SIRT-1、NLRP3 インフラマソームおよび LncRNA による喫煙者の非外科的歯周治療
喫煙者における非外科的歯周治療が SIRT-1、NLRP3 インフラマソームのタンパク質、および長い非コード RNA に及ぼす影響
この観察の目的は、インターロイキン 18 (IL-18)、インターロイキン (IL-1β)、腫瘍壊死因子アルファ (TNF-α)、インターロイキン 10 (IL-10)、形質転換のレベル間の関係を分析することです。成長因子ベータ (TGF-β)、ヌクレオチド結合オリゴマー化ドメイン様受容体タンパク質 3 (NLRP3)、アポトーシス関連スペック様タンパク質 (ASC)、カスパーゼ-1、サーチュイン 1 (SIRT-1)、長鎖非コード RNA ( lncRNA) 歯周炎患者および喫煙者の唾液、血清、および末梢単核血球 (PMBC) に含まれる低分子核小体 RNA 宿主遺伝子 5 (SNHG5)、および母性発現遺伝子 3 (MEG3) を分析し、非外科的治療後のこれらのバイオマーカーの変化を調べる歯周治療（NSPT）、およびこの関係を媒介する可能性のある潜在的な交絡因子を評価します。
回答することを目的とした主な質問は次のとおりです。
質問 1: 上記のバイオマーカーと歯周炎および喫煙の間に関係はありますか? 質問 2: 喫煙者と非喫煙者の NSPT 後に上記のバイオマーカーはどのように変化しますか?
調査の概要
詳細な説明
この研究には、非喫煙歯周炎 (NSP)、喫煙歯周炎 (SP)、非喫煙健康対照 (HC)、および喫煙健康対照 (HCS) の 4 つのグループがあります。
研究の歯周炎グループ（NSPおよびSP）には、2017年の歯周病およびインプラント周囲疾患の分類に関する世界ワークショップのコンセンサスレポートに基づいて、臨床的にステージIIおよびIII、全身性、グレードB、Cの歯周炎と診断された患者が含まれます。状態、および全身的に健康な個人。 30%を超える部位で臨床的アタッチメントロスが3mm以上、少なくとも6本の歯でプロービング深さが5mm以上で、X線撮影による骨欠損が冠状3分の1の歯根の中央3分の1以上に及ぶ患者が含まれる。 歯周病に関連して歯を失った患者が 4 歯以下の患者が含まれます。 疾患の進行率は、パノラマ X 線写真によって確認された疾患進行の直接的な証拠と、バイオフィルムの蓄積に比例する間接的な破壊の証拠に基づいて、B または C クラスに格付けされます。 喫煙歯周炎グループ (SP) および喫煙健康グループ (HCS) には、1 日あたり 10 本を超えるタバコを 5 年間以上喫煙したと報告した参加者が含まれますが、非喫煙グループ (NSP および HC) の参加者は、次のような参加者になります。決して喫煙をしていないと報告した。
臨床測定と非外科的歯周治療
唾液および血清サンプルは、最初と NSPT の 3 か月後にすべての患者から収集されます。 臨床パラメータも初回と 3 か月目に記録されます。 歯垢指数 (PI) と歯肉指数 (GI) は、歯ごとに 4 つの部位で記録されます。 口全体のプロービング深さ（PD）と臨床的付着レベル（CAL）が 6 か所の歯ごとに詳細に記録され、出血領域の割合がプロービング後 20 秒以内に有無としてバイナリ スコアリング システムを使用して記録されます。 校正済み歯周病専門医 (ZTE) は、手動検査を使用してすべての臨床パラメーターを記録します。 一貫した検査者内精度を達成するために、少数のパイロット集団で研究を開始する前に検査者キャリブレーションが提供されます。 ベースラインサンプルと臨床パラメータ記録の収集後、すべての患者は、患者教育、全口スケーリング、ルートプレーニング（SRP）、および同じ経験豊富な臨床医（ZTE）からの口腔衛生指導を含む初期歯周治療を受けます。
実験室での測定
各患者には、サンプリング前の 12 時間は飲食および口腔衛生行為を控えるよう指示されます。 血清と唾液のサンプルは、歯科検査前の朝 8:00 から 10:00 の間に各患者から採取されます。
血液サンプリング: 研究の範囲内で、歯周病科の専門看護師によって各人の肘前静脈から合計 5 mL の血液が採取されます。
血清採取の場合、静脈穿刺を行って血液サンプルを採取し、直ちに氷上で冷却し、4℃で遠心分離（800rpm、10分間）します。 唾液サンプルの収集後、直ちに 4℃ で遠心分離します (1000 rpm、2 分間)。 サンプリング後、血清サンプルと唾液サンプルは分析まで -80°C で保存されます。 NLRP3、ASC、カスパーゼ-1、IL-18、IL-1ベータ、TNF-アルファ、IL-10、TGF-ベータ、およびSIRT-1の濃度は、両方の特異的酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）キットによって分析されます。血清と唾液のサンプル。 LncRNA SNHG5 および MEG3 は、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応 (RT-PCR) を使用して検査されます。
PMBC 中の IL-18、IL-1beta、TNF-alfa、IL-10、TGF-beta、NLRP3、SIRT-1、lncRNA SNHG5、および MEG3 レベルは、RT-PCR を使用して評価されます。 各キットのすべての分析ステップは、メーカーが推奨するプロトコルを使用して評価されます。
統計分析：
統計分析は、市販のソフトウェア (SPSS バージョン 22.0、SPSS) を使用して実行されます。 この研究では、<0.05 の有意値 (p 値) が使用されます。 この研究は前向き対照臨床試験として設計されています。 研究のサンプルサイズは、R Statistical Language プログラム (バージョン 4.1.2; R 統計コンピューティング財団、オーストリア、ウィーン。 http://www.r-project.org)。 各グループに少なくとも 25 人の個人を含め、一元配置分散分析を有意水準 5%、統計検出力 80%、効果サイズ 0.4 (コーエンの f=0.4) で実行して決定することが計画されました。研究グループ間で炎症因子に有意差がある場合（喫煙歯周炎、喫煙で歯周が健康、非喫煙で歯周炎、非喫煙で歯周が健康）。
縦断的分析には、研究プロトコル全体を完了した患者からのデータのみが含まれます。
研究の種類
入学 (実際)
連絡先と場所
研究場所
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Konya、トルコ（Türkiye）
- Necmettin Erbakan University Faculty of Dentistry, Department of Periodontology
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
- 高齢者
健康ボランティアの受け入れ
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
- 18歳から65歳までの間であること
- 歯周検査により「歯周健康」または「歯周炎」と診断された方
- 全身疾患（糖尿病、心血管疾患など）を伴わないこと。
- 研究への参加に同意する
除外基準:
- 避妊薬の使用
- 抗炎症薬、抗生物質、免疫抑制薬、またはその他の薬剤の使用 - 過去6か月以内の研究結果に影響を与える可能性がある
- 過度のアルコール摂取歴
- 妊娠中または授乳中
- 過去6ヶ月以内に歯周病治療を受けている方
- 研究への参加の拒否
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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非喫煙性歯周炎 (NSP)
非喫煙者、臨床的アタッチメントロスが30%以上の部位で3mm以上、少なくとも6本の歯でプロービング深さが5mm以上、X線撮影による骨損失が冠状歯根の中央3分の1以上に及ぶと報告した参加者3番目が含まれます。
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臨床測定と臨床検査測定 最初にすべての患者から唾液と血清のサンプルが収集されます。 臨床パラメータも最初に記録されます。 歯垢指数 (PI) と歯肉指数 (GI) は、歯ごとに 4 つの部位で記録されます。 口全体のプロービング深さ（PD）と臨床的付着レベル（CAL）が 6 か所の歯ごとに詳細に記録され、出血領域の割合がプロービング後 20 秒以内に有無としてバイナリ スコアリング システムを使用して記録されます。 校正済み歯周病専門医 (ZTE) は、手動検査を使用してすべての臨床パラメーターを記録します。 サンプリング後、血清サンプルと唾液サンプルは分析まで -80°C で保存されます。 NLRP3、ASC、カスパーゼ-1、IL-18、IL-1ベータ、TNF-アルファ、IL-10、TGF-ベータ、およびSIRT-1の濃度は、両方の特異的酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）キットによって分析されます。血清と唾液のサンプル。 LncRNA SNHG5 および MEG3 は、リアルタイム PCR を使用して検査されます。
超音波機器を使用した治療を行った後、グレーシーキュレットを使用したルートプレーニングを行います。
SRP は 2 回の訪問で完了します。各訪問は 2 日ごとの象限で構成されます。
口腔衛生指導には、適切なブラッシング技術のデモンストレーションと、必要に応じて歯間清掃補助具の使用が含まれます。
唾液と血清のサンプルは 3 か月後のフォローアップ訪問時に再度収集され、すべての臨床パラメーターの記録は同じ臨床医 (ZTE) によって繰り返され、口腔衛生の指示が必要に応じて再確認されます。
3 か月間の記録とサンプルを収集した後、持続性ポケットを持つすべての患者に標準的な歯周炎治療プロトコルが適用されます。
「非外科的歯周治療前」という見出しの下に記載されているすべての臨床評価および検査室評価は、NSPT 後 3 か月目に繰り返されます。
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喫煙歯周炎 (SP)
5年以上、1日10本以上の喫煙を報告し、臨床的アタッチメントロスが30％以上の部位で3mm以上、少なくとも6本の歯でプロービング深さが5mm以上、X線撮影による骨損失が中央部以上に広がっていると報告した参加者冠状 3 分の 1 の根元の 3 分の 1 が含まれます。
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臨床測定と臨床検査測定 最初にすべての患者から唾液と血清のサンプルが収集されます。 臨床パラメータも最初に記録されます。 歯垢指数 (PI) と歯肉指数 (GI) は、歯ごとに 4 つの部位で記録されます。 口全体のプロービング深さ（PD）と臨床的付着レベル（CAL）が 6 か所の歯ごとに詳細に記録され、出血領域の割合がプロービング後 20 秒以内に有無としてバイナリ スコアリング システムを使用して記録されます。 校正済み歯周病専門医 (ZTE) は、手動検査を使用してすべての臨床パラメーターを記録します。 サンプリング後、血清サンプルと唾液サンプルは分析まで -80°C で保存されます。 NLRP3、ASC、カスパーゼ-1、IL-18、IL-1ベータ、TNF-アルファ、IL-10、TGF-ベータ、およびSIRT-1の濃度は、両方の特異的酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）キットによって分析されます。血清と唾液のサンプル。 LncRNA SNHG5 および MEG3 は、リアルタイム PCR を使用して検査されます。
超音波機器を使用した治療を行った後、グレーシーキュレットを使用したルートプレーニングを行います。
SRP は 2 回の訪問で完了します。各訪問は 2 日ごとの象限で構成されます。
口腔衛生指導には、適切なブラッシング技術のデモンストレーションと、必要に応じて歯間清掃補助具の使用が含まれます。
唾液と血清のサンプルは 3 か月後のフォローアップ訪問時に再度収集され、すべての臨床パラメーターの記録は同じ臨床医 (ZTE) によって繰り返され、口腔衛生の指示が必要に応じて再確認されます。
3 か月間の記録とサンプルを収集した後、持続性ポケットを持つすべての患者に標準的な歯周炎治療プロトコルが適用されます。
「非外科的歯周治療前」という見出しの下に記載されているすべての臨床評価および検査室評価は、NSPT 後 3 か月目に繰り返されます。
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禁煙による歯周の健康 (HC)
参加者は喫煙したことがなく、歯周病が健康であると報告しました。
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臨床測定と臨床検査測定 最初にすべての患者から唾液と血清のサンプルが収集されます。 臨床パラメータも最初に記録されます。 歯垢指数 (PI) と歯肉指数 (GI) は、歯ごとに 4 つの部位で記録されます。 口全体のプロービング深さ（PD）と臨床的付着レベル（CAL）が 6 か所の歯ごとに詳細に記録され、出血領域の割合がプロービング後 20 秒以内に有無としてバイナリ スコアリング システムを使用して記録されます。 校正済み歯周病専門医 (ZTE) は、手動検査を使用してすべての臨床パラメーターを記録します。 サンプリング後、血清サンプルと唾液サンプルは分析まで -80°C で保存されます。 NLRP3、ASC、カスパーゼ-1、IL-18、IL-1ベータ、TNF-アルファ、IL-10、TGF-ベータ、およびSIRT-1の濃度は、両方の特異的酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）キットによって分析されます。血清と唾液のサンプル。 LncRNA SNHG5 および MEG3 は、リアルタイム PCR を使用して検査されます。 |
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喫煙による歯周の健康 (HCS)
1日あたり10本以上喫煙し、歯周病が健康であると報告した参加者。
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臨床測定と臨床検査測定 最初にすべての患者から唾液と血清のサンプルが収集されます。 臨床パラメータも最初に記録されます。 歯垢指数 (PI) と歯肉指数 (GI) は、歯ごとに 4 つの部位で記録されます。 口全体のプロービング深さ（PD）と臨床的付着レベル（CAL）が 6 か所の歯ごとに詳細に記録され、出血領域の割合がプロービング後 20 秒以内に有無としてバイナリ スコアリング システムを使用して記録されます。 校正済み歯周病専門医 (ZTE) は、手動検査を使用してすべての臨床パラメーターを記録します。 サンプリング後、血清サンプルと唾液サンプルは分析まで -80°C で保存されます。 NLRP3、ASC、カスパーゼ-1、IL-18、IL-1ベータ、TNF-アルファ、IL-10、TGF-ベータ、およびSIRT-1の濃度は、両方の特異的酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）キットによって分析されます。血清と唾液のサンプル。 LncRNA SNHG5 および MEG3 は、リアルタイム PCR を使用して検査されます。 |
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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治療前の臨床評価および検査室評価
時間枠：ベースライン
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研究における4つのグループの臨床測定値とIL-18、IL-1ベータ、TNF-アルファ、IL-10、TGF-ベータ、NLRP3、SIRT-1、lncRNA SNHG5、およびMEG3レベルの比較
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ベースライン
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治療後 3 か月の臨床測定値と臨床検査値の比較
時間枠：NSPT後3ヶ月目
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臨床測定値と、歯周炎グループ (NSP および SP) の 3 か月後の IL-18、IL-1beta、TNF-alpha、IL-10、TGF-beta、NLRP3、SIRT-1、lncRNA SNHG5、および MEG3 レベルの比較処理
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NSPT後3ヶ月目
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協力者と研究者
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
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