informeret samtykke til offentliggørelsen af ​​undersøgelsesdataene, og undersøgelsesprotokollen var i overensstemmelse med de etiske retningslinjer i Helsinki-erklæringen fra 1975 som afspejlet i en forudgående godkendelse af den lokale humane forskningskomité nummer 171 dateret 13. april 2022

Indsamling af blodprøver og myokardiebiopsier Perifere blodprøver blev udtaget umiddelbart før operationen og 4, 12, 24 og 48 timer postoperativt og blev brugt til bestemmelse af blodkoncentrationer af hjerteenzymer (CK-MB og troponin I).

Myokardiebiopsier (4-14 mg vådvægt) blev taget med en Tru-cut nål fra spidsen af ​​venstre ventrikel hos hver patient som følger:

• Biopsi 1: "Hvilende prøve", umiddelbart efter påbegyndelse af ekstrakorporal cirkulation.
• Biopsi 2: "Iskæmisk prøve", 30 minutter efter påføring af aorta krydsklemmen.
• Biopsi 3: "Reperfusionsprøve", 20 minutter efter fjernelse af aorta krydsklemme.

Hver prøve blev øjeblikkeligt lynfrosset i flydende nitrogen (-185 grader C) indtil bearbejdning til analyser af aminosyrer og mælkesyre.

Bestemmelse af hjerteenzymer (CK-MB og troponin I) Analyser blev udført under anvendelse af en immunfluorescensscanner (iChroma II, Boditech Med Incorporated, Korea og Obelis s.a., Belgien). Blodniveauer af CK-MB blev udtrykt som mg/dl, og niveauer af troponin I blev udtrykt som ng/ml.

Bestemmelse af myokardieaminosyre- og mælkesyrekoncentrationer Hver frosset biopsiprøve blev vejet (Laboratory Analytical Balance, Sartorius, Tyskland), knust i flydende nitrogen og homogeniseret i 1000 mikromol 0,9 % normalt saltvand. En 400 mikromol prøve af homogenatet blev overført til et Eppendorf-rør, og 100 mikromol HPLC-vand blev tilsat. Hver prøve blev derefter opbevaret ved 4 grader C i en time, hvorefter den blev centrifugeret ved 10.000 omg/min i 5 minutter. En 400 mikromol prøve af supernatanten blev filtreret gennem et Vivaspin® 500 membranfilter 0,2 µm (Satorius, Tyskland), overført til et Eppendorf-rør og blev centrifugeret ved 10.000 omg/min i 5 minutter. En 300 mikromol prøve af filtratet blev overført til et Eppendorf-rør, og et tilsvarende volumen prøvefortyndingsbuffer (membraPure, Tyskland) blev tilsat. Denne opløsning blev brugt til at bestemme koncentrationerne af 7 aminosyrer (alanin, glutamin, glutaminsyre, glycin, lysin, ornithin og taurin) under anvendelse af A300 Amino Acid Analyzer (ARACUS, membraPure, Tyskland). Mælkesyrekoncentrationer blev også målt ved hjælp af et dedikeret plasmalaktatbestemmelseskit og analysator (LACT2, cobas, Roche Diagnostics GmbH, Tyskland). Koncentrationer af aminosyrer og mælkesyre blev udtrykt som mikromol/g vådvægt.