Comparación de los cambios en los aminoácidos intramiocárdicos durante el uso de soluciones cardiopléjicas de Calafiore y Del Nido modificada

En este estudio se inscribieron veinte pacientes consecutivos sometidos a una revascularización coronaria primaria electiva. Se excluyeron de este estudio los pacientes que habían sufrido un infarto de miocardio previo, tenían una fracción de eyección reducida o se sometían a cirugía combinada o repetida. Los pacientes fueron asignados aleatoriamente para someterse a cirugía utilizando uno de dos métodos de protección miocárdica:

• Grupo 1: Cardioplejía de sangre caliente anterógrada intermitente Calafiore (que consiste en sangre de bomba normotérmica, cloruro de potasio 2 mEq/ml y sulfato de magnesio 50%). Esta solución cardiopléjica se administró a 37 grados C después de la aplicación de la pinza cruzada aórtica y se repitió después de completar cada anastomosis coronaria distal como se describió anteriormente.
• Grupo 2: Solución cardiopléjica de sangre fría anterógrada intermitente del Nido modificada (compuesta por 750 ml de solución de Ringer lactato, 200 ml de sangre de bomba, 13 ml de bicarbonato de sodio al 8,4%, 16 ml de manitol al 20%, 4 ml de sulfato de magnesio al 50% , 13 ml de lidocaína al 2% y 13 ml de cloruro potásico 2 mEq/ml). Esta solución se administró como un bolo de 1 litro a 3-4 grados C después de la aplicación del pinzamiento aórtico, y se repitió como un bolo de 500 ml si el tiempo de pinzamiento se extendía más allá de 60 minutos (ninguno de los pacientes en este estudio) .

Cada paciente inscrito en el estudio dio su consentimiento informado por escrito para la publicación de los datos del estudio, y el protocolo del estudio se ajustó a las pautas éticas de la Declaración de Helsinki de 1975, como se refleja en la aprobación a priori del comité local de investigación en humanos número 171 con fecha 13. abril 2022

Recogida de muestras de sangre y biopsias de miocardio. Se recogieron muestras de sangre periférica inmediatamente antes de la cirugía y a las 4, 12, 24 y 48 horas del postoperatorio y se utilizaron para la determinación de las concentraciones sanguíneas de enzimas cardíacas (CK-MB y troponina I).

Se tomaron biopsias de miocardio (4-14 mg de peso húmedo) utilizando una aguja Tru-cut desde el vértice del ventrículo izquierdo en cada paciente de la siguiente manera:

• Biopsia 1: “Muestra en reposo”, inmediatamente después del inicio de la circulación extracorpórea.
• Biopsia 2: "Muestra isquémica", 30 minutos después de la aplicación del pinzamiento aórtico.
• Biopsia 3: "Muestra de reperfusión", 20 minutos después de la retirada del pinzamiento aórtico.

Cada muestra se congeló inmediatamente en nitrógeno líquido (-185 grados C) hasta su procesamiento para los análisis de aminoácidos y ácido láctico.

Determinación de enzimas cardíacas (CK-MB y troponina I) Los análisis se realizaron mediante un escáner de inmunofluorescencia (iChroma II, Boditech Med Incorporated, Corea y Obelis s.a, Bélgica). Los niveles sanguíneos de CK-MB se expresaron como mg/dl y los niveles de troponina I se expresaron como ng/ml.

Determinación de las concentraciones de aminoácidos y ácido láctico en el miocardio. Cada muestra de biopsia congelada se pesó (Laboratory Analytical Balance, Sartorius, Alemania), se trituró en nitrógeno líquido y se homogeneizó en 1000 micromol de solución salina normal al 0,9%. Se transfirió una muestra de 400 micromoles del homogeneizado a un tubo Eppendorf y se añadieron 100 micromoles de agua para HPLC. Luego, cada muestra se almacenó a 4 grados C durante una hora, después de lo cual se centrifugó a 10.000 vueltas/min durante 5 minutos. Se filtró una muestra de 400 micromoles del sobrenadante a través de un filtro de membrana Vivaspin® 500 de 0,2 µm (Satorius, Alemania), se transfirió a un tubo Eppendorf y se centrifugó a 10.000 vueltas/min durante 5 minutos. Se transfirió una muestra de 300 micromoles del filtrado a un tubo Eppendorf y se añadió un volumen igual de tampón de dilución de muestra (membraPure, Alemania). Esta solución se usó para determinar las concentraciones de 7 aminoácidos (alanina, glutamina, ácido glutámico, glicina, lisina, ornitina y taurina) usando el analizador de aminoácidos A300 (ARACUS, membraPure, Alemania). Las concentraciones de ácido láctico también se midieron utilizando un kit y analizador específico para la determinación de lactato en plasma (LACT2, cobas, Roche Diagnostics GmbH, Alemania). Las concentraciones de aminoácidos y ácido láctico se expresaron como micromol/g de peso húmedo.