Sammenligning av endringer i intramyokardiale aminosyrer under bruk av Calafiore og modifiserte Del Nido kardioplegiske løsninger

Tjue påfølgende pasienter som gjennomgikk elektiv primær koronararterie-bypasstransplantasjon ble inkludert i denne studien. Pasienter ble ekskludert fra denne studien hvis de hadde lidd av tidligere hjerteinfarkt, hadde redusert ejeksjonsfraksjon eller gjennomgikk kombinert eller gjentatt kirurgi. Pasienter ble tilfeldig tildelt til å gjennomgå kirurgi ved å bruke en av to metoder for myokardbeskyttelse:

• Gruppe 1: Calafiore intermitterende antegrad varmblods kardioplegi (bestående av normotermisk pumpeblod, kaliumklorid 2 mEq/ml og magnesiumsulfat 50%). Denne kardioplegiske løsningen ble administrert ved 37 grader C etter påføring av aorta-kryssklemmen og gjentatt etter fullføring av hver distal koronar anastomose som beskrevet tidligere.
• Gruppe 2: Modifisert del Nido intermitterende antegrad kardioplegisk oppløsning av kaldt blod (bestående av 750 ml laktert Ringer-oppløsning, 200 ml pumpeblod, 13 ml natriumbikarbonat 8,4 %, 16 ml mannitol 20 %, 4 ml magnesiumsulfat 50 % 13 ml lidokain 2 % og 13 ml kaliumklorid 2 mekv/ml). Denne løsningen ble administrert som en 1-liters bolus ved 3-4 grader C etter påføring av aorta-kryssklemmen, og gjentatt som en 500 ml bolus hvis kryssklemmetiden var lengre enn 60 minutter (ingen av pasientene i denne studien) .

Hver pasient som ble registrert i studien ga et skriftlig informert samtykke til publisering av studiedataene, og studieprotokollen var i samsvar med de etiske retningslinjene i Helsinki-erklæringen fra 1975 som gjenspeiles i forhåndsgodkjenning av den lokale humanforskningskomiteen nummer 171 datert 13. april 2022

Innsamling av blodprøver og myokardbiopsier Perifere blodprøver ble tatt rett før operasjon og 4, 12, 24 og 48 timer postoperativt og ble brukt til å bestemme blodkonsentrasjoner av hjerteenzymer (CK-MB og troponin I).

Myokardbiopsier (4-14 mg våtvekt) ble tatt med en Tru-cut nål fra toppen av venstre ventrikkel hos hver pasient som følger:

• Biopsi 1: "Hvilende prøve", umiddelbart etter begynnelse av ekstrakorporal sirkulasjon.
• Biopsi 2: "Ischemic specimen", 30 minutter etter påføring av aorta-kryssklemmen.
• Biopsi 3: "Reperfusjonsprøve", 20 minutter etter fjerning av aortakryssklemmen.

Hver prøve ble øyeblikkelig hurtigfrosset i flytende nitrogen (-185 grader C) inntil behandling for analyse av aminosyrer og melkesyre.

Bestemmelse av hjerteenzymer (CK-MB og troponin I) Analyser ble utført ved bruk av en immunfluorescensskanner (iChroma II, Boditech Med Incorporated, Korea og Obelis s.a., Belgia). Blodnivåer av CK-MB ble uttrykt som mg/dl og nivåer av troponin I ble uttrykt som ng/ml.

Bestemmelse av myokardaminosyre- og melkesyrekonsentrasjoner Hver frossen biopsiprøve ble veid (Laboratory Analytical Balance, Sartorius, Tyskland), knust i flytende nitrogen og homogenisert i 1000 mikromol 0,9 % normalt saltvann. En 400 mikromol prøve av homogenatet ble overført til et Eppendorf-rør og 100 mikromol HPLC-vann ble tilsatt. Hver prøve ble deretter lagret ved 4 grader C i én time, hvoretter den ble sentrifugert ved 10 000 omg/min i 5 minutter. En 400 mikromol prøve av supernatanten ble filtrert gjennom et Vivaspin® 500 membranfilter 0,2 µm (Satorius, Tyskland), overført til et Eppendorf-rør og ble sentrifugert ved 10 000 omg/min i 5 minutter. En 300 mikromol prøve av filtratet ble overført til et Eppendorf-rør og et likt volum prøvefortynningsbuffer (membraPure, Tyskland) ble tilsatt. Denne løsningen ble brukt til å bestemme konsentrasjonene av 7 aminosyrer (alanin, glutamin, glutaminsyre, glycin, lysin, ornitin og taurin) ved bruk av A300 Amino Acid Analyzer (ARACUS, membraPure, Tyskland). Melkesyrekonsentrasjoner ble også målt ved bruk av et dedikert plasmalaktatbestemmelsessett og analysator (LACT2, cobas, Roche Diagnostics GmbH, Tyskland). Konsentrasjoner av aminosyrer og melkesyre ble uttrykt som mikromol/g våtvekt.